TRPV1离子通道对精子线粒体膜电位的影响

目的探讨TRPV1(transient receptor potential vanilloid type1,TRPV1)离子通道对精子线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的影响。方法手淫法收集健康生育男性精液,采用上游法分离精液精子。每份精液等分为五份,分别接受不同的处理。实验分五组,即四个实验组和一个对照组。实验组分别加入20μmmol/L capsaicin(B组)、50μmmol/L capsaicin(C组)、20μmmol/L capsazepine(D组)和50μmmol/L capsazepine(E组),对照组(A组)不加药物。采用计算机辅助的精液分析(CASA)测定精子活率及运动参数,JC-1探针法检测精子线粒体膜电位的变化。结果 TRPV1配体对精子各项检测指标的影响呈现剂量和时间依赖性。CASA检测显示,TRPV1配体作用30分钟后精子活率明显下降,各实验组精子活率分别为(53.60±8.05)%、(43.38±8.66)%、(48.32±8.20)%及(35.42±6.21)%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。实验组同一药物不同剂量之间比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。此外,除BCF和ALH外,精子各项运动参数均出现有统计学意义的改变(vs control,P<0.01),同一药物不同剂量之间亦有统计学差异(P<0.01)。各组精子线粒体膜电位检测发现,与对照组比较,实验组荧光强度下降明显(P<0.01),并且同一药物不同剂量之间比较,荧光强度变化均有统计学差异(P<0.01)。结论 TRPV1配体可能通过与TRPV1受体结合或者非受体途径,作用于精子线粒体,降低线粒体膜电位,损害精子线粒体功能,最终影响精子存活及运动功能。

TRPV离子通道家族在人精液生殖细胞中的表达及定位

目的探讨TRPV离子通道家族在人精液生精细胞及精子中的表达情况及细胞定位。方法采用非连续Percoll密度梯度离心法分离人精液中生精细胞及精子,TRIzol法提取细胞总RNA,RT-PCR合成并扩增目的基因,琼脂糖凝胶电泳检测目的基因的存在。蛋白印迹技术检测TRPV离子通道蛋白在人精液生精细胞及精子中的表达,免疫荧光染色技术检测TRPV离子通道蛋白在人精液生精细胞及精子中的表达定位。结果在人精液生精细胞及精子中检测到TRPV1、TRPV2及TRPV5mRNA的表达,未能检测到TRPV3、TRPV4及TRPV6mRNA的表达。蛋白印迹检测显示人精液生殖细胞中存在TRPV1、TRPV2及TRPV5离子通道蛋白的表达。免疫荧光染色显示,TRPV1离子通道主要表达于中晚期生精细胞胞浆及精子头部。结论人精液生精细胞及精子中存在多种TRPV家族离子通道的表达,其中TRPV1及TRPV2mRNA在人精液生精细胞及精子中呈相对较高表达,其主要定位于中晚期生精细胞胞浆及精子头部。本研究结果将为研究人类生精细胞及精子中TRP通道的功能及TRP通道各亚型之间的相互关系提供参考依据。

基层预防接种门诊疫苗冷链失效的原因及改进对策

目的对基层社区预防接种门诊冷链失效事件进行分析,探讨改进对策,避免同类事件再次发生。方法汇总分析深圳蛇口社区健康服务中心22家预防接种门诊2014年12月至2016年7月10起疫苗冷链失效事件原因并调查现状,分析冰箱类型、电路、温度查验管理等,对安全隐患进行整改。结果 10起失效事件中,17台疫苗冰箱温度超温且全部为非医用冰箱;8台(47.0%)因线路原因跳闸断电;5台(29.4%)因电插头松脱;4台(23.5%)因冰箱本身性能故障;总计报废疫苗2272支。现状调查,共有45台疫苗冰箱,医用冰箱14台(31.2%),非医用31台(68.8%),6年以上冰箱24台(53.3%);整改后储存疫苗冰箱全部更新为医用冰箱;已解决电源插接问题的冰箱38台(84.4%);增加了冷链细节管理内容。结论应提高社区预防接种门诊冷链管理的意识,加强细节管理,同时仍应加大政府对基层社区预防接种门诊的合理配置,改善建筑及设备条件,减少安全隐患。