盐藻胞质型3-磷酸甘油脱氢酶基因的克隆及性质鉴定

3-磷酸甘油脱氢酶(GPDH)是盐藻(Dunaliella salina)甘油合成途径上的关键酶,本研究首次报道了一条胞质型GPDH基因的克隆(命名为Ds GPDH1),经大肠杆菌表达和融合蛋白的纯化及性质鉴定,也研究了在盐胁迫期间DsGPDH1和DsGPDH2的表达变化。研究发现DsGPDH1和DsGPDH2相比,少了一段信号肽序列,但包含完整的SerB结构域和GPDH结构域。通过大肠杆菌制备的融合DsGPDH1蛋白高度可溶,但却没有NADH依赖的脱氢酶活性,其SerB结构域是否具有磷酸化酶的活性还没有研究清楚。在高盐胁迫时DsGPDH1和DsGPDH2都表现出诱导性高表达,在低盐胁迫时,DsGPDH1的表达被高度抑制,但DsGPDH2的表达变化却不太明显。GPDH同工酶在盐藻甘油合成中的具体分工仍然不清楚,但本研究迈出了坚实的一步。