橄榄苦苷对IL-1β诱导的大鼠软骨细胞损伤的作用及机制研究

目的:研究橄榄苦苷对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的SD大鼠关节软骨细胞的影响。方法:采用酶两步顺序消化法消化SD大鼠关节软骨分离细胞,体外培养软骨细胞,光学显微镜观察细胞形态,阿尔新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化法对软骨细胞进行鉴定。橄榄苦苷对软骨细胞的细胞毒性采用CCK-8实验进行评估。取第3代软骨细胞,分别用浓度为10、50或100μmol/L的橄榄苦苷预先处理,随后用IL-1β刺激细胞24 h,所生成的NO和前列腺素E2(PGE2)的量分别用格里斯重氮化反应和酶联反应吸附实验进行评估。基质金属蛋白酶(MMP)-1和MMP-13 mRNA的表达利用实时荧光定量PCR进行定量检测。采用免疫印迹实验分析诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶2(COX-2)和活化NF-κB的蛋白表达。结果:软骨细胞在不同浓度橄榄苦苷培养24 h后,其生存能力与对照组相比无明显差异。橄榄苦苷可以显著降低IL-1β刺激下软骨细胞MMP-1和MMP-13 mRNA的表达及NO、PGE2的生成。橄榄苦苷通过减少IκB蛋白的降解从而抑制IL-1β介导的NF-κB通路的活化。结论:橄榄苦苷可通过NF-κB信号转导通路调控炎症的发生发展,进一步明确了橄榄苦苷对关节炎防治作用的分子机制,为骨关节炎的免疫治疗提供了重要的基础理论依据。

紫铆因通过自噬途径促进骨肉瘤细胞凋亡及机制研究

目的研究紫铆因对骨肉瘤细胞凋亡及自噬的影响,并探讨自噬在紫铆因抗骨肉瘤中的作用。方法分别以不同浓度紫铆因作用骨肉瘤细胞24h和30μmol/L紫铆因作用骨肉瘤细胞不同时间,使用CCK-8试剂盒测定细胞活性变化;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase3及自噬相关蛋白p62、LC3、Beclin-1的表达情况;TUNEL染色检测骨肉瘤细胞的凋亡情况;透射电子显微镜检测自噬泡的产生;最后分别用自噬激动剂和自噬抑制剂预处理后再加入紫铆因作用于骨肉瘤细胞,并重复上述实验。结果紫铆因作用后,骨肉瘤细胞的活性明显下降,Bax、Cleaved caspase3、Beclin-1、LC3 Ⅱ的表达增加,而Bcl-2、p62的表达降低,骨肉瘤细胞出现明显的凋亡现象,透射电子显微镜观察到紫铆因处理组有较多自噬泡产生;使用自噬抑制剂预处理骨肉瘤细胞后,紫铆因对骨肉瘤的凋亡效果被逆转,而使用自噬激动剂预处理骨肉瘤细胞后,紫铆因使骨肉瘤细胞凋亡的效果进一步增强。结论紫铆因可以降低骨肉瘤细胞活性并促进其凋亡;同时紫铆因可以激活自噬,促进骨肉瘤细胞凋亡。

髋关节直接前入路切口远端延长相关应用解剖学研究

目的为髋关节直接前入路远端延长及其易损伤结构提供解剖学依据。方法参照手术入路层次对10个成年尸体下肢标本相关结构和重要的神经血管进行解剖观测。结果股外侧皮神经外侧支与切口线的距离在X1、X2、X3线平面上分别为(0.61±0.39)、(-0.65±0.39)、(-0.10±0.32)cm,股外侧皮神经内侧支与切口线的距离在X1、X2、X3线平面上分别为(1.53±0.52)、(0.67±0.56)、(1.28±0.56)cm。旋股外侧动脉各分支(升支、横支、降支)与切口线的交点与髂前上棘(ASIS)的距离分别为(7.77±0.79)、(11.01±1.48)、(14.91±1.48)c m,旋股外侧动脉各分支(升支、横支、降支)与切口线的交点与X1线平面的距离分别为(0.48±0.58)、(4.99±1.18)、(7.35±1.07)c m。股神经股外侧肌支分支(最上支、最下支)入肌点与ASIS的距离分别为(11.26±0.96)、(15.09±1.74)cm,股神经股外侧肌支分支(最上支、最下支)入肌点与X1线的距离分别为(4.70±2.09)、(7.71±1.45)cm。结论转子间线的远端是许多神经分支的入点,髋关节直接前入路切口的远端延长不应超过大转子平面以下1.1cm。

2型糖尿病发病年龄与维生素D水平的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)发病年龄与维生素D水平的关系。方法选择2020年1-12月浙江省台州市中心医院T2DM患者362例,按发病年龄分为低龄组(<40岁)136例、中龄组(≥40~50岁)100例和高龄组(≥50岁)126例,分别记录患者的性别、年龄、病程、发病年龄、身高、体质量并计算体质量指数(BMI)、空腹血糖、糖化血红蛋白、25羟维生素D、骨密度。结果362例T2DM患者中有149例(46.7%)合并骨质疏松。发病年龄越大,维生素D水平反而越高(P<0.05),三组骨质疏松患病率分别为37.5%、41.0%、45.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。根据病程将三组分为≥10年与<10年患者,结果显示,在低龄组中,随着病程的增加,骨质疏松发病率增加(P<0.05),这一现象在中龄组与高龄组并未出现(P>0.05)。Pearson相关性分析发现,维生素D水平与T2DM发病年龄呈正相关(r=0.127,P<0.05)。结论T2DM发病低龄组其骨质疏松的风险增加,特别是病程≥10年患者。临床上应重视对其骨代谢指标的管理,适当补充钙和维生素D,以改善预后并提高生活质量。

p27在调节骨量和骨转换中的作用及机制研究

目的:明确p27在调节骨量和骨转换中的作用及机制。方法:选择同窝8周龄p27基因敲除(p27-/-)和同窝野生型(WT)小鼠胫骨和股骨行骨髓抽除术,利用影像学和组织病理学方法比较分析了术后3、7、11、14 d上述两组小鼠骨发生和骨转换的差异。结果:骨髓抽除术后3 d,WT和p27-/-小鼠骨髓均无明显新骨形成,但术后7、11、14 d,p27-/-小鼠骨髓中的新形成骨量均较WT小鼠明显增加。进一步研究发现,与WT小鼠相比,术后7、11、14 d,p27-/-小鼠骨髓腔中成骨细胞数和Ⅰ型胶原阳性面积均明显增加,而破骨细胞数和破骨细胞面均明显减少。结论:p27能够通过抑制成骨细胞骨形成,促进破骨细胞骨吸收,从而减少骨量并抑制骨转换。

紫铆因对骨肉瘤细胞凋亡和转移的影响及其机制

目的:研究不同浓度的紫铆因对U2OS骨肉瘤细胞的凋亡及侵袭转移作用的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:U2OS骨肉瘤细胞在不同浓度的紫铆因作用下处理24 h,CCK-8细胞活性试剂盒测定U2OS骨肉瘤细胞活性的变化;Western blot法测定U2OS骨肉瘤细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2,侵袭转移相关蛋白MMP-2、MMP-9,PI3K-Akt细胞信号通路相关蛋白的表达情况;Tunel法检测U2OS细胞的凋亡情况。结果:25、50、100μmol/L紫铆因处理组与0μmol/L紫铆因组比,细胞活性差异均有统计学意义(P<0.05);50、100μmol/L紫铆因处理组与0μmol/L紫铆因组比,Bax的表达量增加,Bcl-2、MMP-2、MMP-9表达量降低,PI3K-Akt信号通路相关蛋白表达量下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:紫铆因可以促进U2OS骨肉瘤的凋亡并抑制其侵袭转移,这种作用可能是通过抑制PI3K-Akt信号通路来实现的。

锁扣带袢钛板联合锚钉治疗Tossy Ⅲ型肩锁关节脱位的疗效分析

目的比较锁扣带袢钛板(TightRope)重建喙锁韧带联合锚钉修复肩锁韧带与单纯锁骨钩钢板治疗TossyⅢ型肩锁关节脱位的疗效。方法将72例Tossy Ⅲ型肩锁关节脱位患者按内固定方法分为观察组(采用TightRope+3.5 mm锚钉,35例)和对照组(采用锁骨钩钢板,37例)。记录两组手术时间、术中出血量及术后并发症;按Constant-Murley肩关节功能评分评价疗效。结果患者均获得随访,时间12~18个月。对照组于术后6~11个月拆除内固定。两组手术时间、术中出血量差异无统计学意义(P>0.05)。术后3、6个月及末次随访Constant-Murley肩关节功能评分:观察组分别为(88.4±1.7)、(90.0±2.9)、(90.8±2.4)分,对照组分别为(82.1±2.1)、(86.4±1.8)、(86.6±1.7)分,差异均有统计学意义(P<0.05)。并发症发生率:观察组为5.71%,对照组为24.32%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论与单纯锁骨钩钢板相比,TightRope重建喙锁韧带联合锚钉修复肩锁韧带治疗Tossy Ⅲ型肩锁关节脱位可以更好地促进肩关节功能恢复,减少肩峰撞击及肩峰下骨溶解等并发症的发生,并能避免二次内固定取出术。

MODY基因多态性与早发2型糖尿病相关性研究进展

早发2型糖尿病(T2DM)不仅严重威胁着患者的身心健康,也给社会带来沉重的经济负担,而遗传因素在早发T2DM发病中起着重要作用。青少年发病的成人型糖尿病(MODY)发病相关基因的单核苷酸多态性在早发T2DM患者中导致其遗传易感性增加的现象逐渐引起重视。该文对MODY基因与早发T2DM的相关性研究进展进行文献综述。

老年髋部骨折患者术后谵妄发生的危险因素分析

目的探讨老年髋部骨折患者术后谵妄发生的临床独立危险因素。方法回顾性分析自2013-04—2014-12诊治的272例老年髋部骨折,根据术后患者是否发生谵妄分为谵妄组和非谵妄组,相继采用单因素分析及Logistic多因素回归分析从14项可能危险因素中筛选出谵妄发生的独立危险因素。结果 63例术后发生谵妄,谵妄发生率为23.2%。单因素分析结果显示,高龄、术前白蛋白(<35 g/L)、术前合并基础疾病数量(≥3种)、麻醉方式(全身麻醉/椎管内麻醉)、手术时间(≥2.5 h)、术后使用镇痛泵及术后发生低氧血症与谵妄的发生有显著的相关性关系,可能是谵妄发生的高危因素。Logistic多因素回归分析结果显示,高龄、术前白蛋白(<35 g/L)、术前合并基础疾病数量(≥3种)及手术时间(≥2.5h)该4项危险因素为术后患者发生谵妄的高危独立危险因素。该4项危险因素的OR值分别为13.865、1.837、2.140、2.437。结论高龄、术前白蛋白<35 g/L、术前合并基础疾病数量≥3种及手术时间≥2.5 h 4项危险因素为老年髋部患者术后发生谵妄的独立危险因素。