发生早期胚胎发育阻滞的IVF周期临床结局探讨

目的探讨IVF周期中发生早期胚胎发育阻滞现象是否影响患者的临床结局。方法回顾性分析自2008年1月至2012年12月于本院生殖医学中心行IVF治疗且于取卵后第3天行新鲜胚胎移植的3 030个周期,根据移植周期中是否发生早期胚胎发育阻滞现象分为A组(发育阻滞组,移植日至少有1枚胚胎发生早期胚胎发育阻滞)及B组(正常对照组,移植日没有胚胎发生早期胚胎发育阻滞),比较两组患者的一般情况及临床结局。结果 A组患者的基础FSH水平低于B组患者,窦卵泡数多于B组患者,获卵数与成熟卵数均多于B组患者,具统计学差异(P<0.01);但A组患者的可用胚胎率、优质胚胎率及移植优质胚胎率均显著低于B组患者(P<0.01),同时A组患者的临床妊娠率与活产率均显著低于B组患者,具统计学差异(P<0.05)。结论 IVF周期中发生早期胚胎发育阻滞的周期与正常对照组相比有较差的胚胎质量与临床结局。

早期补救ICSI对首次IVF助孕周期临床结局的影响

目的探讨早期补救ICSI对首次IVF周期临床结局的影响。方法回顾性分析2008年1月至2012年12月于本中心行首次IVF治疗的5 029个取卵周期,IVF受精4-6h后根据第二极体的排出情况判断受精与否,对半数以上卵母细胞未受精的患者实施补救ICSI,其余患者继续行常规IVF,比较补救ICSI组（n=413）及常规IVF组（n=4 616）患者的基本情况及临床结局,并计算早期补救ICSI对首次IVF周期临床结局的贡献值。结果早期补救ICSI组原发性不孕患者的比例及不育年限显著高于常规IVF组,输卵管及盆腔因素患者的比例显著低于常规IVF组,基础FSH显著低于常规IVF组,窦卵泡数显著高于常规IVF组（P均〈0.01）;补救ICSI组获得了较多的卵母细胞数[（9.65±5.20）vs.（8.89±5.48）个]及成熟卵数[（8.36±4.56）vs.（7.88±5.01）个]（P〈0.01）,但受精数[（6.22±3.70）个]与优质胚胎数[（2.94±2.76）个]均显著低于常规IVF组[分别为（7.05±4.74）个、（3.40±3.03）个]（P〈0.05）,同时多原核（≥3PN）胚胎率（5.85%）也显著低于常规IVF组（8.26%）（P〈0.01）;两组患者的种植率、临床妊娠率及流产率比较无统计学差异（P〉0.05）;早期补救ICSI对首次IVF周期双原核（2PN）受精率的贡献值为4.25%,对优质胚胎率的贡献值为3.67%,对临床妊娠率的净贡献值为2.72%,总贡献值为3.49%。结论早期补救ICSI取得了和常规IVF相似的临床结局,有效提高了首次IVF周期的临床妊娠率,是针对IVF周期受精完全失败或低受精的有效治疗手段。

改良长方案在初次拮抗剂方案助孕治疗失败患者中的应用

目的:比较改良长方案和拮抗剂方案在初次拮抗剂方案失败患者中的临床结局。方法:回顾分析初次拮抗剂方案失败行再次IVF/ICSI助孕治疗的169例患者,其中130例采用改良长方案治疗(研究组),39例采用拮抗剂方案治疗(对照组)。结果:两组患者的一般情况无明显差异(P>0.05)。研究组的注射HCG日E2值、Gn用药时间和Gn剂量均显著高于对照组(P<0.05),注射HCG日LH值显著低于对照组(P<0.05)。研究组的临床妊娠率、种植率及活产率分别为55.2%、36.4%和46.4%,均显著高于对照组(27.3%、22.0%和21.2%)(P<0.05)。结论:初次拮抗剂方案失败行再次助孕治疗的患者中,改良长方案可能通过改善子宫内膜的容受性,获得了较拮抗剂方案更好的妊娠结局。

胚胎培养液中血管内皮生长因子的水平及其与IVF-ET结局的关系

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗患者胚胎培养液中血管内皮生长因子水平与早期胚胎质量及胚胎移植后临床结局的关系。方法留取第3天胚胎培养液,采用酶联免疫吸附试验检测培养液中血管内皮生长因子(VEGF)的水平。结果 (1)两组患者的平均年龄、获卵数、胚胎数、优胚数及移植胚胎的累积胚胎评分均无明显差异(P>0.05),妊娠组卵泡液内VEGF水平显著低于非妊娠组(P<0.05)。(2)Ⅰ级胚胎培养液中VEGF水平明显低于Ⅱ级胚胎培养液中VEGF水平(P<0.01)。结论胚胎培养液中VEGF的水平可以作为预测胚胎质量及妊娠结局的参考指标之一。

<35岁卵巢储备好的首次IVF-ET助孕患者应用改良长方案妊娠率的影响因素

目的:分析影响<35岁卵巢储备好的患者体外受精-胚胎移植临床妊娠率的因素。方法:回顾性分析2013年至2014年于我院生殖中心行首次IVF-ET助孕患者。入选标准为年龄<35岁,FSH<8IU/m L、基础窦卵泡数目≥8个,接受2个优质胚胎新鲜周期移植,排除子宫内膜异位症、多囊卵巢综合征、子宫畸形、子宫内膜病变、输卵管积水及合并甲状腺功能异常、糖尿病等疾病的患者。纳入746例,妊娠者542例。通过多因素Logistic回归筛选出妊娠独立预测因素。结果:未妊娠患者的基础卵泡刺激素、Gn启动剂量及胚胎放置距离宫底位置显著高于妊娠者。Logistic回归分析提示Gn启动剂量(OR=0.989,95%CI:0.983~0.995)及胚胎放置距离(OR=0.542,95%CI:0.365~0.807)是妊娠的独立预测因素,而基础FSH水平与妊娠没有显著关联(OR=0.923,95%CI:0.810~1.051)。结论:对于年轻卵巢储备好的患者,启动剂量和胚胎放置距离可能影响妊娠。

坛紫菜别藻蓝蛋白β亚基的表达及鉴定

根据GenBank(AY372218)中的相关序列设计引物,通过PCR的方法从质粒pMD-apcAB中扩增坛紫菜别藻蓝蛋白β亚基基因(apcB),并将其克隆到高效表达外源基因的原核表达质粒pTO-T7.将构建好的质粒导入表达型大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并对表达产物进行Western-blot和质谱鉴定.结果显示:apcB全长486 bp,表达的坛紫菜别藻蓝蛋白β亚基(APCβ)为带有原核表达载体T7g10的12个起始氨基酸的融合蛋白,其分子量约为18.0 ku.扫描分析的结果表明,0.5 mmol/L的IPTG在37℃诱导6 h时,APCβ的表达量达到最大,达菌体总蛋白40%以上.Western-blot和质谱鉴定的结果表明获得的融合蛋白为重组坛紫菜别藻蓝蛋白β亚基.

不同培养条件对坛紫菜叶状体体细胞发育分化影响的研究

本文以野生坛紫菜（Porphyra haitanensis）叶状体为材料，通过海螺酶酶解获得叶状体单离体细胞，探讨了细胞密度、光照强度对坛紫菜叶状体体细胞发育分化的影响．研究结果表明：细胞密度对坛紫菜叶状体单离体细胞的分裂、出苗具有明显的影响．其中，细胞培养3～5d时，分裂率随着细胞密度的增大而降低；5d时，1×10^3个／孔组的分裂速度显著大于其余各组的（P〈0．05）；12～19d时，随着细胞密度的增大，体细胞出苗率相应减小．光照强度对坛紫菜叶状体单离体细胞的分裂、出苗也具有显著影响．细胞培养5d时，分裂率随着光照强度的增大而增大；5～7d时，体细胞分裂速度随着光照强度增大而增大；9—19d培养期内，出苗率随着光照强度的增大而增大．本实验结果为坛紫菜转基因育种等研究提供了可资借鉴的基础资料．

改良长方案降调节后血清抗缪勒管激素变化的意义

目的探讨改良长方案降调节前后血清抗苗勒管激素(AMH)的变化对控制性促排卵以及临床结局的影响。方法回顾性分析改良长方案降调节前后AMH的变化,按照AMH变化<1ng/ml、下降>1ng/ml和上升>1ng/ml分为变化组、下降组、上升组,比较三组的控制性促排卵相关情况、取消移植率和妊娠率。结果①变化组促性腺激素(Gn)启动剂量和用药总量最高;获卵数和卵裂数最少,差异有显著性(P<0.001)。②三组取消移植率上升组最高(33.8%),变化组最低(25.1%),差异有显著性(P=0.026)。结论改良长方案降调节前后AMH变化过大可以降低Gn用药总量、增加获卵数和卵裂数,但同时也可导致取消移植率升高,并且不增加妊娠率。

人绒毛膜促性腺激素注射后取卵时间对卵子及胚胎质量的影响

目的探讨人绒毛膜促性腺激素（hCG）注射后不同取卵时间对辅助生殖技术（ART）周期中卵子及胚胎质量的影响。方法回顾性分析2012年8月—2013年6月在我院行体外受精／卵胞浆内单精子注射一胚胎移植术（IVF／ICSI．ET）长长方案治疗的1500个取卵周期。按注射hCG后取卵时间的不同，分为A组（注射hCG后35．0—35．5h），B组（注射hCG后35．6～36．0h）和c组（注射hCG后36．1—36．5h），比较三组的基本情况、促排卵情况、获卵率、成熟卵率、受精率、卵裂率及优质胚胎率。结果女方年龄、体质量指数、不孕年限、基础激素水平等一般情况比较三组间无统计学差异（P〉0．05），促性腺激素（Gn）的使用、hCG日激素水平及hCG日内膜厚度等促排卵情况比较三组间也无统计学差异（P〉0．05），三组的获卵率（80．3％、80．4％、81．4％）、2PN胚胎卵裂率（98．3％、98．2％、98．5％）、优质胚胎率（72．2％、72．4％、70．9％）比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。成熟卵率和正常受精率分别为85．1％、87．4％、87．7％和75．8％、77．3％、80．8％，三组间比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论35．0～36．5h的时间范围内，延迟注射hCG后取卵的时间能够改善卵子成熟率及正常受精率，但对获卵率、卵裂率、优质胚胎率没有影响。

早卵泡期长方案与拮抗剂方案治疗卵巢储备功能下降年轻患者的效果比较

目的比较早卵泡期长方案与拮抗剂方案治疗卵巢储备功能下降(DOR)年轻患者的效果.方法回顾性分析2016年1月~2017年6月我院收治的272例行体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)治疗的35岁以下DOR患者的临床资料,按照促排卵方案的不同将其分为A组(112例)和B组(160例).A组患者采用早卵泡期长方案,B组患者采用拮抗剂方案.比较两组患者的促排卵效果和妊娠结局,促排卵效果指标包括促性腺激素(Gn)使用总量、人绒毛膜促性腺激素(HCG)日黄体生成素(LH)、HCG日内膜厚度、获卵数、优质胚胎率及移植胚胎数,以临床妊娠率、种植率、活产率为妊娠结局的评价标准.结果 A组患者的Gn使用总量多于B组,HCG日LH水平低于B组,HCG日内膜厚度、获卵数、种植率、临床妊娠率及活产率均高于B组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者的优质胚胎率、移植胚胎数比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论对于DOR的年轻患者,早卵泡期长方案的效果优于拮抗剂方案,更适合作为超促排卵备选方案.

男性体重指数对体外受精胚胎移植助孕结局的影响

目的了解男性体重指数(body mass index,BMI)对体外受精胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVFET)助孕结局的影响。方法回顾性分析2013年1月至2017年12月因单纯输卵管因素在陆军第七十三集团军医院生殖医学中心接受IVF-ET辅助生殖技术治疗的3759对夫妻的病例资料,女性年龄均<35岁。将研究对象按男性BMI分为低BMI组(146对,BMI<18.5kg/m2)、正常BMI组(1969对,BMI:18.5~24.9kg/m2)和高BMI组(1644对,BMI>24.9kg/m2)。比较各组的基本资料,并采用多因素logistic回归分析评估男性BMI对IVF-ET助孕结局的影响。结果高BMI组与正常BMI组比较,临床妊娠率无显著差异,P=0.111,OR=0.890,95%CI 0.771~1.027,但是活产率与正常BMI组比较有显著下降,P=0.043,OR=0.869,95%CI 0.758~0.996。低BMI组与正常BMI组比较,妊娠结局无显著差异。结论男性BMI会对IVF-ET助孕结局产生影响。对即将接受辅助生殖技术治疗的夫妻,在进入治疗周期前,双方都应该采取相应措施以保持正常的BMI水平,才能有利于获得更好的助孕结局。

拮抗剂方案和卵泡期长效长方案超促排卵后冷冻胚胎移植结局分析

目的探讨拮抗剂方案和卵泡期长效长方案超促排卵后冷冻胚胎移植结局。方法选取2012年1月至12月间本中心采用拮抗剂方案(A组)和卵泡期长效长方案(B组)超促排卵后进行FET的患者各669例,对其临床资料进行回顾性分析。比较两组患者的一般资料、促排卵效果及冻融胚胎移植结局。结果两组患者一般情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。A组患者Gn总量及使用时间、HCG日雌二醇(E2)、获卵数、优质胚胎数明显低于B组(P<0.05),卵子成熟率及受精率明显高于B组(P<0.05)。两组患者临床妊娠率及活产率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论拮抗剂方案与卵泡期长效长方案促排卵后FET结局无明显差异,临床工作中可根据患者具体情况进行选择。

系统性护理干预在肥胖型PCOS不孕患者中的应用价值

目的探讨系统性护理干预在肥胖型多囊卵巢综合征不孕患者中的应用价值。方法选取陆军第73集团军医院2019年1月~2019年12月收治的80例肥胖型PCOS患者作为研究对象,按照随机数字表法分组方法分成对照组(40例)与试验组(40例)。对照组在促排卵前三个月及促排卵期间给予常规护理,试验组在常规护理基础上加上系统性护理干预,具体表现在生活作息、饮食、运动、心理方面。比较2组病人治疗后内分泌、糖代谢及妊娠的情况。结果实验组的内分泌及糖代谢的相关指标水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组的妊娠率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论系统性护理干预在改善肥胖型PCOS不孕患者糖代谢、内分泌、妊娠结局方面效果显著,在临床上有应用及推广价值。

男性吸烟对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探讨男性吸烟对体外受精-胚胎移植(in vitro fertilizationembryo transfer,IVF-ET)助孕结局的影响。方法以2014年1月-2019年6月单纯因输卵管因素,女方年龄≤35周岁在我中心接受辅助生殖技术治疗的3 188例患者为研究对象,将男性配偶不吸烟者作为对照组1 556例,吸烟者为实验组1 632例,比较两组的基本情况与临床结局,通过多因素logistics回归的方法探讨吸烟对活产率的影响。结果吸烟组的女方年龄与对照组相比较为年轻[(29.39±3.09)vs.(29.78±3.01),P <0.01],男方年龄,夫妻双方BMI(体质量指数),女方基础激素水平(基础FSH、LH、E2),男方精液常规,GN天数、GN总量、HCG日内膜厚度,实验室指标等差异无统计学意义。在妊娠结局方面,两组间妊娠率(70.89%vs. 67.71%)差异无统计学意义,但不吸烟组较高。而在活产率(58.52%vs. 62.24%,P <0.05)、种植率(51.93%vs. 55.33%,P <0.05)和流产率(11.95%vs. 9.34%,P<0.05)上,吸烟组低于对照组。在多因素logistics中,当校正了包括女方年龄、不孕年限、双方BMI、精液参数、GN总量、HCG日内膜厚度、优质胚胎数、移植胚胎数等混杂因素后,吸烟与否(1 vs.0)的OR值为1.092,95%CI(1.031~1.378)。结论男性吸烟与否可以作为一项独立的因素预测IVF周期中活产情况。

不同来源精子对ICSI助孕结局的影响

目的探讨不同来源精子对卵胞浆内单精子注射助孕结局的影响。方法回顾分析我中心2008年1月至2012年6月1129个ICSI治疗周期,射出A组858例,附睾穿刺B组229例,睾丸穿刺C组42例,比较3组的临床结局。结果 A组年龄较B、C组大,内膜厚度薄;C组获卵数及ICSI卵数较A、B组多;B组优质胚胎率高于A组,种植率及活产率高于A、C两组(P<0.05)。通过多元逻辑斯蒂回归模型分析精子来源与活产率的相关性,校正混杂因素后,A组相对于B组的OR值为0.559(95%CI 0.416-0.752),C组相对于B组的OR值为0.513(95%CI 0.264-0.998)。结论附睾穿刺来源精子行ICSI可获得较好的临床结局。

促性腺激素释放激素激动剂预处理对人子宫内膜基质细胞蜕膜化的影响

目的探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)预处理对人子宫内膜基质细胞蜕膜化的影响。方法分离并纯化正常人的原代子宫内膜基质细胞,先以100 n M的GnRH-a预处理人子宫内膜基质细胞不同时间,再用环磷酸腺苷(c AMP)诱导基质细胞蜕膜化,设置诱导蜕膜化同时添加GnRH-a(终浓度100 n M)的共处理组及未经GnRH-a预处理直接诱导蜕膜化的对照组,比较各组间蜕膜标志物的表达水平。结果 GnRH-a预处理人子宫内膜基质细胞一定时间后再诱导蜕膜化能显著提高蜕膜标志物催乳素(PRL)、胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)及层粘连蛋白亚单位1(LAMA-1)的表达水平,而诱导蜕膜化同时添加GnRH-a共处理对基质细胞蜕膜化无显著影响。结论 GnRH-a预处理能促进人子宫内膜基质细胞蜕膜化。

改良长方案对体外受精-胚胎移植患者累计妊娠率和活产率的回顾性分析

目的回顾性分析采用改良长方案和经典长方案控制性超促排卵的不孕症患者妊娠结局,以评估改良长方案对体外受精-胚胎移植患者的累计妊娠率和活产率的影响。方法收集我院2008年-2012年因输卵管盆腔因素行体外受精-胚胎移植患者的病例资料,根据促排卵方案分为改良长方案(931例)与经典长方案(370例)两组,比较两组患者的累计妊娠率和活产率。结果 1.改良长方案组新鲜周期活产率(54.84%)明显高于经典长方案组(33.03%),有显著统计学意义(P<0.001)。2.上述患者中共有348例改良长方案和179例经典长方案行解冻复苏移植周期,改良长方案组活产率(48.28%)高于经典长方案组(32.40%),有显著统计学意义(P<0.001)。3.改良长方案组周期累计妊娠率(74.86%)与经典长方案组比较,(70.27%)无统计学差异(P=0.334),但改良长方案组累计活产率(63.05%)高于经典长方案组(44.86%),有显著统计学意义(P<0.001)。结论改良长方案不能增加患者的周期妊娠率,但可以提高患者的周期活产率。

胚胎培养液中血管内皮生长因子的水平与胚胎质量的关系

目的探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗患者胚胎培养液中血管内皮生长因子(VEGF)水平与不同发育阶段胚胎质量的关系。方法留取第3天卵裂期及第5-6天囊胚期的胚胎培养液,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养液中VEGF的水平。结果 1囊胚期胚胎培养液中VEGF水平明显高于卵裂期胚胎培养液中VEGF水平(P<0.05)2在第3天卵裂期胚胎中,具有胚胎质量较好的Ⅰ级胚胎对应的胚胎培养液中VEGF水平比胚胎质量稍差的Ⅱ级对应的胚胎培养液中VEGF水平明显低,差异有统计意义(P<0.01)。3不同质量囊胚胚胎培养液中VEGF水平无统计学差异(P>0.05)。结论胚胎培养液中VEGF的水平可以作为预测胚胎质量的参考指标之一。

改良长方案致卵巢低反应发生率及其助孕结局

目的:探讨改良长方案的临床应用价值。方法:回顾性分析行IVF/ICSI-ET助孕治疗的改良长方案752个取卵周期,并以常规长方案538个取卵周期为对照,比较移植周期的一般资料和临床结局,分析改良长方案的卵巢低反应发生率及其助孕治疗结局。结果:改良长方案的妊娠率、种植率、活产率高,流产率低,与常规长方案组相比有显著统计学差异(P<0.05);比较卵巢低反应周期,2种方案的卵巢低反应发生率无统计学差异(P>0.05);改良长方案的低反应组Gn使用剂量大,使用时间长,但获卵数、移植周期取消率、流产率与常规长方案无统计学差异,而妊娠率、种植率、活产率均高于长方案,差异有显著统计学意义(P<0.05)。结论:与常规长方案相比,改良长方案卵巢低反应发生率无明显增高,临床结局优于常规长方案。

促排卵对不同病因宫腔内人工授精的结局分析

目的：探讨促排卵对不同病因不孕患者人工授精的影响。方法：回顾性分析因男性因素、输卵管盆腔因素、子宫内膜异位症（EMS）和不明原因进行人工授精患者的资料，根据患者进行自然周期或促排卵周期分组，比较不同周期组的临床妊娠率和活产率。采用多元回归分析模型校正患者年龄、不孕年限、不同因素构成比、基础FSH、LH、E2、子宫内膜厚度、类型、宫腔内人工授精（IUI）Zl卵泡直径及男性前向运动精子总数。评估在男性因素、输卵管盆腔因素、EMS和不明原因中促排卵周期与临床妊娠率的关系。结果：①促排卵组患者平均年龄、不孕年限以及不孕因素构成比（男性因素、输卵管盆腔因素、EMS和不明原因）与自然周期比较，无统计学差异仔，〉0．05），而临床妊娠率和活产率均高于自然周期，但无统计学差异（P=0．08）：②通过多元因素回归分析校正了年龄、基础内分泌水平、不孕因素、内膜厚度和类型及前向运动精子总数等混杂因素后，促排卵周期相对于自然周期依然有显著优势（锨=1．607；95％CI=1．115--2．316）；（D在不同因素不孕患者中，促排卵周期可提高输卵管盆腔因素患者的活产率（OR=4．56；95％CI=1．53～13．53）。结论：促排卵周期可提高输卵管盆腔因素患者宫腔内人工授精的·临床妊娠和活产率。