梓醇对大鼠慢性脑缺血白质损伤的保护作用

目的初步探讨梓醇对慢性脑缺血所致白质损伤的保护作用及机制。方法成年雄性Wistar大鼠24只,分为4组:假手术组,缺血组,生理盐水组和梓醇组。通过结扎大鼠双侧颈总动脉建立慢性脑缺血模型,同时腹腔注射5mg/kg梓醇或生理盐水予以治疗,每天1次,连续10d。术后30d处死,然后利用卢卡斯快蓝(luxol fast blue,LFB)染色法和免疫组织化学技术分别观察梓醇对脑白质髓鞘以及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、腺瘤性息肉蛋白(adenoma-tus polyposis coli,APC(CC-1)和星形胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidity protein,GFAP)表达的影响。结果与假手术组比较,在缺血组和生理盐水组,LFB染色变浅[(37259.6±6626.6)、(36554.4±7865.7)vs(90470.5±5004.6)],MBP表达下降[(24016.5±3794.8)、(23923.6±4605.1)vs(65055.4±6839.9)],CC-1阳性的少突胶质细胞(oligo-dendrocytes,OLs)减少[(33.0±9.6)、(32.0±9.8)vs(100.0±11.2)],GFAP阳性的星形胶质细胞增多[(52.0±7.4)、(50.0±9.4)vs(14.0±6.6)],均有显著差异(P<0.01);梓醇治疗后能显著地减轻白质损伤,它能使LFB染色加深(86687.6±6619.1),MBP表达升高(61604.5±6319.9),CC-1阳性细胞数增加(91.0±8.4),GFAP阳性细胞数减少(17.0±7.8),与生理盐水组比较均有显著差异(P<0.01)。结论梓醇可通过抑制星形胶质细胞的增生进而抑制炎症反应来保护慢性脑缺血所致的白质损伤。

神经系统中的肿瘤抑制因子PTEN

PTEN是定位于10q23的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,它能通过PI3K/AKT、FAK和MAPK信号转导通路调节细胞的生长、凋亡、迁移和转化。PTEN在神经系统的神经元中有广泛表达,其在调节神经干细胞的增殖、SVZ前体细胞的迁移及凋亡、PC12细胞的分化和神经突触的建立方面具有重要作用。因此,对PTEN功能的进一步研究将为肿瘤和神经性疾病的治疗提供新的思路。

梓醇通过上调p-Akt表达抑制慢性脑缺血诱导的大鼠脑白质损伤

目的探讨梓醇对慢性脑缺血诱导的大鼠脑白质损伤的保护作用及其与Akt通路之间的相关性。方法成年雄性Wistar大鼠18只,随机分为假手术组(Sha组),生理盐水处理组(Veh组)和梓醇处理组(Cat组),每组6只。以永久性结扎双侧颈总动脉诱导大鼠慢性脑缺血,Veh组和Cat组大鼠分别腹腔注射生理盐水和梓醇(5 mg/kg),连续10 d。慢性缺血30 d后,采用卢卡斯快蓝(LFB)染色法和免疫组织化学染色法检测梓醇对脑白质少突胶质细胞凋亡、髓鞘损伤及p-Akt表达的影响。结果在Veh组的脑白质中,少突胶质细胞凋亡和髓鞘损伤程度明显增加,与Sha组比较有显著性差异(P<0.01)。梓醇治疗后能明显降低少突胶质细胞凋亡和髓鞘损伤,上调p-Akt表达,其结果与Veh组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论梓醇可通过上调p-Akt的表达抑制慢性脑缺血诱导的脑白质损伤。

教学导师培训制度促进青年教师快速成长有效性探讨

为了缩短青年教师的成长周期,快速提高青年教师的教学水平,该校基础医学部决定尝试大学培养硕士研究生、博士研究生的导师制模式,实施教学导师指导下的青年教师培训制度,遴选热爱教学和具备丰富教学经验的教学专家和资深教师组成导师团队,有针对性地对青年教师进行为期两年的教学培训。其组织形式包括团队式课前辅导、双向随堂听课、教学技能专项培训及教学能力的考核评价。实践表明,教学导师培训制度增强了青年教师的责任感和教学热情,是"传、帮、带"的新方法。教学导师培训制度推进了青年教师的培养进程,是促进青年教师快速成长的有效途径。

交互式讨论教学法提高医学本科生综合分析能力的评价与实践

为了提高医学本科生自学与综合分析能力,作者以班级为单位将交互式讨论教学法应用于组织胚胎学实验教学中,分析并比较交互式讨论教学法组和传统教学法组实施后的效果。结果显示:交互式讨论教学法在提高学习兴趣和考试成绩、提高分析解决问题能力及提高综合素质等方面明显优于传统教学法。交互式讨论教学法能够有助于培养高素质的医学人才。

肿瘤抑制因子PTEN蛋白在成年大鼠中枢神经系统的表达

目的观察PTEN在成年大鼠中枢神经系统(central nervous system,CNS)的表达情况。方法用免疫组织化学ABC法显示大鼠CNS中PTEN阳性免疫反应产物。结果PTEN阳性反应产物广泛分布于大鼠的CNS内,阳性细胞的分布主要表现为较多、中等量和少量3种情况,其亚细胞定位包括细胞质、细胞核和细胞质突起。结论明确PTEN在成年大鼠CNS中的表达模式。

大麻素受体在成年大鼠脑组织中的分布特点

目的:研究大麻素CB1、CB2受体在成年大鼠脑组织的分布特点和规律,为进一步研究其功能打下基础。方法:用兔抗鼠CB1、CB2受体特异性抗体免疫组化染色,检测大鼠脑组织主要部位两种受体的表达分布情况。结果:CB1受体阳性细胞在脑组织有广泛大量的分布,大脑皮质、胼胝体、海马、基底核区及小脑浦肯野细胞层、脑桥等区域均有较明显表达。CB2受体阳性细胞的数量及分布部位与CB1受体表达基本一致,少数区域如胼胝体、小脑白质阳性细胞数相差较大,CB2受体明显多于CB1受体的表达。结论:大麻素CB1、CB2受体在成年大鼠脑组织均广泛分布,并在多数部位表达情况一致,少数部位存在表达程度差异,提示其在神经系统中参与了某些生理及病理作用。

Cuprizone致小鼠脱髓鞘对胼胝体少突胶质细胞数及动物运动能力的影响

目的研究Cuprizone(CPZ)诱导C57BL/6小鼠脱髓鞘对胼胝体少突胶质细胞变化情况,并探讨对小鼠运动能力的调控特点。方法以正常饲料喂食的6周龄雄性小鼠作为对照,实验组用含0.2%Cuprizone的混合饲料持续喂食6周龄雄性小鼠6周,诱导中枢神经系统脱髓鞘。用LFB组化和MBP免疫组化技术鉴定脑胼胝体区的脱髓鞘改变,确认模型的稳定可靠性。结合MBP和CC-1免疫荧光双标技术,观察脱髓鞘的胼胝体区少突胶质细胞变化情况。并通过体质量监测观察小鼠的整体功能状态变化,进一步采用行为学实验技术(旋转棒测试和旷场实验)观察对小鼠运动能力的调控效果和特点。结果与正常组相比,Cuprizone诱导脱髓鞘6周后,脑胼胝体区的髓鞘缺失明显,髓鞘结构蛋白MBP含量明显减少[(0.395±0.019)vs(0.242±0.016);P<0.01];应用图像分析和统计学分析发现,成熟少突胶质细胞的胞体(CC-1+)和(MBP+)呈平行性减少[(42.62±2.48)vs(25.04±3.68)/100μm2;P<0.05];在实验监测过程中,正常小鼠体质量呈上升增加,而CPZ组小鼠体质量先急剧下降,后趋于平稳并稍有恢复;同时行为学实验结果表明,小鼠的运动协调能力、自发活动能力都有明显减弱[(156.17±22.17)vs(78.50±7.80);(240.91±29.52)vs(163.31±21.05);P<0.05],但是对小鼠的探索习性并无明显影响(3.7%/5.4%vs 3.6%/5.3%;P>0.05)。结论利用Cuprizone诱导小鼠脱髓鞘改变与少突胶质细胞减少有关,其主要影响小鼠的运动协调能力和自发活动而不影响探索习性等高级功能。

PTEN在神经元损伤和脑功能障碍中的作用

磷酸酶与张力蛋白同源物基因(PTEN)是定位于10q23的具有双重磷酸酶活性的抑癌基因,其缺失或失活常会导致肿瘤的发生。PTEN在神经系统表达广泛,它能分别以其脂质和蛋白质磷酸酶活性通过Akt信号通路及与膜受体N-甲基-D-天冬氨酸受体和五羟色胺2c受体的相互作用,调节神经元的损伤和脑功能障碍的发生。因此,对PTEN功能的进一步研究将使其在肿瘤和神经疾病的治疗上具有潜在的临床应用价值。

转录因子EN2在小鼠胚胎组织中的分布

目的观察转录因子EN2在小鼠胚胎发育过程中的时空分布规律。方法利用Westernblot技术检测EN2在小鼠胚胎E8．5-E17．5的表达强度；利用免疫组化技术观察EN2在胚胎发育不同时期各组织器官中的分布。结果①Westernblot：E8．5未检测到明显的阳性蛋白条带，E9．5-E15．5在相对分子质量为41×10。处检测到清晰的EN2蛋白条带，表达水平从E9．5-E12．5逐渐增强，E13．5之后逐渐减弱，至E16．5消失。②免疫组化：在胚胎不同时期，EN2蛋白在中后脑交界部、Rathke囊周围、下颌弓、视交叉、嗅球、椎间盘、轴旁肌和一些间充质组织中都有不同程度的表达。结论EN2蛋白可能参与了神经系统、骨骼肌、椎间盘和一些间充质组织的发育与分化。

对组织胚胎学实习课教学的思考

组织胚胎学是医学教育的重要入门课程之一。它涵盖组织学与胚胎学两门学科，内容多，知识广，专业性强。传统教学主要是采用“满堂灌”的方法讲授基本理论和基本知识，通过实习课在光学显微镜下观察组织切片来了解组织器官的形态结构，这难以激发学生的学习兴趣和热情，不利于学生独立思维能力及创新意识和动手能力的培养。本文结合本教研室教学实践的特点，就如何充分利用现有教学资源、改革组胚实习课教学、提高教学质量探讨如下。

Id2在三碘甲状腺氨酸调节大鼠室管膜前下区神经干细胞分化中的作用

目的探讨三碘甲状腺氨酸(triiodothyronine,T3)对大鼠室管膜前下区(anterior subventricular zone,SVZa)神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化为少突胶质细胞的影响及转录因子Id2的表达变化。方法离体培养新生大鼠SVZa来源的NSCs,应用免疫细胞化学技术观察加入T3后对NSCs分化细胞种类、比例的影响,以及不同分化时间Id2表达的变化情况。结果在正常自然培养的未分化NSCs中Id2表达较强,分化2h和12h时表达较弱,随后逐渐增强。加入T3后,细胞分化加速,Id2表达较对照组高(P<0.05),但此时少突胶质细胞数量增多,而星形胶质细胞数量减少。结论T3可能通过增加Id2的表达从而促进体外培养的SVZa NSCs向少突胶质细胞分化,而抑制其向星形胶质细胞分化。

医学生开展组织胚胎学论坛活动的实践与体会

通过对刚学完组织胚胎学课程的大二本科学生开展组织胚胎学论坛活动,激发学生对医学知识的好奇心和求知欲,促其掌握能动性、系统性、整体性的自主学习方法,引导其接触医学科研前沿,培养其创新能力与协作精神。

Aβ1-42抑制少突胶质前体细胞增殖与分化的实验研究

目的探讨在离体细胞培养条件下,Aβ1-42对SD乳鼠少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)增殖与分化的影响。方法采用条件培养液原代培养获得高纯度SD乳鼠OPCs,分为正常组、加入无菌水的对照组、加入Aβ1-42的实验组,采用CCK-8检测存活细胞数量和增殖水平,Western blot检测细胞凋亡蛋白含量,免疫细胞化学染色观察细胞形态变化及分化情况。结果与对照组相比,实验组OPCs存活率显著降低(P<0.01),具体表现为:Aβ1-42作用OPCs 1 h后,细胞增殖明显受到抑制(P<0.01);药物浓度1 mol/L作用于OPCs时,增殖也受到影响(P<0.05),当Aβ1-42剂量增加至2.5 mol/L时,细胞增殖明显受到抑制(P<0.01),而对照组与正常组无显著差异(P>0.05)。对凋亡蛋白Caspase-3的检测发现,它们在对照组与正常组的表达水平基本相当(P>0.05),而在实验组明显升高(P<0.01),且呈现时间和浓度依赖性,具体表现为:Aβ1-42作用OPCs 2 h后,Caspase-3表达水平明显上调(P<0.01);药物浓度2.5 mol/L作用于OPCs时,蛋白表达水平有所升高(P<0.05),当Aβ1-42剂量增加至5 mol/L时,Caspase-3表达水平明显上调(P<0.01)。对成熟少突胶质细胞标记物髓鞘碱性蛋白的免疫染色发现,与对照组相比,实验组的细胞体积明显变小,突起明显减少。结论 Aβ1-42可能通过促使细胞凋亡而抑制OPCs增殖,并抑制了OPCs向成熟少突胶质细胞分化,从而影响中枢神经系统的髓鞘形成。

新生大鼠慢性脑缺血损伤中氯离子通道ClC2的表达及其与白质发育影响作用的研究

目的探讨新生大鼠缺血缺氧损伤后氯离子(Cl-)通道ClC2表达及其阻断剂DIDS对脑白质发育的影响作用。方法采用新生3-5dSD大鼠,以改良Levine法建立慢性脑缺血缺氧模型。运用RT-PCR、活性氧检测和Western Blot检测结合髓鞘卢卡斯快蓝与免疫组织化学染色等技术,对比观察新生缺血缺氧脑损伤前后白质中ClC2的表达变化;分析其与氧化应激、炎症反应的相关性;对比观察损伤前后及损伤后应用DIDS阻断ClC2表达对脑白质髓鞘发育和细胞凋亡的影响。结果1新生缺血缺氧脑损伤后白质中ClC2mRNA和蛋白表达均显著增高(P<0.01);伴白质组织活性氧浓度显著升高(P<0.01);和iNOS、TNF-αmRNA的表达增加(P<0.01)。在胼胝体等白质区髓鞘染色较正常明显浅淡,促凋亡蛋白caspase-3与ClC2阳性双标细胞数目则明显增多(P<0.01)。2损伤早期应用DIDS后,ClC2mRNA和蛋白、活性氧浓度、iNOS、TNF-αmRNA的表达以及caspase-3表达等均较损伤组明显降低(P<0.05);白质区髓鞘特异染色逐渐加深。结论新生缺血缺氧脑损伤后白质区Cl-通道表达升高与氧化应激、炎症反应呈正相关;可导致由脑白质中caspase-3介导的细胞凋亡增多和髓鞘发育受阻。伤后早期应用DIDS阻断Cl-通道可降低caspase-3介导的凋亡发生,提示早期使用DIDS可部分保护缺血缺氧损伤后的OLs细胞。

小胶质细胞极化在中枢神经系统髓鞘再生中的作用研究进展

了解中枢神经系统髓鞘损伤再生的调控机制对多种中枢神经系统脱髓鞘疾病的治疗有重要意义。近年来研究发现,中枢神经系统中小胶质细胞的不同极化形式在调控髓鞘损伤再生中起到重要作用。在一系列细胞内外信号分子的介导下,M1型小胶质细胞会分泌一些促炎因子而加重髓鞘的损伤,而M2型小胶质细胞一方面可分泌抗炎分子和吞噬损伤坏死细胞而抑制炎症反应,为髓鞘再生创造条件;另一方面还能分泌多种神经营养因子,促进髓鞘修复。此外,最近研究发现M2型小胶质细胞在一定程度上还能促进少突胶质前体细胞的成熟分化,进而促进了中枢神经系统髓鞘的再生。这些研究结果提示,促进小胶质细胞的M2型极化可能成为治疗脱髓鞘疾病的新途径。

DNA结合抑制因子2在大鼠脑室管膜前下区神经干细胞发育中的表达

目的探讨DNA结合抑制因子2(Id2)在大鼠脑室管膜前下区(SVZa)神经干细胞(NSCs)发育分化中的作用。方法运用RT-PCR、Western blotting、免疫组织化学技术,观察Id2在不同发育阶段SVZa-喙侧迁移流(RMS)-嗅脑(OB)流通道中的时空表达模式。结果从空间上看,Id2在RMS表达始终最高,SVZa次之,在OB表达最弱;从发育的时间来看,Id2在各区域胚胎时期表达均比刚出生时强;在OB和RMS区,成年比刚出生时表达强,老年仍有较强表达;在成年SVZa表达比刚出生时弱。结论Id2在SVZa神经干细胞的发育学表达模式提示,Id2可能有促进SVZa神经干细胞增殖和抑制其在RMS迁移区分化的作用。

GPR17在少突胶质细胞分化和脱髓鞘疾病中的作用

了解少突胶质细胞分化的调控机制对促进中枢神经系统脱髓鞘疾病髓鞘再生有重要意义。近年来研究发现,G蛋白偶联受体GPR17在调控少突胶质细胞分化和髓鞘再生中发挥了重要作用。本文主要就GPR17的特点及其在少突胶质细胞分化和脱髓鞘疾病中的作用作一简要综述,从而为中枢神经系统脱髓鞘疾病的治疗及药物研发提供新的理论依据。

新冠肺炎疫情下组织学与胚胎学线上教学的探索与实践

新冠肺炎疫情防控期间,该教研室响应教育部“停课不停教、停课不停学”的号召,充分利用钉钉、爱课堂教学平台及丰富的网络资源,采用多种教学手段相结合的授课方式,顺利开展了多元化、多形式的组织学与胚胎学线上教学,实现了线上、线下教学同质等效的教学目标。该文从此次线上教学面临的挑战与困难、线上教学的准备、具体实施过程及教学效果评价等方面开展了对组织学与胚胎学线上教学的探索与实践,以期为将来开展线上、线下混合式教学改革提供参考。

优质微课制作在基础医学教学辅助中的应用探索

微课是信息化教学的重要辅助方式之一,在医学课程教学中有着广泛应用。但是,目前教学中所用的微课质量参差不齐,教学效果并不均一。为提高微课制作质量,最大程度发挥辅助教学效果,本文分析了当下微课制作的现状及存在问题,并结合此前制作的微课,分析优质微课制作的要素和重点,为快速、有效搭建并制作优质微课提供借鉴。