花鲈肠上皮细胞原代培养及鉴定方法的探讨研究

为探究建立稳定可靠的花鲈肠上皮细胞原代培养方法,通过组织块法和酶消化法培养花鲈肠上皮细胞,确定酶消化法的最佳消化液及消化时间,所得细胞悬液于L-15培养液中进行培养。利用形态学观察、透射电镜观察和碱性磷酸酶染色方法对细胞进行鉴定。结果显示:组织块法细胞迁出情况不稳定,且迁出时间较长;酶消化法的最佳消化液为胶原酶Ⅰ、Ⅳ联合消化液,最佳消化时间为45 min;胶原酶Ⅰ、Ⅳ联合消化法获得的细胞连接紧密、排列整齐、呈上皮细胞典型的“铺路石”状,细胞相对独立、界限清晰。透射电镜观察和碱性磷酸酶染色进一步证实所培养的细胞为肠上皮细胞。总之,经胶原酶Ⅰ、Ⅳ联合消化液消化45 min、培养48 h可得到初始条件一致、生长旺盛的花鲈原代肠上皮细胞。

拮抗哈维氏弧菌的黄姑鱼肠道原籍益生菌的体外筛选

试验旨在筛选对哈维氏弧菌具有防治作用的益生菌。试验通过比较红头病和健康黄姑鱼肠道微生物差异,进一步通过体外抑菌试验、药敏试验、生物安全性试验,筛选出对红头病病原哈维氏弧菌B0003具有拮抗作用且对宿主安全的肠道益生菌候选菌株。结果显示,红头病和健康黄姑鱼肠道微生物存在较大差异,选择12株候选菌株测试其对哈维氏弧菌B0003的拮抗作用。体外抑菌试验发现,5株候选菌对哈维氏弧菌B0003具有明显抑制作用,其抑菌能力由强到弱依次为:暹罗芽孢杆菌B0E14、贝莱斯芽孢杆菌DM5、巨大芽孢杆菌B1M2、枯草芽孢杆菌B0E9、粪肠球菌AT5。这5株拮抗菌均不具有溶血活性,且不会对黄姑鱼健康造成不利影响,对大多数抗菌药物敏感。研究表明,试验筛选的5株候选菌具有作为益生菌用于黄姑鱼红头病防治的潜力。

虾青素对组胺胁迫下美洲鳗鲡幼鱼肝脏健康的影响

试验旨在研究虾青素对组胺胁迫下美洲鳗鲡幼鱼肝脏健康的影响。选取初重为(25.01±0.17)g的美洲鳗鲡幼鱼(Anguilla rostrata)400尾,随机分为4组(每组4个重复,每个重复25尾鱼),即对照组(CK组)、H组、H+AST4组、H+AST8组,分别饲喂基础饲料、高组胺饲料及在高组胺饲料中添加4、8 mg/kg虾青素的试验饲料。试验期70 d。结果显示,与CK组相比,H组血清谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性升高(P<0.05);肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)含量、总抗氧化能力(T-AOC)均降低(P<0.05),丙二醛(MDA)含量提高(P<0.05)。H+AST4组和H+AST8组血清AST和ALT活性均低于H组(P<0.05);肝脏SOD、CAT、GSH-Px、GSH、T-AOC高于H组(P<0.05),MDA含量低于H组(P<0.05)。与CK组相比,H组肝脏细胞界限模糊,肝小叶结构不完整,有较多肝细胞出现细胞核偏移和空泡变性现象;H+AST4组和H+AST8组肝脏细胞界限明显,呈多角形,核大而圆,位于中央清晰可见,与CK组相比无明显变化。研究表明,组胺胁迫下添加4 mg/kg虾青素可降低美洲鳗鲡幼鱼血清转氨酶活性及肝脏MDA含量,提高肝脏抗氧化能力,改善肝脏结构形态,有益于肝脏健康;添加8 mg/kg虾青素对美洲鳗鲡幼鱼上述指标无进一步的改善效果。

一流专业建设驱动下《配合饲料学》课程教学改革思考与探索

[目的]探索《配合饲料学》课程教学改革的路径。[方法]通过阐述在“新农科”背景下一流课程建设的内涵、理论与路径和分析《配合饲料学》课程的特点来探索《配合饲料学》课程教学改革的路径。[结果]进一步明确了课程定位,确立了课程教学改革思路与改革举措,创新了课程教学内容与教学方式,拓展了课程教学实践元素等内容。[结论]实施《配合饲料学》课程教学改革方案后,课程教学体系得到优化,教学质量持续提升,教学改革取得明显成效。

不同规格花鳗鲡肌肉营养成分比较分析

研究旨在比较3种规格花鳗鲡肌肉常规营养成分、氨基酸含量和脂肪酸组成的差异情况。实验选用投喂相同饲料而不同规格的24尾花鳗鲡,分为10P组(体重约100 g/尾)、4P组(体重约250 g/尾)、2.5P组(体重约400 g/尾),进行肌肉基本营养成分、氨基酸含量和脂肪酸组成测定和分析,每个组8重复。结果表明:2.5P组的粗蛋白含量最高;10P组粗脂肪含量最高;氨基酸总量高低依次为4P组(64.99%)>2.5P组(62.52%)>10P组(60.84%),4P组必需氨基酸总量、非必需氨基酸总量和鲜味氨基酸总量均最高;花鳗鲡肌肉多不饱和脂肪酸中的二十碳五烯酸与二十二碳六烯酸之和所占比例由高到低分别为4P组(10.64%)>2.5P组(9.80%)>10P组(9.06%)。结果表明,3种规格花鳗鲡肌肉营养价值存在一定差异,4P花鳗鲡肌肉营养价值总体上最高。

发酵杜仲叶粉对蛋鸡生产性能、鸡蛋胆固醇和脂质代谢的影响

旨在研究蛋鸡饲粮添加发酵杜仲叶粉、杜仲叶粉对蛋鸡产蛋性能、鸡蛋胆固醇和脂肪代谢的影响。选取900只体质量相近、健康的23周龄海兰褐蛋鸡,采用单因素完全随机试验设计,随机等分为5个处理,每处理6个重复,每重复30只鸡。Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮;试验Ⅱ~Ⅳ组分别按基础饲粮质量分数0.1%、0.3%、0.5%的剂量添加发酵杜仲叶粉,试验Ⅴ组按质量分数0.5%的剂量添加杜仲叶粉。正试期为8周。结果表明：（1）饲粮添加发酵杜仲叶粉能显著提高试验的全期产蛋率（P〈0.05）,以0.3%发酵杜仲叶粉组的产蛋率最高,0.5%发酵杜仲叶粉组可显著增加平均蛋质量（P〈0.05）,0.3%发酵杜仲叶粉组的料蛋比最低;饲粮添加发酵杜仲叶粉、杜仲叶粉均能显著降低蛋黄胆固醇质量浓度（P〈0.05）,其中,以0.5%发酵杜仲叶粉组的蛋黄胆固醇最低;饲粮添加发酵杜仲叶粉、杜仲叶粉均可显著降低蛋鸡血液总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）的质量浓度（P〈0.05）,显著增加血液中高密度脂蛋白（HDL）的质量浓度（P〈0.05）。其中,以0.3%发酵杜仲叶粉组的血液TC质量浓度最低,以0.5%发酵杜仲叶粉组的血液TG、LDL质量浓度最低,以0.5%发酵杜仲叶粉组的血液HDL质量浓度最高;（2）与添加0.5%杜仲叶粉组相比,0.5%发酵杜仲叶粉组平均蛋质量显著增加（P〈0.05）,0.3%发酵杜仲叶粉组产蛋率显著增加（P〈0.05）,0.3%、0.5%发酵杜仲叶粉组的料蛋比、蛋黄胆固醇质量浓度、血液TC、TG、LDL质量浓度显著降低,HDL质量浓度显著升高（P〈0.05）,0.1%发酵杜仲叶粉组与0.5%杜仲叶粉组差异不显著（P〉0.05）。可见,饲粮添加发酵杜仲叶粉能够改善蛋鸡生产性能、调节血液脂肪代谢,添加杜仲叶粉对于蛋鸡的血液脂肪代谢、蛋黄胆固醇有一定的调节作用。0.1%的发酵杜仲叶粉可替代0.5%杜仲叶粉,发酵杜仲叶粉的适宜添加量为0.3%。

美洲鳗鲡幼鱼饲料中鱼油的适宜添加水平研究

为研究饲料中鱼油添加水平对美洲鳗鲡(Anguilla rostrata)幼鱼生长性能、消化酶、体成分及肝脏脂肪代谢的影响,以确定美洲鳗鲡幼鱼饲料中鱼油的适宜添加水平,选用初始体重(8.34±0.12) g的美洲鳗鲡幼鱼800尾,随机分成5组,每组4个重复,每个重复40尾;分别投喂添加0(对照组)、3%(FO3组)、6%(FO6组)、9%(FO9组)和12%(FO12组)鱼油的试验饲料,试验期56d。结果表明,饲料中添加鱼油显著影响美洲鳗鲡幼鱼生长性能, FO6组美洲鳗鲡幼鱼的增重率、投饵率和饲料效率显著高于其他处理组(P<0.05)。与对照组相比,鱼油添加组美洲鳗鲡幼鱼肠道脂肪酶活性显著提高(P<0.05),蛋白酶和淀粉酶活性显著降低(P<0.05);FO6组、FO9组和FO12组全鱼粗脂肪含量显著提高(P<0.05),全鱼粗蛋白质含量在FO12组显著降低(P<0.05),全鱼水分和灰分含量无显著变化(P>0.05);FO9组和FO12组脂肪酸合成酶活性显著降低(P<0.05), FO12组脂蛋白酯酶和肝脂酶活性显著升高(P<0.05)。综上,饲料中添加适宜鱼油水平可以提高美洲鳗鲡幼鱼的生长性能,调节肠道脂肪酶活性、全鱼粗脂肪含量和肝脏脂肪代谢酶水平或活性;美洲鳗鲡幼鱼获得最佳增重率和饲料效率时,饲料中鱼油添加水平推荐为6.43%—6.78%。

鳗用进口白鱼粉和红鱼粉的营养成分比较

试验旨在比较鳗用进口白鱼粉和红鱼粉的常规营养成分和氨基酸水平差异情况。试验设置白鱼粉组和红鱼粉组,每组4个重复,不同鱼粉样品的粗蛋白质水平接近且均高于64.5%。结果显示,白鱼粉的水分和粗蛋白质含量显著低于红鱼粉(P<0.05),灰分、钙和磷含量显著高于红鱼粉(P<0.05)。白鱼粉中天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、精氨酸水平显著高于红鱼粉(P<0.05),其中相差值大于10%的氨基酸为丝氨酸和甘氨酸。白鱼粉中组氨酸、赖氨酸和色氨酸水平显著低于红鱼粉(P<0.05),其中相差值大于10%的氨基酸为组氨酸和色氨酸。白鱼粉的总非必需氨基酸和总氨基酸含量显著高于红鱼粉(P<0.05)。研究表明,与红鱼粉相比,白鱼粉水分、粗蛋白质含量较低,灰分、钙和磷的含量较高;白鱼粉丝氨酸和甘氨酸含量较高,组氨酸和色氨酸含量较低。