三种大鼠急性肺损伤模型的比较

目的比较腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、气管滴注LPS和盲肠结扎穿刺(cecal ligation and puncture,CLP)诱导的3种急性肺损伤模型的差异。方法 70只成年SD大鼠随机分为7组:正常组、腹腔注射LPS组(10mg/kg,LPS-IP组)及其假手术组(SHAM-1);气管滴注LPS组(5mg/kg,LPS-IT组)及其假手术组(SHAM-2);盲肠结扎穿刺组(CLP)及其假手术组(SHAM-3)。于造模后24h,收集各组大鼠的动脉血用于血气分析,并通过二喹啉甲酸(bicinchoninic acid,BCA)蛋白测定法、血细胞计数板以及瑞氏-姬姆萨染色分别对肺泡灌洗液中的蛋白含量、细胞总数和类别进行统计,同时利用湿干比和苏木精-伊红(HE)染色法来评价肺组织的损伤程度。结果 LPS-IT组和LPS-IP组的肺灌洗液总蛋白浓度、总细胞数均高于正常组和假手术组(P<0.05),湿干比明显增高(P<0.05),PaO2低于正常组及相应的假手术组(P<0.05);LPS-IT组和LPS-IP组肺组织有明显病理变化,包括肺水肿和肺泡壁增厚,炎性细胞浸润。CLP组未见明显改变。结论在急性肺损伤的3种大鼠模型中,LPS-IT组和LPS-IP组肺损伤较为严重,CLP组未见明显肺损伤。提示腹腔注射LPS及气管给予LPS更适用于建立急性肺损伤模型以及后续应用药物的动物实验。

基于随机双盲安慰剂对照试验的一氧化碳吸入疗法在新生儿肺炎应用的安全性研究

目的探讨一氧化碳（CO）吸入疗法在足月新生儿中应用的安全性以及抗炎、抗氧化作用。方法纳入2013年3~6月第三军医大学附属大坪医院NICU住院的肺炎足月新生儿,随机分为8组,分别予以空氧气体（安慰剂）和10、20、30、40、50、60、70 mg·L-1浓度的CO吸入2 h;吸入安慰剂气体或CO期间持续观察受试者的反应,监测心率、血氧饱和度、呼吸和血压等生命体征,检测吸入前（0 h）和吸入后2和5 h时点血清碳氧血红蛋白（COHb）浓度,评估吸入CO的安全性;检测晚期氧化蛋白产物（AOPPs）、总抗氧化能力（TAOC）、丙二醛（MDA）和巨噬细胞炎症蛋白-2（MIP-2）水平,评估吸入CO的抗炎和抗氧化作用。结果 48例足月新生儿符合纳入和排除标准进入观察,每组各6例。8组间胎龄、年龄、体重、白蛋白、Hb和WBC计数等基线指标差异均无统计学意义。1CO 70 mg·L-1组1例因不良事件退出研究,其余受试者均完成试验;COHb在不同时点和8组间差异均无统计学意义（P〉0.05）;2随着吸入CO浓度的增加,MIP-2总体上呈下降趋势（P=0.000）,3个观察时点差异总体上有统计学意义（P=0.001）;TAOC水平8组间比较差异无统计学意义（P=0.917）,不同时点差异有统计学意义（P=0.005）;AOPPs和MDA在不同时点以及不同组间差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论吸入CO浓度≤60 ppm在新生儿肺炎中的应用是安全的,且具有抗炎和改善氧化应激状态的作用。

一氧化碳释放分子3通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻脂多糖诱导的新生鼠急性肺损伤

目的探讨一氧化碳释放分子3(CORM3)对脂多糖(LPS)诱导的新生鼠急性肺损伤(ALI)肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法 32只新生SD大鼠均分为对照组、LPS组、CORM3组和失活CORM3(i CORM3)组;LPS组、CORM3组和i CORM3组采用LPS气管内滴注建立新生鼠ALI模型,分别腹腔注射生理盐水、CORM3和i CORM3;对照组不建立ALI模型,腹腔注射生理盐水。于建模后12 h取肺组织,苏木素-伊红染色观察肺组织病理改变,湿干(W/D)比值测定,肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及蛋白含量测定。体外培养A549细胞,LPS诱导细胞凋亡。MTT检测细胞活性,Tunel染色观察组织、细胞凋亡变化。结果 1与对照组相比,LPS组肺组织形态结构明显紊乱,肺泡压缩,肺间质大量炎性细胞浸润;CORM3组肺组织形态结构基本正常,间质炎性细胞浸润少;i CORM3组见肺组织水肿及大量炎性细胞浸润。2与对照组相比,LPS组肺组织W/D比值、BALF细胞数及蛋白含量明显升高,肺泡上皮细胞凋亡率明显增多[(37.3±4.5)%vs(3.0±1.0)%];A549细胞活力下降,凋亡率明显升高[(29.6±4.1)%vs(3.6±1.0)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。CORM3组肺组织W/D比值、BALF细胞数和蛋白含量较LPS组显著下降,肺泡上皮细胞凋亡率减少[(19.3±4.6)%];A549细胞活力回升,凋亡率[(15.3±4.5)%]明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。LPS组与i CORM3组间上述指标差异均无统计学意义。结论 CO通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻新生鼠ALI。

一氧化碳抗炎机制研究进展

炎症是临床上常见而又重要的基本病理过程。过度的炎症反应对组织器官有着巨大的损伤作用。一氧化碳是一种小分子气体，在体内主要由血红素氧合酶降解血红素而生成，它的多种生物学活性均与其细胞保护功能有关，如抗炎、抗凋亡、抗增殖及舒张血管。基础研究发现：在多种炎症模型中，一氧化碳均具有良好的抗炎效应，其作用的主要细胞细胞信号通路包括丝裂原活化蛋白激酶信号通路、Toll样受体信号通路、核转录因子-κB信号通路、Janus激酶-信号传导和转录激活子信号通路等。临床研究中，一氧化碳并未取得良好的保护效果。该文探讨一氧化碳的抗炎作用机制，以期为更进一步研究提供理论参考。