海参抗菌肽的活性筛选与功效评价

本文将已有文献报道的海洋动物源抗菌肽(毒素除外)与海参蛋白组进行比对,结合生物信息学软件,设计、筛选海参抗菌肽,并对其理化特性、抗菌活性与机制、生物相容性与细胞活性等进行研究。研究结果发现,通过软件模拟与抗菌活性预测,最终筛选并固相合成7条海参抗菌肽(H1-H7)。其中,H4(RVHRFLRR)可通过细菌膜电位去极化、膜透化等方式,抑制金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、创伤弧菌(Vibrio vulnificus)生长,在较低浓度(31.25μg·mL^(-1))时,可使S.aureus细菌总数降至84.93%±4.21%(p<0.01),P.aeruginosa细菌总数降至95.92%±0.52%(p<0.01),V.vulnificus细菌总数降至77.14%±1.37%(p<0.01)。H4生物相容性好,在<1000μg·mL^(-1)时均未表现出溶血性或细胞毒性,其可能通过与细胞膜表面受体(EGFR、VEGFR2、FGFR1等)发生相互作用进而促进细胞迁移。在浓度为62.50μg·mL^(-1)和250μg·mL^(-1)时,H4均可显著促进L929细胞发生迁移(p<0.05)。实验结果表明,海参抗菌肽H4生物相容性好,兼有抗菌、促愈合功效,可望作为一种潜在功能物质用于感染创面的修复与再生。

响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铁工艺

采用响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽与氯化亚铁进行螯合反应的条件,制备小分子肽螯合铁产品。以pH值、小分子肽与FeCl2的质量比和小分子肽液质量分数3因素的5水平进行二次正交旋转组合试验,建立螯合物得率的二次回归方程。结果表明:最佳螯合工艺条件为胶原蛋白肽与氯化亚铁的质量比4:1、小分子肽液质量分数3.5%、pH7.0。在此条件下,螯合物得率为37.31%,与模型的预测值37.46%接近。红外光谱检测结果显示,亚铁离子与小分子肽中的NH2+和COO-有螯合,是一种新型螯合物。

抗氧化钝顶螺旋藻多糖的分离纯化

研究抗氧化的钝顶螺旋藻多糖,对其进行分离纯化。首先采用碱液热浸提,再用95%乙醇沉淀提取螺旋藻多糖,考察粗多糖对·OH及O2-·的清除活性,之后采用DEAE阴离子纤维素柱和葡聚糖凝胶层析法进行分离纯化及分子质量测定,红外色谱初步研究其结构。结果表明:钝顶螺旋藻多糖清除自由基能力较高,其中多糖质量浓度为0.6mg/mL时对·OH清除能力为(37.01±1.58)U/mL;多糖质量浓度为0.4mg/mL时清除O2-·能力为(47.84±2.46)U/mL。分离纯化得到4个主要的水溶性酸性糖蛋白SP1-2、SP2-1、SP3-1和SP4-1,分子质量依次为4.18×104、5.11×104、2.80×104D和3.76×104D,SP3-1的红外光谱呈现出典型的糖蛋白特征峰。

牡蛎肽肠内营养制剂对小鼠免疫功能的影响

目的研究牡蛎肽肠内营养制剂对小鼠免疫功能的影响。方法以牡蛎肽为蛋白源,研制获得牡蛎肽肠内营养制剂,检测血液生化指标和脏器系数进行营养评定,采用小鼠脾淋巴细胞转化试验、碳粒廓清试验、乳酸脱氢酶测定法研究了其对免疫功能的影响。结果牡蛎肽肠内营养制剂可以维持小鼠正常生理生化功能,能明显增强小鼠的细胞免疫和NK细胞活性,低剂量组能增强小鼠的巨噬细胞吞噬功能。结论牡蛎肽肠内营养制剂对小鼠具有提高机体免疫的作用,可以作为肠内营养制剂应用于临床营养支持。

海洋生物多糖在肠内营养制剂中的应用

随着分子营养学的飞速发展,利用特殊的营养素来实现合理化、个体化的临床肠内营养(EN)支持尤为迫切。我们综合国内外EN制剂中糖类的应用和海洋生物多糖综合利用现状,在传统陆源植物多糖膳食纤维型EN制剂研究的基础上,探讨分析海洋生物多糖在免疫增强型、癌症病人和糖尿病病人等EN制剂中的应用,提出了以海洋生物多糖为新的营养基质,开发各种疾病导向型EN制剂,为临床提供个体化的营养支持。

牡蛎肽肠内营养制剂对小鼠肠道功能作用的研究

本文主要探讨牡蛎肽肠内营养制剂对小鼠肠道功能的作用。将动物随机分为阴性对照组、阳性对照组和低、中、高剂量组5组,灌胃给予不同剂量牡蛎肽肠内营养制剂,每天测定各组体重和进食量,最后测定食物利用系数、小肠推进率、小肠吸收等评价指标。结果显示,与阴性对照组相比,低、中剂量组食物利用系数和小肠推进率均有明显增加,低剂量组木糖浓度明显增高。可见,牡蛎肽肠内营养制剂能促进小肠推进和消化吸收,可以作为肠内营养制剂应用于临床营养支持。

临床营养制剂灭菌工艺研究进展

临床营养制剂作为全营养药物,在其生产贮存过程中容易滋生微生物,导致营养价值下降,故通过灭菌工艺控制微生物,保障制剂的安全、有效和稳定至关重要。本文通过综述国内外在食品、药品工业中应用的灭菌技术,并与传统的热力灭菌技术作对比分析,提出目前更适合于临床营养制剂保持其营养与活性成分的灭菌工艺,包括超高压灭菌技术、辐照灭菌技术、超高温瞬间灭菌技术、微波灭菌技术等,为高品质临床营养制剂的研究开发提供绿色新技术,保障临床营养制剂使用者的安全,有效康复。

我国肠内营养制剂临床应用进展与评价

目的:评价我国商品肠内营养制剂的临床应用状况,供临床和科研参考。方法:从产地、剂型、组成特点、营养成分来源、能量分布、评价参数等角度对比评价我国上市商品肠内营养制剂。结果:我国商品肠内营养制剂从营养成分组成、能量分布、药品参数等角度均与国外相应产品具有较强的相似性。结论:我国上市的肠内营养制剂产品还是以国外产品为主导,国内产品技术含量相对较低,需要不断加强临床肠内营养制剂领域的研究。

香港巨牡蛎中牛磺酸的超声、酶解提取工艺研究

以牛磺酸得率为考察指标,通过单因素和正交试验,研究了超声法、蛋白酶酶解法提取香港巨牡蛎中牛磺酸最佳工艺条件,并在最优工艺条件下进行超声辅助酶解提取。确定了超声法最佳工艺条件为超声时间40 min、功率825 W、温度70℃,牛磺酸得率为0.276(±0.013)%;碱性蛋白酶作为优选酶种,最佳工艺条件为加酶量4 000U/g、料液比1∶2、酶解时间6 h,牛磺酸得率为0.746(±0.053)%,显著高于超声提取法;超声辅助酶解提取,牛磺酸得率为0.782(±0.023)%,高于碱性蛋白酶酶解法,可优选应用于牡蛎牛磺酸的提取。

凡纳滨对虾下脚料综合加工工艺研究

研究了以凡纳滨对虾下脚料为原料,同时制备调味基料和多功能饲料添加剂。应用酶解技术,对凡纳滨对虾下脚料采用双酶复合酶解(木瓜蛋白酶和风味蛋白酶)方法生产调味基料,在确定了料液比为1:1,酶解初始pH为6.80,盐添加量为3.0%的情况下,进一步利用Box-Behnken响应面法获得最优酶解工艺为:酶解温度62.42℃,酶解时间3.28h,加酶量1046U/g,测得最终水解度DH为(28.15±0.10)%,苦味值BV为33.05±0.21。通过对比2种干燥工艺,确定了从凡纳滨对虾下脚料中生产多功能饲料添加剂的最佳干燥工艺条件为:采用微波干燥,参数为3W/g,启闭比为0.5。

牡蛎肽肠内营养制剂的研制和灭菌工艺研究

根据普通病人肠内营养制剂的设计原理,以牡蛎肽为蛋白质来源,麦芽糊精为碳水化合物来源,添加一定量的玉米油、鱼油、海水螺旋藻、果蔬粉等成分,研制获得牡蛎肽肠内营养制剂;研究了干热灭菌、微波灭菌和辐照灭菌3种灭菌工艺对牡蛎肽肠内营养制剂的影响,确定了其最佳灭菌工艺。结果表明,牡蛎肽肠内营养制剂为淡绿色均质固体粉末,溶解性较好;其蛋白质、脂肪、碳水化合物的能量比例为16%、9%、75%,各项营养指标评价与进口制剂相当,其灭菌工艺最优选择为辐照剂量8kGy,其次为微波功率640W、110s的微波灭菌。

海洋生物型临床肠内营养制剂基料安全性研究初探

海洋生物型临床肠内营养制剂作为新型临床营养制剂已显示出了巨大的临床应用价值和市场开发前景。近年来,食品和药品安全问题备受关注,临床营养制剂基料安全性研究显得十分迫切。通过综述国内外临床营养制剂基料安全性研究现状,对其基料中重金属、海洋生物毒素、多氯联苯和有机氯农药等危害物进行了分析,探讨了危害物控制技术和脱除方法,为优质基料的选择和安全、高效、优质的临床营养制剂的研制开发提供参考。

肠内营养制剂蛋白源的营养评价研究

目的:对肠内营养制剂蛋白源牡蛎蛋白进行对比评价。方法:采用国际通用的营养价值评价方法,全面评价了牡蛎蛋白、大豆蛋白、牛奶蛋白和鸡蛋蛋白等肠内营养制剂蛋白源的营养价值。结果:牡蛎肽和牡蛎蛋白的营养价值最高,与鸡蛋蛋白相当,优于牛奶和大豆蛋白。肠内营养制剂蛋白来源的营养价值排序依次为牡蛎肽、牡蛎蛋白、鸡蛋蛋白、牛奶蛋白和大豆蛋白。结论:牡蛎蛋白具备成为临床肠内营养制剂新蛋白源的重要原料。

海洋活性物质在糖尿病肠内营养支持中的应用前景研究

随着分子营养学和个性化临床肠内营养(EN)支持的发展,海洋活性物质逐渐成为EN制剂理想的营养基质。EN制剂研究与海洋活性物质研究相结合,成为现代临床EN支持的新方向。我们针对糖尿病(DM)特殊的患病机制和营养需求,探讨海洋多糖、多不饱和脂肪酸(PUFA)、牛磺酸(Tau)、微量元素在糖尿病病人EN支持中的应用前景,为糖尿病个性化EN制剂的开发提供新的思路。

海洋生物型肠内营养制剂氮源重金属含量研究

通过分析我国南方多个海区15个海洋生物样品的重金属含量,评价其作为海洋生物型肠内营养制剂氮源的安全性。试验结果表明,15个样品中有5个样品Pb含量超标,6个样品As含量超标,所有样品Hg含量均未超标。初步研究表明,我国南方海区黄鳍鲷、花鲈等样品在本次分析中均未出现重金属超标,满足作为海洋生物型肠内营养制剂氮源基料的重金属安全要求,而贝类作为氮源基料,必须根据国家标准的要求进行重金属的控制与脱除。

具有结合胆酸盐作用卵形鲳鲹蛋白酶解物的制备和分子量分布研究

以卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)鱼肉为原材料,以酶解产物与胆酸盐的体外结合率为指标,从5种常用食品用蛋白酶中筛选最优蛋白酶。进而采用正交法优化酶解条件,以提高酶解产物的胆酸盐结合率,并采用GPC法分析产物中蛋白肽的分子量分布情况。结果表明,胰蛋白酶酶解产物(100 mg·m L^(-1))与胆酸钠、甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠等3种胆酸盐的体外结合能力均好于其他4种蛋白酶,结合率分别达到42.1%、33.5%和30.1%,分别相当于降血脂药物考来烯胺散(20 mg·m L^(-1))的78.3%、74.4%和76.8%;经过正交试验优化的制备卵形鲳鲹蛋白肽的工艺条件为酶解时间2 h,加酶量2 000 U·g^(-1),料液比1∶4(g·m L^(-1)、p H 8、37℃)。该条件下酶解产物(20 mg·m L^(-1))对甘氨胆酸钠体外结合率达到同浓度阳性对照物(考来烯胺散)的48.3%,酶解产物中相对分子量3 k D以下的肽类组分占总蛋白水解物的77.30%。

黄鳍金枪鱼酶解物免疫活性及其氨基酸分析

本文旨在研究黄鳍金枪鱼(Thunnus albacares)碎肉中4种不同蛋白酶酶解物的3k Da超滤组分对RAW264.7细胞的免疫活性。以RAW264.7细胞为实验模型,采用噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性,中性红吞噬实验检测细胞吞噬能力,Griess试剂检测细胞培养上清液中NO含量,并分析酶解物氨基酸组成和分子量分布。实验结果表明,胰蛋白酶酶解物在12.5~200μg·mL^(-1)范围内无明显细胞毒性,能增强RAW264.7细胞吞噬能力,浓度为400μg·mL^(-1)时达到最大值132.50%(P<0.01),浓度在50~200μg·mL^(-1)范围内能促进巨噬细胞NO释放(P<0.01),且NO释放量与酶解液浓度存在一定的量效关系;胰蛋白酶酶解物中必需氨基酸(essential amino acid,EAA)含量最高,为51.09%,其碱性氨基酸组氨酸、赖氨酸和精氨酸的含量分别为11.59%、11.00%和6.90%,均高于其他蛋白酶酶解物,并且分子量小于1k Da的小肽含量高达97.48%。研究结果表明,4种蛋白酶酶解物中,黄鳍金枪鱼碎肉胰蛋白酶酶解物的3k Da组分具有较明显的免疫活性,这为其作为免疫活性肽的开发利用提供了理论依据。

牡蛎酶解物减轻5-FU对荷瘤小鼠肠黏膜损伤的作用研究

文章以牡蛎肉为原料,采用胰蛋白酶水解法制备获得牡蛎胰蛋白酶水解物(trypsin hydrolysates of oyster,OYH),分析了其氨基酸组成和相对分子量分布,并初步探究了OYH在减轻化疗药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对S180荷瘤小鼠肠黏膜损伤方面的作用效果。结果表明:OYH中的必需氨基酸占总氨基酸的36.44%,且谷氨酸含量最高,其分子质量主要集中在1kDa以下,所占比例为92.18%。5-FU单独使用组的肿瘤抑制率为31.00%;与模型组相比,OYH-L+5-FU组、OYH-M+5-FU组和OYH-H+5-FU组小鼠肿瘤抑制率明显提高(p<0.001),分别为38.24%、46.27%和47.57%,其中OYH-M+5-FU组和OYH-H+5-FU组较5-FU单独使用有明显提高(p<0.01,p<0.001)。同时,OYH还能有效减轻5-FU给药期间造成的肠道黏膜损伤,与5-FU组相比,OYH-L+5-FU组、OYH-M+5-FU组和OYH-H+5-FU组小鼠的小肠绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度和绒毛表面积均显著增加(p<0.01,p<0.001),明显改善小肠隐窝和上皮绒毛的状态,维持肠黏膜屏障的完整。此外,OYH-L+5-FU组、OYH-M+5-FU组和OYH-H+5-FU组的S180荷瘤小鼠与模型组相比,中性粒细胞含量降低,淋巴细胞含量增加(p<0.05,p<0.01),OYH-H+5-FU组能显著增加机体总蛋白、白蛋白以及免疫球蛋白含量(p<0.05,p<0.01,p<0.001),改善机体免疫功能、营养状况以及调节血清免疫抗体水平。结果显示牡蛎肉的胰蛋白酶水解物具有作为化疗过程辅助治疗营养食品,起到肠黏膜保护和提升机体耐受力的应用潜力。

磷酸盐缓冲液活化虾壳材料脱除镉的初步研究

虾壳黏附蛋白中的酸性氨基酸残基含量相对较高,有利于虾壳通过阳离子交换方式脱除水溶液中的重金属。脱无机盐虾壳经磷酸盐缓冲液浸泡活化可以得到一种能够脱除水溶液中低浓度镉离子的虾壳材料。以Cd^(2+)浓度约3 mg/L水溶液中的Cd^(2+)脱除率为指标,通过单因素和正交试验,考察了浸泡活化中磷酸盐缓冲液pH值、磷酸盐缓冲液浓度、磷酸盐缓冲液与虾壳液固比、活化时间等因素对虾壳脱除镉能力的影响。确定了磷酸盐缓冲液活化虾壳的最佳条件:磷酸盐缓冲液pH 7.5,浓度0.15 mol/L,液固比20∶1,活化时间120 min。所得磷酸盐缓冲液活化虾壳在100 mg/80 m L加入量下,对水溶液中Cd^(2+)的脱除率为95.25(±0.57)%。

Immune functional impacts of oyster peptide-based enteral nutrition formula (OPENF) on mice:a pilot study

Oyster peptides were produced from Crassostrea hongkongensis and used as a new protein source for the preparation of an oyster peptide-based enteral nutrition formula (OPENF). Reserpine-induced malabsorption mice and cyclophosphamide-induced immunosuppression mice were used in this study. OPENF powder is light yellow green and has a protein-fat-carbohydrate ratio of 16:9:75 with good solubility in water. A pilot study investigating immune functional impacts of the OPENF on mice show that the OPENF enhanced spleen lymphocyte proliferation and the activity of natural killer (NK) cells in BALB/c mice. Furthermore, OPENF can improve intestinal absorption, increase food utilization ratio, and maintain the normal physiological function of mice. These results suggest that oyster peptides could serve as a new protein source for use in enteral nutrition formula, but more importantly, also indicate that OPENF has an immunostimulating effect in mice.