青蒿素与DNA作用的电化学机理

在体积分数为20%乙醇的Britton-Robinson缓冲溶液(pH=7.4)中,利用循环伏安法和紫外可见吸收光谱法研究了青蒿素与DNA的相互作用。电化学研究表明,DNA的存在能导致青蒿素在银电极上-0.672 V处的还原峰电流下降,峰电位正移。通过对比双链DNA(dsDNA)和单链(ssDNA)与青蒿素作用,得出青蒿素可嵌插到DNA分子中,形成非电活性的复合物。电化学方法可计算出DNA与青蒿素的结合比为1∶4,结合常数为3.6×104。电极过程的电化学参数表明,DNA作用前后,α、β值变化不明显,进一步证实了该复合物是非电活性;Ks值变小,表明二者作用后受扩散控制。紫外可见吸收光谱法研究表明,青蒿素对DNA分子发生嵌插作用。通过光谱滴定法可计算二者的结合比和结合常数,同样获得1个DNA结合4个青蒿素分子,结合常数为4.0×104,与电化学方法测定结果相吻合。实验数据显示,青蒿素进入细胞内有可能与细胞核中DNA结合,诱导细胞凋亡。

青蒿素与转铁蛋白相互作用的光谱分析

应用分子荧光光谱与紫外-可见吸收光谱法研究了青蒿素与转铁蛋白分子间的相互作用,发现青蒿素对转铁蛋白有荧光猝灭作用,并对其作用机理做了探讨。依据F ster非辐射能量转移理论,测定了在30℃时,转铁蛋白-青蒿素间的结合常数(K=1.74×105L/mol)和结合位点数(n=0.696),结合距离(r=1.94nm);并采用同步荧光技术考察了青蒿素对转铁蛋白构象的影响。

应用型人才培养模式下的本科分析化学实验教学改革初探

培养大批应用型人才是我国高等教育的重要职责,也是我国社会经济发展的客观要求。针对目前应用创新性人才培养模式,建立与之相符的分析化学实验教学新体系,从教学内容、教学方式、教学手段几个方面提出了创新实验教学内容、转变教学方式、优化教学手段等改革思路和方法。这些创新性实践,对提高分析化学实验教学质量,培养学生实践应用和创新思维,起到很好的效果。

成都市某蔬菜基地重金属污染状况分析

分别用原子吸收和原子荧光光谱法 ,研究了成都市蔬菜基地蔬菜中 Cd、Pb、Zn、Cu、Hg、As的含量和相应的土壤中 Cu、Zn、Pb、Cd的含量。研究结果表明蔬菜中重金属含量均低于国家食品卫生标准。蔬菜中 Cd、Zn、Cu、Hg主要来自土壤 ,Pb、As主要来自大气降尘。温室种植能有效地避免蔬菜 Pb、As的污染。温室无土栽培应注液培养基中的重金属含量 ,以免导致二次污染。

转铁蛋白偶联双氢青蒿素氧基苯甲酰肼的载药量分析

在含20%乙醇的B-R缓冲溶液(V/V,pH=7.2)中,利用电分析化学方法测得双氢青蒿素氧基苯甲酰肼(dihydroartemisininoxy benzoic acid hydrazide,DBAH)在银电极上于-0.66V(vs.SCE)处有一不可逆还原峰。DBAH与被高碘酸钠氧化后的转铁蛋白(holotransferrin,Tf)结合形成电活性复合物,其还原峰峰电位由-0.16V负移至-0.84V,峰电流随DBAH和Tf浓度的增加而增加。该法测得一个Tf分子可以与3个DBAH分子连接,其结合常数为5.1×1010。紫外可见吸收光谱法测定结果与电化学测定结果相吻合。实验结果表明,Tf与DBAH共价结合形成电活性复合物。

抗-转铁蛋白-纳米金探针的制备及对转铁蛋白免疫识别的光谱分析

利用碳二亚胺(EDC)将抗-转铁蛋白化学偶联到已修饰了半胱胺的纳米金表面,制备了抗-转铁蛋白-纳米金免疫探针,应用共振瑞利散射光谱,紫外-可见吸收光谱,透射电镜和激光散射等方法对其进行了表征。所制备的纳米探针具有良好的免疫活性。由于抗-转铁蛋白对转铁蛋白抗原具有特异性识别能力,借助免疫纳米探针在470nm处共振瑞利散射信号的放大作用,对转铁蛋白抗原进行特异性识别及免疫分析。转铁蛋白浓度在0.85～33.9×10-10mol.L-1范围内,470nm处共振瑞利散射相对强度与转铁蛋白浓度呈良好的线性关系,检测下限为8.5×10-11mol.L-1。

利用微信公众号辅助大学分析化学实验教学

微信公众平台"一点对多点"的模式,为教学实践提供了独特的便利。我们在分析化学实验教学中,通过创建和利用微信公众号,实现基于操作规范知识点的碎片化,并通过改编实验讲义,将每一实验的阅读材料、实验内容、相关操作规范及实验室安全介绍有机地联系起来,不仅方便学生可以随时随地查看和实验有关的内容,也极大地方便了学生根据自己的需要有针对性的学习。并进一步利用微信公众平台实现了对学生实验过程更加全面的记录,能够弥补传统实验教学中难以对学生实验过程全员考核的缺陷,提高了考核的公平性,并有利于培养学生实事求是的科学素养。在加强师生交流,提高学生的实验学习效果方面,取得了很好的效果。

毛细管区带电泳法分离四种蛋白质的研究

采用毛细管电泳在较为极端的pH条件下对4种混合蛋白质进行分离,建立一种简单、高效、快速同时测定酸碱性蛋白质的方法。结果表明,在pH2和pH9的缓冲体系中混合蛋白质能够有效分离,添加改性剂SDS可提高分离效率。

分析化学实验教学中微视频的应用

《分析化学实验》是化学类专业一门极其重要的基础实验课程。通过对《分析化学实验》的教学现状进行详细分析,提出了传统的化学实验教学模式中存在师生比例小、仪器相对较少等一系列问题。鉴于目前微视频的应用普及,提出了在该课程中引入微视频教学,并从辅助学生预习、教师讲解、实验过程指导等方面阐述了微视频教学与传统教学相结合的优势。

用原子力显微镜研究阿莫西林对沙门氏菌和单核增生性李斯特菌的抗菌活性

目的:探测阿莫西林作用于沙门氏菌(G)和单核增生性李斯特菌(G^+)后2种菌体的形貌和生物力学特性的变化,探讨阿莫西林的抗菌活性和抗菌机理。方法:通过平板菌落计数法测细菌的失活率,利用原子力显微镜(AFM)对药物作用后细菌的表面形貌及细胞的硬度、粘附力做定性和定量分析。结果:平板菌落计数得,25μg/mL的阿莫西林作用1h后,沙门氏菌的失活率较李斯特菌的失活率大。AFM测量显示,与低浓度阿莫西林作用后,沙门细菌表面出现孔洞,而李斯特菌表面出现裂缝,力曲线测量显示,药物作用后针尖和细胞壁之间的粘附力明显增加,而杨氏模量(E)显著降低。结论:结合AFM图像可知形貌与生物力学特性的变化反映细胞壁的变化,细胞壁的成分由均一性变为异质性从而导致细菌的粘附力增加即F_(native)<F_(amoxicillin)药物作用破坏肽聚糖的交联和完整性使得肽聚糖断裂,使得杨氏模量降低即E_(native)>E_(amoxicillin)通过以上分析进一步探讨阿莫西林的杀菌机理和不同的细菌对阿莫西林的敏感程度。这些AFM数据为阿莫西林的临床应用提供可视化的数据支持。

基于聚苯胺纳米纤维复合膜界面构建电化学细胞传感器及其对癌细胞的识别检测

合成了聚苯胺纳米纤维,直径在50～70 nm之间;基于静电作用构建聚苯胺纳米纤维-纳米金复合膜界面,并在此界面上层层组装修饰叶酸分子,构建叶酸功能化传感界面,基于叶酸分子与癌细胞表面过量表达的叶酸受体之间的特异性识别作用,将此传感界面应用于对癌细胞的识别和捕获。结果表明:叶酸功能化传感界面能够特异性识别和捕获叶酸受体过量表达的癌细胞。采用电化学阻抗技术,以HeLa细胞为模型,应用于对癌细胞的识别和检测,细胞在1.0×104～6.4×106cells/mL浓度范围内与阻抗变化值ΔRct呈良好的线性关系;检出限为2000 cells/mL。本方法简单、快速灵敏、重现性和稳定性良好;制备的传感器可以再生使用。

基于原子力显微镜对华蟾素和姜黄素联合诱导Hela细胞凋亡的初步研究

目的:探讨华蟾素和姜黄素联合对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术测定细胞凋亡率,原子力显微镜(AFM)探测细胞形貌、细胞表面超微结构及粗糙度变化。结果:MTT实验显示,华蟾素和姜黄素联合对Hela细胞的增殖抑制率(64.04%±1.29%～75.07%±2.19%)较华蟾素单独用药(11.30%±0.6%～22.04%±0.96%)明显增加。流式细胞术结果表明,华蟾素和姜黄素联合诱导Hela细胞早期凋亡率(11.97%±1.36%～49.2%±2.36%)显著大于华蟾素单独用药(8.05%±0.21%～16.43%±0.29%),并且呈剂量依赖性。原子力显微镜(AFM)成像表明,随着联合用药浓度增大,细胞逐渐坍塌,核染色质浓缩和边集,最后核膜破裂,核基质结构虽然存在但遭破坏,呈现凋亡现象;膜表面颗粒粒径增大,平均粗糙度增加。结论:华蟾素和姜黄素联合能够增强诱导Hela细胞凋亡作用,两者联用为协同效应,这为宫颈癌治疗的药物选择提供了新的思路。