医学检验技术专业本科生毕业论文总体质量的回顾性分析

对该院检验科指导的医学检验技术专业本科生毕业论文的总体情况进行回顾性分析,为提高科室老师带教水平和论文总体质量提供理论依据。2015年1月1日至2021年12月31日,该院检验科共指导本科实习生完成毕业论文141篇。其中合格论文141篇(100.00%),优秀论文12篇(8.51%),发表论文33篇(23.40%)。生化组毕业论文总数最多,共30篇(21.28%,30/141);微生物组优秀论文数最多,共4篇(33.33%,4/12)。发表论文数排名前5的专业组有:临检组7篇(28.00%,7/25),生化组6篇(20.00%,6/30),免疫组6篇(37.50%,6/16),微生物组6篇(27.27%,6/22),血液组4篇(33.33%,4/12)。各专业组之间优秀论文和发表论文情况比较,差异均无统计学意义(P>0.05),均具较强的科研能力。检验科在做好实习生日常管理和临床教学的同时,应高度重视实习生论文的进度要求和质量监督。

不同方法检测黏液型铜绿假单胞菌药物敏感性结果准确性探讨

目的探讨黏液型铜绿假单胞菌(PA)药物敏感性检测方法准确性,以找出适合临床开展的、准确的药物敏感性检测方法。方法分别用药物敏感性纸片琼脂扩散法(K-B法)、假单胞菌和非发酵菌药物敏感性试剂盒(ATB PSE5)、仪器法(MicroScan WalkAway 96 plus和VITEK 2)和微量肉汤稀释法同时检测66株黏液型PA,以微量肉汤稀释法作为参考方法,其余方法作为测试方法进行对照分析。结果 K-B法与微量肉汤稀释法的完全符合率(CA)为92.63%,严重错误(VME)为0.30%,重大错误(ME)为3.13%,一般错误(MIE)为3.94%;ATB PSE5与与微量肉汤稀释法的CA为88.89%,VME为0.83%,ME为5.83%,MIE为4.44%;MicroScan仪器法与微量肉汤稀释法的CA为89.38%,VME为0.34%,ME为5.19%,MIE为5.07%。VITEK 2因结果缺失严重未进行比较。结论临床常用检测PA药物敏感性的方法中,以K-B法检测黏液型PA最为可靠,但应延长孵育时间至48 h或放至CO2孵箱24 h后读取结果更为直观、准确。

念珠菌尿路感染的菌株分布及耐药率分析

目的分析广州中医药大学第二临床医院内泌尿系统感染检出的念珠菌菌群分布和耐药情况,为抗菌药物的选择提供科学依据。方法回顾性分析2019年至2022年广州中医药大学第二临床医学院内泌尿系统标本培养检出的念珠菌结果,结合菌株开展的五种抗真菌药物的敏感性试验结果,分析泌尿系统念珠菌感染的菌株分布及抗真菌药物的耐药情况。结果经培养及菌种鉴定,共从675位患者泌尿系统中分离得到念珠菌703株,其中男性271例,女性404例。平均年龄(70.7±17.0)岁,年龄中位数74岁。白色念珠菌检出比例最高,共355株,占检出总数的50.5%,光滑念珠菌检出163株(23.2%),热带念珠菌检出134株(19.1%),这三种念珠菌占总检出的92.8%。热带念珠菌检出比例从2019年的15.7%上升至2022年的20.8%。急诊病区检出163株、非急诊病区检出540株。所有菌株对两性霉素B均敏感,其他药物耐药率从低到高分别为5-氟胞嘧啶(1.6%)、伏立康唑(6.1%)、氟康唑(25.6%)、伊曲康唑(33.6%)。不同念珠菌对抗真菌药物的敏感性差异较大,而热带念珠菌对唑类药物耐药率近年来上升,且其唑类药物交叉耐药情况也最严重。结论广州中医药大学第二临床医学院念珠菌尿路感染以白色念珠菌为主,热带念珠菌检出率上升;唑类药物耐药情况比两性霉素B和5-氟胞嘧啶严重。临床应重视抗生素的合理使用,加强念珠菌的检测和耐药性分析。

2018—2020年多中心耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的耐药及分布特点

目的分析全国11家三级医院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的分布和耐药情况,为预防和控制医院感染,合理使用抗生素提供依据。方法回顾性分析2018—2020年,全国11家三级医院临床分离的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌分布及耐药性特点;药敏分析采用WHONET5.6软件。结果2018—2020期间11家三级医院临床各类标本中共检出鲍曼不动杆菌17599株,检出率8.05%,其中耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)检出11508株,占检出鲍曼不动杆菌的65.39%;11家医院中10家医院检出CRAB在鲍曼不动杆菌中的占比>50%;检出CRAB患者中以70岁以上患者最多,占全部患者的28.9%~35.3%;CRAB主要分离自呼吸道标本(78.59%)、脓/分泌物标本(5.81%)及血培养标本(4.02%);CRAB对常用抗菌药物耐药性都处于较高水平,5种抗生素耐药率在95%以上,2种抗生素耐药率在85%以上,妥布霉素、阿米卡星、左氧氟沙星、复方磺胺甲恶唑耐药率介于61%~81%之间,对米诺环素相对较为敏感。结论整体来看鲍曼不动杆菌中CRAB占比一直较高,各地区各级医院应继续做好医院感染的监测,加强对多重耐药菌的管理工作,指导临床准确用药,延缓耐药菌上升趋势。

医院内铜绿假单胞菌感染的临床分布及耐药性变迁

目的了解医院内感染铜绿假单胞菌的临床分布及耐药性变迁情况,为临床治疗铜绿假单胞菌院内感染提供参考依据。方法回顾性分析广东省中医院所属四家医院2006—2010年间住院患者分离铜绿假单胞菌病区分布、不同来源菌株药敏结果、连续5年耐药性变化及耐药组合分析情况。结果 5年间铜绿假单胞菌分离率最高的科室分别为重症监护室、呼吸内科和脑外科。痰标本检出铜绿假单胞菌最多,占83.7%,且痰标本分离铜绿假单胞菌比其他标本分离菌株更耐药。药敏结果显示氨曲南、左氧氟沙星、环丙沙星、头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星耐药率呈逐年下降的趋势。耐药组合分析发现所分离铜绿假单胞菌对3种以上抗生素耐药的多重耐药菌占35.0%,对所分析抗生素全部耐药的菌株占总数的8.4%。结论医院内获得铜绿假单胞菌感染以下呼吸道感染为主,且耐药性明显高于其他部位分离菌株。铜绿假单胞菌多重耐药菌株检出比例较高,耐药机制复杂,临床应根据其分布特点和药敏结果合理用药。

铜绿假单胞菌获得性金属β-内酰胺酶及其相关基因研究

目的了解该院铜绿假单胞菌(Pae)金属酶的产生及其相关基因携带情况。方法采用多种方法进行Pae金属酶初筛、确证试验,并检测4种金属酶基因。结果产金属酶菌株初筛阳性率为53.5%,用头孢他啶(CAZ)/乙二胺四乙酸(EDTA)、CAZ/2-巯基丙酸(2-MPA)、亚胺培南(IMP)/EDTA、IMP/2-MPA检测阳性率分别为13.95%、15.12%、17.44%、18.60%。PCR扩增结果仅IMP-1出现阳性,阳性率达16.28%,其余3种金属酶基因均为阴性。结论不同方法对金属酶检测结果不尽相同;携带IMP-1金属酶基因是该院Pae耐碳青霉烯类等多种药物的主要原因。

腹透液标本检出1株吉氏玫瑰单胞菌

1病历摘要患者,女,67岁,2009年诊断为糖尿病肾病（V期）,2011年初行腹膜透析置管术,开始维持性腹膜透析治疗。3 d前出现腹痛腹泻,于我院门诊就诊,予＂气滞胃痛胶囊＂、＂固肠止泻丸＂治疗后腹泻得到控制,但腹痛未缓解,伴头晕不适,后收入我院肾内科。入院时患者贫血貌,脐周压痛（＋）,反跳痛（＋）,双侧肾区扣击痛（-）,双侧肋脊点、肋腰点无压痛,双侧输尿管行经区无压痛,

licD2基因缺陷导致肺炎链球菌毒力下降

目的:licD2是掌控肺炎链球菌生长所需物质胆碱代谢最重要的基因.本研究探索licD2基因的缺陷是否影响细菌毒力.方法:采用插入复制失活的方法缺陷licD2基因,通过相对定量RT-PCR分析其毒力因子表达情况,并利用动物体内试验观察licD2基因缺陷菌株毒力改变.结果:RT-PCR显示licD2缺陷菌株毒力因子表达低于野生菌,两组比较P<0.05;转化试验发现缺陷菌株转化力下降甚至消失;小鼠毒力试验结果野生菌株半数致死时间<1 d,而缺陷菌株半数致死时间为>14 d,P<0.001,差异有显著性;缺陷菌在小鼠体内被清除速度也显著快于野生菌.结论:结果提示licD2基因的缺陷使自然转化力下降,多种毒力因子表达减弱,细菌毒力降低.

三种中药对多重耐药铜绿假单胞菌抑菌作用研究

目的研究3种单味中药鱼腥草、夏枯草、黄芩成分对多重耐药铜绿假单胞菌(PAE)的体外抑菌作用,为中药治疗多重耐药铜绿假单胞菌感染提供实验依据。方法先用纸片扩散(K-B)法确认收集菌株的耐药表型,再采用常量肉汤稀释法,将鱼腥草、夏枯草、黄芩进行系列倍比稀释,检测3种单味中药对多重耐药PAE的最低抑菌浓度(MIC)。结果多重耐药PAE对亚胺培南、头孢噻肟全部耐药,对喹诺酮类,第三、四代头孢菌素耐药率较高,对氨基糖苷类耐药率较低。中药MIC检测结果显示,鱼腥草、黄芩、夏枯草对多重耐药PAE均有不同程度的抑制作用,其中位MIC分别为55.6、48.3、15.8 mg/mL。结论 3种中药对多重耐药PAE均有一定的抑制作用,其中夏枯草可以在比较低的浓度下表现出对多重耐药PAE的抑制作用。

MRSA对万古霉素和替考拉宁的异质性耐药情况及分子分型

目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对临床常用抗生素万古霉素(VAN)和替考拉宁(TEC)的异质性耐药情况及分子分型,为临床合理应用抗菌药物提供实验依据,为MRSA的异质性耐药机制研究奠定基础。方法收集2016年1月至2020年12月间中山大学附属第一医院临床分离的305株MRSA,采用多重PCR进行SCCmec分型,用菌群谱型分析微量滴定法(MPAP)初筛、群体谱型分析法(PAP)确认MRSA对VAN和TEC的异质性耐药情况。结果SCCmec分型中Ⅳa型占35.7%(109/305),Ⅳb型2.0%(6/305),Ⅳc型0.3%(1/305),Ⅳd型0.7%(2/305),Ⅱ型25.9%(79/305),Ⅲ型10.2%(31/305),Ⅴ型5.6%(17/305),未能分型19.7%(60/305)。血液和脓液标本中分离的MRSA主要为SCCmecⅣ型,分别占47.9%(45/94)和43.0%(43/100);痰液标本中分离的MRSA主要为SCCmecⅡ型,占50.5%(35/111)。PAP法显示MRSA对VAN和TEC的异质性耐药阳性率分别为35.5%(104/293)和59.9%(163/272)(P<0.05)。不同SCCmec型别的MRSA对TEC的异质性耐药率分别为:Ⅳ型69.7%(76/109),Ⅴ型56.3%(9/16),Ⅲ型48.1%(13/27),Ⅱ型44.6%(29/65),未能分型65.5%(36/55),差异有统计学意义(P<0.05),SCCmec分型与MRSATEC-HR有一定相关性(r=0.22)。不同SCCmec型别的MRSA对VAN的异质性耐药率分别为:Ⅳ型40.7%(48/118),Ⅴ型29.4%(5/17),Ⅱ型29.2%(21/72),Ⅲ型23.3%(7/30),未能分型41.1%(23/56),差异无统计学意义(P>0.05),SCCmec分型与MRSA-VAN-HR不存在相关性。结论临床分离的MRSA SCCmec型别以SCCmecⅣ型为主,其次是Ⅱ型。MRSA对VAN与TEC有较高的异质性耐药率,对TEC的异质性耐药率高于VAN。MRSA的SCCmec型别与其对TEC的异质性耐药有一定的相关性。

VITEK2筛选鲍曼不动杆菌产头孢菌素酶可靠性评价

目的验证和评价VITEK2高级专家系统（AES）判定鲍曼不动杆菌产头孢菌素酶AmpC的可靠性。方法首先收集2009年l～8月经VITEK2的AES判定为产AmpC酶鲍曼不动杆菌，用AmpC纸片法进行确证试验，最后用聚合酶链反应验证阳性株是否存在AmpC基因。结果15株AES判断为产AmpC酶的菌株，经AmpC纸片法确证试验为阳性，其中12株阳性产酶株可以检测到AmpC基因。132株AES判断为不产AmpC酶的菌株中，经AmpC纸片法验证均为阴性。结论VITEK2AES可以很好地预测鲍曼不动杆菌产AmpC酶情况，有助于快速、准确地检测鲍曼不动杆菌这一相关耐药机制，为临床治疗多重耐药鲍曼不动杆菌提供更有力的支持。

自身猝灭探针定量PCR检测HCV方法的建立

目的建立自身猝灭荧光探针定量PCR技术检测HCV方法。方法构建重组质粒pMD18-T-HCV5′NCR作为标准品，并通过Sigma在线软件设计自身猝灭探针，优化定量PCR体系，并进行方法学评价。结果建立了自身猝灭荧光探针的定量PCR方法，线性为10^1-10^10copies／μl；灵敏度达50copies／μl；批内CV为6．1％，批间CV为6．5％，日间CV为6．8％；特异性为100％，与其他肝炎病毒无交叉反应。与紫外定量方法比较，结果差异无显著性，且高度相关。结论以自身猝灭荧光探针建立的HCV荧光定量PCR检测方法，灵敏度高、特异性强，为新型试剂盒的开发奠定了基础。

肺炎链球菌致脑膜炎的分子生物学研究进展

肺炎链球菌是引起细菌性脑膜炎的主要病原菌之一,常导致严重的神经系统后遗症和较高的病死率.本文总结了肺炎链球菌引起脑膜炎的主要毒力因子及其作用,肺炎链球菌通过血脑屏障的机制及其引起的病理生理效应等方面的最新进展.随着对链球菌性脑膜炎认识的深入,可望为临床治疗提供帮助,降低其发病率,减轻脑损伤.

自由基与肿瘤

自由基参与许多基本生命过程，很多肿瘤患者血清中自由基呈现异常，许多疾病的发生发展均涉及自由基反应，该反应是多种疾病和机体损伤的分子病理基础，其致损伤机制主要是攻击DNA链致突变，脂质过氧化的炎症介质引起的损害作用，最终导致细胞生长失控，肿瘤发生，另一方面，临床上放疗和很多化疗药物作用的内在机制就是产生大量的自由基导致不可逆转的组织损伤来达到治疗目的。大量的实验室研究与临床调查已充分证明自由基与人类肿瘤的发生，发展及防治关系密切。

铜绿假单胞菌“泛耐株”耐药相关基因研究

目的研究"泛耐"铜绿假单胞菌中多种耐药基因的存在情况及耐药机制。方法采用聚合酶链反应(PCR)法检测22株"泛耐"铜绿假单胞菌的β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因、喹诺酮类耐药基因、耐消毒剂基因(qacE△1-sul1)和整合酶基因。结果PCR扩增结果显示22株菌中oprD2、blaCARB、gyrA、aac(6')-Ⅰb、ant(2″)-Ⅰ和qacE△1-sul1基因均阳性;blaSHV、blaSPM、blaGIM、blaDHA、blaOXA-10、blaGES、blaPER、aac(3')-Ⅰ和aac(6')-Ⅱ基因均阴性;blaIMP、blaTEM、blaVEB、aac(3')-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、intⅠ1和blaVIM阳性率分别为95.5%、77.3%、13.6%、4.5%、4.5%、4.5%和4.5%。结论oprD2基因阳性说明这些泛耐菌株中外膜蛋白并未缺失,多种耐药基因同时存在是本研究中铜绿假单胞菌"泛耐"的根本原因。

鼠伤寒沙门菌分子分型及耐药性特点

目的了解广州市鼠伤寒沙门菌的分子分型以及耐药性特点。方法利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型技术对鼠伤寒沙门菌进行分子分型,采用纸片扩散(K-B)法进行药敏试验,且采用WHONET 5.6软件对药敏结果进行耐药分析。结果 PFGE结果聚类分析将44株鼠伤寒沙门菌分为15型,其中PFGE9型、PFGE8型、PFGE3型为广州市的优势菌型,菌株比例为54.5%(24/44)。耐药表型分型可将其分为21型,多重耐药菌占61.4%(27/44)。结论广州市鼠伤寒沙门菌分子分型呈多样性,分离株的多重耐药较为严重。

肺炎链球菌体内诱导基因的筛选及初步鉴定

为筛选鉴定肺炎链球菌宿主体内诱导的基因，寻找潜在的抗生素作用靶点和疫苗候选者，应用体内表达技术，以肺炎链球菌荚膜合成的关键基因galU作为体内报告基因，利用其缺陷体不能合成荚膜多糖，从而不能在宿主体内存活的特点，筛选鉴定肺炎链球菌体内诱导基因。首先，把肺炎链球菌基因组DNA的随机酶切片段（200～500bp）克隆到含有体内、体外双重报告基因（galU—lacZ）的报告载体pEVP3-galU的BlgⅡ位点，将获得的质粒库转化肺炎链球菌galU缺陷菌株，得到肺炎链球菌体内启动子诱捕文库，将此文库去感染BALB／c小鼠，经过两轮体内筛选，在涂布有X-gal的TSA血清平板上得到了165个白色菌落，对插入的随机片段进行测序及生物信息学分析，共证实15个不同的体内诱导基因片段，8个为单独的ORF，7个为含有多个ORFs的操纵子结构，它们分别参与细菌在宿主体内的定植与粘附、能量代谢、物质转运、转录调节、DNA复制与重组、细胞壁合成等，另外还包括功能不明的假想蛋白。其中部分ORFs可能与细菌毒力相关，可以作为候选疫苗和药物的靶标。

2018—2020年多中心儿童感染主要分离菌分布及耐药性分析

目的探讨2018至2020年国内多中心儿童患者(≤14岁)分离细菌分布及耐药性情况,为临床合理使用抗菌药物提供实验室依据及指导。方法按照全国细菌耐药监测网监测方案要求,对全国不同地区11家三级医院,进行目标细菌收集、鉴定和药敏试验,分析2018至2020年儿童患者标本来源、分离率和构成比及抗菌药物敏感性,揭示近3年来儿童组耐药数据特点及变化趋势。结果在儿童组患者中共检出病原菌14556株,其中革兰阳性菌6200株(42.6%),革兰阴性菌8356株(57.4%)。主要标本来源分别为呼吸道标本4855株(33.4%)、尿液2724株(18.7%)、血液1683株(11.6%)、伤口脓液1462株(10.1%)和脑脊液246株(1.7%)。呼吸道标本中,分离率最高的分别为流感嗜血杆菌(721株,14.9%)、金黄色葡萄球菌(672株,13.8%)和肺炎链球菌(670株,13.8%);尿液标本分离率最高的是大肠埃希菌(858株,31.5%)和屎肠球菌(556株,20.4%);伤口脓液标本以金黄色葡萄球菌(449株,30.7%)和大肠埃希菌(431株,29.5%)最为常见;血液和脑脊液标本表皮葡萄球菌检出率最高,分别为19.7%(331株)和20.7%(51株)。耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)检出率为16.9%(409/2416株),耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CR-PA)为12.2%(79/649株),耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CR-AB)分离率为47.2%(395/837株),耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为26.4%(589/2235株),耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为79.0%(1017/1288株)。结论儿童感染病原以革兰阴性菌为主,感染部位以呼吸道为主,不同部位感染的病原菌构成不同,细菌耐药率及碳青霉烯类耐药菌分离率有其特点,临床应根据监测结果进行针对性治疗。

广州地区泌尿系统感染的产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药特征和基因分型

目的了解本地区泌尿系统感染的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌耐药特征及其基因型分布。方法收集广州地区13家医院2001～2003年间自尿培养分离的大肠埃希菌623株，用NCCLS规定的ESBLs初筛和确证试验检测ESBLs，用K-B琼脂扩散法进行药物敏感试验，用PCR方法对分离的产ESBLs菌株进行SHV、CTX-M基因型检测。结果产ESBLs大肠埃希菌检出率为33．4％（208株），其中53．8％（112株）携带CTX—M基因，20.7％（43株）携带SHV型基因，并有2，8％（6株）同时携带CTX—M基因和SHV型基因。产酶株的耐药率显著高于非产酶株，产ESBLs细菌对青霉素类、环丙沙星及头孢菌素类抗生素耐药率较高（高达84．1％～97．6％），对加用酶抑制剂克拉维酸或他唑巴坦的耐药率较低。结论广州地区泌尿系统感染的产ESBLs大肠埃希菌具有多重耐药的特点，其中CTX—M型是流行的基因型。

系统性红斑狼疮中医辨证分型与自身抗体谱的关系

目的探讨系统性红斑狼疮中医辨证分型与自身抗体谱检测的内在联系。方法收集确诊为系统性红斑狼疮的住院患者病历资料及相应自身抗体谱检测结果,根据四诊特点对其进行中医辨证分型。共分3型:脾肾阳虚证、热毒炽盛证及阴虚内热证,比较其自身抗体谱检测结果与中医辨证分型之间的关系。结果共收集SLE确诊病例105例,其中103例抗核抗体(ANA)阳性,3组证型间抗核抗体滴度按几何均值大小依次为热毒炽盛证>阴虚内热证>脾肾阳虚证;组间比较特异性抗核抗体谱各抗体阳性率,其中脾肾阳虚和热毒炽盛间抗组蛋白抗体阳性率差异有统计学意义(P<0.05);抗ds-DNA抗体阳性共有54例,总阳性率为51.43%,按阳性率大小依次为:脾肾阳虚证>阴虚内热证>热毒炽盛证,其中脾肾阳虚、阴虚内热组均与热毒炽盛组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ANA可作为系统性红斑狼疮的筛查试验,而抗组蛋白抗体及抗ds-DNA抗体可应用于系统性红斑狼疮的中医辩证分型,作为辨证的参考依据。