应用蛋白芯片-飞行质谱技术筛选宫颈癌血清差异蛋白质

目的筛选宫颈癌患者与健康女性血清之间的差异蛋白质,寻找宫颈癌早期诊断的生物学指标。方法采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)和弱阳离子结合芯片(CM10),检测24例宫颈鳞状细胞癌及25例年龄相匹配的健康女性的血清蛋白质,获得相应的指纹图谱,经生物信息学分析,筛选出一组有分类意义的差异蛋白质。结果宫颈癌与正常对照组比较,在分子量1.0～20kDa范围内,共有52种蛋白质质谱峰的差异有统计学意义(P<0.05),其中质荷比(M/Z)为4173.77、5903.09、6087.12、10716.9、6109.61、3397.41,在宫颈癌组的含量明显低于正常对照组(P<10-5);由软件自动建立2个诊断树模型,其一以单个差异蛋白质4173.77(M/Z)作为分类变量,其诊断宫颈癌的敏感性为75.0%,特异性为96.0%;其二以M/Z为5335.81、7562.99、9287.89的3个差异蛋白质建立分类模型,其诊断宫颈癌的敏感性为91.67%,特异性为96.0%。结论宫颈癌患者与健康正常女性血清蛋白质的表达存在差异,其中6个蛋白质差异非常显著,有可能作为宫颈癌早期诊断的生物学指标;同时以差异蛋白质所建立的诊断树模型,有助于宫颈癌患者的早期筛查。

血卟啉单甲醚对人宫颈癌Hela细胞体外影响的研究

目的:初步探讨血卟啉单甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)介导的光动力疗法(HMME-PDT)对体外培养的人宫颈癌Hela细胞的杀伤效应及影响宫颈癌细胞光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)杀伤效应的主要因素。方法:通过采用不同光敏剂浓度、光照能量密度及细胞孵育时间介导的光动力作用于人宫颈癌Hela细胞,MTT法检测24h后的细胞生长抑制率。结果:光敏剂浓度<2.5μg/mL的不同组细胞生长抑制率有明显差异,光照能量密度≥1.5J/cm2及孵育时间≥4h的细胞之间生长抑制率差异无统计学意义。HMME 2.5μg/mL、光照能量密度1.5J/cm2和孵育时间≥4h可能是PDT对Hela细胞杀伤作用的最佳参数。结论:特定光源下,光敏剂的浓度、光照剂量及孵育时间是影响HMME-PDT效应的主要因素。

蛋白芯片——飞行质谱技术在妇科肿瘤中的研究进展

蛋白芯片——飞行质谱技术是近年来发展较快、在肿瘤差异蛋白质研究中应用较广的一种蛋白质组学研究技术,它具有高效、高通量、只需微量样品进行检测等特点。本文对其原理、优势等进行介绍,并就近年来在妇科肿瘤中的研究进展方面作一综述。

宫颈鳞癌患者血清差异蛋白质与鳞状细胞癌抗原的关系

目的:研究宫颈鳞癌患者血清差异蛋白质与鳞状细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCCA)之间的关系,寻找早期诊断宫颈癌的生物学指标。方法:采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)和弱阳离子结合芯片(CM10),检测44例宫颈鳞状细胞癌及25例健康女性的血清蛋白质,将3组SCCA不同水平的宫颈癌患者分别与健康对照组进行对比,同时通过对比SCCA不同水平的宫颈癌患者,筛选出有分类意义的差异蛋白质。结果:(1)宫颈鳞癌SCCA正常患者与健康对照组比较,共有19种血清蛋白质质谱峰值差异具有显著性(P<0.001)。宫颈鳞癌SCCA升高患者(大于正常1倍)以及大于正常3倍组,分别与健康对照组比较,分别发现了26种和15种差异蛋白质(P<0.05)。其中有4种质荷比(M/Z)为4172、3397、2741、6086的差异蛋白质,重复出现于宫颈鳞癌SCCA正常或升高不同水平组与健康对照组的比较中。(2)在宫颈鳞癌患者中,SCCA小于正常3倍组与大于正常3倍组比较、SCCA小于正常4倍组与大于正常4倍组比较,分别发现了5种和20种差异蛋白质(P<0.05)。其中M/Z为8142、7765、3885、5632、9287的差异蛋白质,重复出现于上述两组比较中。结论:通过蛋白芯片-飞行质谱方法,能够更早的发现宫颈癌与正常人之间的血清差异蛋白质,这些差异蛋白质有潜力发展为宫颈癌早期诊断指标,有助于宫颈癌的筛查、区分早晚期宫颈癌以指导治疗,具有重要的临床应用价值。

参芪扶正注射液治疗慢性肺心病并发心衰临床观察

目的观察参芪扶正注射液治疗慢性肺心病并发心衰的疗效。方法将52例肺心病并发心衰患者随机分为治疗组与对照组,每组26例。两组均接受常规治疗,治疗组在常规治疗的基础上加用参芪扶正注射液250 mL(含党参、黄芪各10 g),每日1次,两组疗程均为15 d。心、肺、肝、肾、凝血功能及症状、体征为参照指标。结果治疗组心功能改善均优于对照组(P<0.05),血气分析指标改善与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。临床总有效率治疗组为92.31%,高于对照组的73.08%(P<0.05)。结论参芪扶正注射液作为常规治疗的辅助药物,能够安全有效缓解肺心病急性发作期的心功能衰竭。

无创动脉检测在2型糖尿病合并下肢血管病变的应用

目的分析无创动脉检测技术在2型糖尿病合并下肢血管病变的应用价值。方法选择2007年1月～2008年9月治疗的2型糖尿病患者56例为糖尿病组,选择同期健康体检人员60例为对照组,检测脉搏波传导速度(PWV)、踝臂指数(ABI)及脉压指数,对糖尿病组下肢动脉斑块情况进行统计。结果糖尿病组PWV[(19.08±5.16)m/s]高于对照组[(15.40±3.36)m/s],糖尿病组ABI(1.06±0.11)低于对照组(1.14±0.08),糖尿病组脉压指数(0.42±0.04)高于对照组(0.34±0.05),差异均有高度统计学意义(均P<0.01)。其中7例患者ABI<0.9,进一步行下肢动脉彩超发现5例患者有动脉斑块形成。结论无创动脉检测技术对2型糖尿病合并下肢血管病变患者有较好的敏感性,能早期发现动脉硬化和可能存在动脉阻塞患者,为临床早期干预治疗提供较好的应用价值。

β-榄香烯对人食管癌细胞Eca-109增殖、凋亡和迁移的影响

目的检测β-榄香烯对人食管鳞癌细胞Eca-109增殖、凋亡和迁移的影响,初步探讨其对食管癌细胞的作用机制。方法采用不同浓度的β-榄香烯(终浓度分别为0μg/m L、1μg/m L、20μg/m L、100μg/m L、200μg/m L、400μg/m L、600μg/m L)作用于Eca-109细胞后,CCK-8测定细胞增殖活力。同时采用Annexin V/PI双染法(β-榄香烯作用浓度为0μg/m L、10μg/m L、100μg/m L)检测细胞的凋亡率(流式细胞仪)。此外,采用β-榄香烯(0μg/m L、100μg/m L)作用细胞后,检测其对细胞迁移的影响(榄香烯浓度为0μg/m L组作为对照组)。β-榄香烯作用于细胞均为48 h。结果β-榄香烯孵育48 h后对食管癌细胞增殖抑制在不同浓度之间比较,差异均有统计学意义(P<0.05),同时,随着浓度增加,β-榄香烯对细胞的增殖抑制进一步增强,且其抑制作用存在剂量依赖性;不同浓度β-榄香烯对细胞的凋亡率间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);相对于对照组,β-榄香烯显著降低迁移细胞数,两者间差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论β-榄香烯显著抑制了Eca-109细胞的增殖活力,且其抑制存在剂量依赖性,同时可诱导凋亡及抑制细胞迁移,可能通过诱导细胞凋亡及抑制迁移发挥其抗肿瘤效应。

血卟啉单甲醚联合紫杉醇对宫颈癌Hela细胞杀伤效应的研究

目的初步探讨血卟啉单甲醚(HMME)介导的光动力疗法(HMME-PDT)联合紫杉醇(PTX)对人宫颈癌Hela细胞的杀伤效应。方法将宫颈癌细胞株Hela分为6组,a:空白对照组,b:化疗组,c:饱和光动力组,d1:化疗+低剂量光敏剂组,d2:化疗+中剂量光敏剂组,d3:化疗+高剂量光敏剂组。MTT法检测细胞生长抑制率。结果 d3组与a、b、c组及d1、d2组相比,差异均有显著性(P<0.01);d1、d2、d3各组之间相比,差异有显著性(P<0.05);b组及c组与a组相比,差异有显著性(P<0.05)。结论 HMME-PDT联合紫杉醇对体外培养的人宫颈癌Hela细胞有明显的杀伤效应,有可能作为一种新的治疗手段应用于临床。

ZNF281在食管癌组织中的表达及临床意义

目的明确锌指蛋白281(ZNF281)在食管癌组织中的表达情况并探讨食管癌患者的病理分化、分期对其表达量的影响。方法收集26例广州市番禺区中心医院及南方医科大学附属第三医院2014年4月25日至2017年5月2日26例经病理确诊的食管癌患者的癌组织及癌旁正常组织,采用realtime-PCR方法检测组织中ZNF281基因的表达量,并对不同病理分化程度(高、中、低分化)及不同分期(按2017 NCCN分期)的食管癌患者瘤组织间ZNF281相对表达量的差异进行亚组分析。结果 26例食管癌患者的瘤组织及癌旁正常组织中,ZNF281的表达在食管癌组织中相对癌旁正常组织显著上调,其差异有统计学意义(P<0.05)。同时,不同病理分化程度(高、中、低分化)对食管癌患者ZNF281相对表达量差异有显著影响,差异有统计学意义(P<0.05),而不同分期(Ⅱ、Ⅲ期)对食管癌患者ZNF281的相对表达量无显著影响,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ZNF281在食管癌瘤组织中的表达显著上调,可能与食管癌发生发展及调控其分化相关。

宫颈鳞癌患者手术前后的血清蛋白质指纹图谱差异研究

目的 研究宫颈鳞癌患者手术前后的三个不同时期以及与健康对照组之间的血清差异蛋白质。方法 采用SELDI-TOF-MS技术结合弱阳离子结合芯片(CM10),对宫颈鳞癌术前(A1组)、术后7~10 d(A2组)、术后30~40 d(A3组)及对照组的血清蛋白质指纹图谱进行动态分析,比较不同时期蛋白质图谱变化,筛选出有差异的血清蛋白质。结果 共得出两组血清差异蛋白质,第一组为宫颈鳞癌与对照组比较后的差异蛋白质,共16个,其中的12个差异蛋白质在A1组与A2组比较中差异有统计学意义;这16个差异蛋白质在术后7~10 d其含量均呈上升趋势,大部分在术后30~40 d恢复至对照组水平。第二组为12个差异蛋白质,它们在A1组与A3组比较中有显著差异,而且在A1、A2及A3组中含量不断上升,在术后30~40 d时恢复至对照组水平。结论 第一组差异蛋白质在宫颈鳞癌和对照组之间差异有统计学意义,可作为区分宫颈鳞癌与正常人生物学指标,同时两组差异蛋白质技术在宫颈鳞癌患者手术前后三个不同时期均有明显差异,预测它们能作为宫颈鳞癌手术疗效评价和术后病情监测的指标。

时间银行的发展现状、问题与对策分析——以NS时间银行为例

随着我国人口老龄化的到来,关于如何“养老”的问题深刻影响着整个社会的运行和家庭的运转。基于这样一种现实,作为新型互助养老模式的“时间银行”走进学者的研究视野。于是,本文运用案例研究以及问卷调查法对NS时间银行进行调研。研究发现NS银行在运营管理、组织管理以及服务供给方面存在巨大的发展潜力,然而也存在服务能力、服务质量和宣传力度不足的困境。因而,就需要通过政府支持、技术更新和拓展宣传渠道来应对这些难题。

肿瘤晚期患者感染与肿瘤热早期诊断的临床研究

目的探讨血清降钙素原(PCT)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)等鉴别肿瘤晚期患者感染与肿瘤热的临床意义,快速鉴别感染与肿瘤热,指导临床医疗。方法回顾性分析2012年1月-2014年6月医院110例肿瘤晚期患者临床资料,按发热类型分为3组,其中无发热患者为对照组24例、肿瘤性发热为肿瘤热组32例、细菌感染性发热为感染组54例,比较3组患者血清PCT、白细胞计数(WBC)、hs-CRP、中性粒细胞计数(NEUT)及中性粒细胞比率(NEUT%)。结果感染组患者PCT为(1.63±1.91)ng/ml,显著高于肿瘤热组的(0.16±0.10)ng/ml及对照组的(0.11±0.13)ng/ml(P<0.001),3组患者的hs-CRP、WBC、NEUT、NEUT%比较,差异均无统计学意义;感染组患者经抗感染治疗2周后复查,40例治愈者PCT均值为(0.27±0.23)ng/ml,14例死亡者PCT均值为(16.8±13.6)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.001);败血症患者PCT水平(3.71±2.80)ng/ml,显著高于肺部感染患者(1.24±1.16)ng/ml、泌尿系感染患者(0.61±0.22)ng/ml及腹腔感染患者(0.54±0.19)ng/ml(P=0.015)。结论 PCT在鉴别肿瘤热与感染性发热中有重要意义,且在败血症患者中表达明显增高,hs-CRP、WBC、NEUT、NEUT%在鉴别肿瘤晚期患者肿瘤热与感染性发热中无显著意义。

不同临床期别宫颈鳞癌患者血清差异蛋白质的表达

目的寻找不同临床期别宫颈鳞癌患者之间的血清差异蛋白质。方法采用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)和弱阳离子结合芯片(CM10),检测宫颈鳞癌患者可手术治疗组(Ⅰa期、Ⅰb期、Ⅱa期)与不能手术治疗组(Ⅱb期、Ⅲa期、Ⅲb期、Ⅳ期)的血清蛋白质、以及血清鳞状细胞癌抗原(SCCA)≥4.5ng/ml组与SCCA<1.5ng/ml组之间有分类意义的差异蛋白质。结果相对分子质量在1002～18369范围内,共有43种蛋白质质谱峰值有显著性差异(P<0.05),其中质荷比(M/Z)为11523.83、11679.13、5841.076、7971.04、16109.71、15932.17的蛋白质,在宫颈癌可手术治疗组的含量显著低于不能手术治疗组(P<0.01)。SCCA≥4.5ng/ml组与SCCA<1.5ng/ml组之间获得相同的差异蛋白质。以单个差异蛋白质11679.13(M/Z)作为分类变量建立宫颈癌手术组与不能手术组的诊断树模型,分类正确率为93.18%(41/44)。结论宫颈癌早中期可手术治疗组与中晚期不能手术治疗组血清中存在差异蛋白质,SCCA组≥4.5ng/ml与SCCA<1.5ng/ml组之间存在相同的差异蛋白质;以单个差异蛋白质作为分类变量建立的诊断树模型,给临床分期提供重要的参考。