TRAF5通过调控IL-17A/NF-κB信号通路减轻氧-糖剥夺/再灌注引起的心肌细胞炎症和细胞凋亡

目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子5(tumor necrosis factor receptor-associated factor 5,TRAF5)对氧-葡萄糖剥夺/再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)引起的心肌细胞炎症和细胞凋亡的影响及相关分子机制。方法 体外培养大鼠心肌细胞系H9c2细胞,构建OGD/R诱导的H9c2细胞模型,以脂质体转染法将TRAF5过表达质粒(pcDNA-TRAF5)和空载质粒(pcDNA-NC)转染至OGD/R诱导的H9c2细胞。采用实时定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测细胞中TRAF5基因表达,CCK-8法测定细胞活力,试剂盒法检测细胞中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)和炎性因子水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中相关蛋白表达。结果 与对照组比较,OGD/R组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达量降低,细胞活力降低,细胞中LDH、cTnT、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)浓度升高,细胞凋亡率升高,细胞中B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白表达量降低,Bcl-2相关蛋白(B-cell-lymphoma-2 related protein,Bax)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved cysteine aspartate proteolytic enzyme-3,cleaved caspase-3)、白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)蛋白表达量及磷酸化核转录因子-κB(phosphorylated nuclear factor-κB,p-NF-κB)/NF-κB比值升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与OGD/R组比较,OGD/R+pcDNA-TRAF5组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达量升高,细胞活力升高,细胞中LDH、c TnT、TNF-α、IL-6、IL-1β、MCP-1浓度降低,细胞凋亡率降低,细胞中Bcl-2蛋白表达量升高,Bax、cleaved caspase-3、IL-17A蛋白表达量及p-NF-κB/NF-κB比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TRAF5可减轻OGD/R引起的心肌细胞炎症和细胞凋亡,其作用机制可能与调控IL-17A/NF-κB信号通路有关。

肿瘤坏死因子受体相关因子5对缺氧诱导心肌细胞损伤的影响及作用机制研究

目的:分析肿瘤坏死因子受体相关因子5(TRAF5)对缺氧诱导心肌细胞损伤的影响及相关分子机制。方法:体外培养H9c2细胞,以800μmol/L浓度的二氯化钴(CoCl2)处理细胞建立缺氧诱导心肌细胞损伤模型,采用脂质体转染法将TRAF5过表达质粒(pcDNA-TRAF5)和空载质粒(pcDNA-NC)转染至缺氧诱导的H9c2细胞。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测细胞TRAF5基因表达水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,试剂盒法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测细胞中TRAF5、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达水平。结果:与Control组比较,Hypoxic组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达水平均降低,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中LDH水平、MDA含量升高,SOD、GSH-Px水平降低,细胞中p-ERK/ERK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-JNK/JNK比值均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与Hypoxic组比较,Hypoxic+pcDNA-TRAF5组H9c2细胞中TRAF5 mRNA和蛋白表达水平均升高,细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,细胞中LDH水平、MDA含量降低,SOD、GSH-Px水平升高,细胞中p-ERK/ERK、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-JNK/JNK比值均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:TRAF5通过介导心肌酶活性和氧化应激水平减轻缺氧诱导的心肌细胞损伤,其作用机制可能与调控MAPK信号通路有关。

利伐沙班联合抗血小板聚集药物治疗非瓣膜性心房颤动脑栓塞的疗效观察

目的探讨小剂量利伐沙班联合抗血小板聚集药物治疗非瓣膜性心房颤动脑栓塞的效果和安全性。方法选取2016年6月—2017年5月收治的163例非瓣膜性心房颤动脑栓塞病人,随机分成4组,A组(40例)给予利伐沙班20 mg/d口服,B组(42例)给予利伐沙班10 mg/d和氢氯吡格雷75 mg/d口服,C组(40例)给予利伐沙班10 mg/d和阿司匹林肠溶片100 mg/d口服,D组(41例)给予华法林口服。录入所有病人临床资料,在病人出院1个月、6个月、12个月时进行门诊或住院随访,记录各组病人全身栓塞事件和出血事件。结果4组病人临床不良事件发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。A组、B组和C组颅内出血发生率低于D组(P<0.05);B组和C组消化道出血发生率低于D组(P<0.05)。在体重低于50 kg的病人中,B组和C组颅内出血发生率低于A组和D组(P<0.05)。结论利伐沙班10 mg/d联合氢氯吡格雷片或阿司匹林肠溶片治疗非瓣膜性心房颤动脑栓塞病人,可以减少临床不良事件情况发生,同时降低出血事件发生率。

温肾健脾利水汤对扩张型心肌病心力衰竭患者心室重构及血清Hcy、BNP水平的影响

目的观察温肾健脾利水汤对扩张型心肌病心力衰竭患者心室重构及血清同型半胱氨酸(Hcy)、B型尿钠肽(BNP)水平的影响。方法将2017年1月—2018年2月在鄂东医疗集团中心医院诊治的90例扩张型心肌病心力衰竭患者随机分为2组,对照组45例给予常规西医治疗,观察组在对照组治疗基础上加服温肾健脾利水汤治疗。连续治疗8周后,对比2组临床疗效,观察2组多普勒超声心动图检测指标[左室射血分数(LVEF)、左室舒张末内径(LVEDD)、左室收缩末内径(LVESD)、左室后壁厚度(LVPW)]、心室重构指标[血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血浆基质金属蛋白酶-2(MMP-2)]、血清同型半胱氨酸(Hcy)、B型尿钠肽(BNP)、6 min步行距离的改善情况。结果观察组治疗后总有效率显著高于对照组(P<0.05);2组治疗后LVEDD、LVESD、LVEF、LVPW、AngⅡ、MMP-2、Hcy、BNP水平及6 min步行距离均较治疗前明显改善(P均<0.05),且观察组上述指标改善情况均明显优于对照组(P均<0.05)。结论温肾健脾利水汤能够有效改善扩张型心肌病心力衰竭患者心室重构,降低血清Hcy和BNP水平,提高6 min步行距离,改善患者心功能。

成纤维细胞生长因子21对缺氧复氧心肌细胞的保护作用及机制研究

目的探讨成纤维细胞生长因子21(FGF21)对缺氧复氧(H/R)心肌细胞的保护作用及对PI3K/AKT通路的影响。方法重组腺病毒载体Ad-FGF21诱导原代心肌细胞过表达FGF21。腺病毒转染心肌细胞后构建H/R损伤模型(3h缺氧联合3h复氧)。实验分为对照组(Con组)、H/R组、H/R+Ad-GFP组、H/R+Ad-FGF21组4组。心肌细胞存活率评估细胞损伤程度;SOD/MDA检测联合DHE荧光染色评估氧化应激反应(ROS);流式细胞术评估细胞凋亡;Western blot检测相关蛋白水平。在机制探讨实验中给予PI3K/AKT抑制剂(LY294002)进行干预。结果与Con组相比,H/R损伤后FGF21蛋白表达显著下调,并伴随心肌细胞活性降低、ROS与凋亡反应激活。腺病毒介导的心肌细胞过表达FGF21能够明显抑制H/R损伤,表现为细胞活力、ROS与凋亡反应均有不同程度改善。FGF21心肌细胞过表达能够增加PI3K/AKT磷酸化水平,而抑制PI3K/AKT通路后FGF21过表达介导的细胞保护功能被逆转。结论 FGF21主要通过PI3K/AKT依赖性途径改善心肌细胞H/R损伤。

胡椒碱对糖尿病心肌病的保护作用及机制研究

目的探讨胡椒碱(piperine,PIP)对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠心肌重构的保护作用及其机制。方法 30只成年雄性SD大鼠随机分为3组:对照组(Con组)、糖尿病组(DM)和糖尿病+胡椒碱处理组(DM+PIP)。高脂喂养4周联合低剂量STZ(30 mg/kg)腹腔注射构建糖尿病模型,继续高脂饲养4月诱导糖尿病心脏损伤,并按分组情况给予胡椒碱或等体积生理盐水灌胃。评估心脏功能、肥大、炎症、凋亡及氧化应激程度,并检测相关蛋白与m RNA表达情况。结果胡椒碱能改善心脏功能并抑制心肌肥大,表现为LVEF/LVFS上调、心肌细胞横截面积与ANP/BNP表达下调。此外,胡椒碱可明显减轻细胞凋亡、抑制IL-6/TNF-α表达、增加SOD/GPx酶活性并下调MDA含量。其机制与降低NF-κB核转位相关,表现为核NF-κB/p65表达减少;胞浆p65、Ik Bα表达增加,而胞浆p-Ik Bα表达降低。结论胡椒碱能够改善糖尿病诱导的心脏损伤,其机制与降低NF-κB核转位相关。

急诊PCI术后早期应用沙库巴曲缬沙坦对急性ST段抬高型心肌梗死患者的保护作用

目的观察急诊PCI术后早期应用沙库巴曲缬沙坦对急性ST段抬高型心肌梗死患者术后心肌损伤及预后的影响。方法采用回顾性研究方法收集156例在我院行急诊PCI的急性ST段抬高型心肌梗死患者住院及随访资料,根据用药情况分为ARNI组(55例)和ACEI组(101例)。ARNI组患者在入院行急诊PCI术后24 h内开始口服沙库巴曲缬沙坦,ACEI组则服用ACEI类药物(培哚普利、贝那普利),统计患者术后CK峰值、院内急性心力衰竭发生率、出院前NT-proBNP水平及左室收缩功能(LVEF)、出院后半年LVEF及再入院率。结果与ACEI组相比,ARNI组患者术后CK峰值较低,院内急性心衰发生率较低、出院前NT-proBNP水平较低、LVEF值较高,出院后半年随访心功能指标较好、再入院率更低(P<0.05)。结论早期应用沙库巴曲缬沙坦能够减轻接受急诊PCI术STEMI患者的心肌损伤并改善心功能。

人参皂苷Rb3对多柔比星诱导心脏毒性的保护作用及其机制

目的探究人参皂苷Rb3(G-Rb3)对多柔比星(DOX)诱导心脏毒性的作用及机制。方法将30只SD大鼠随机分为3组,分别对照组,DOX组(2.5 mg/kg),DOX+G-Rb3组(20 mg/kg);另加入PI3K抑制剂分为DOX+Wortmanin组(1 mg·kg^-1·d^-1)和DOX+G-Rb3+Wortmanin组(1 mg·kg^-1·d^-1)。将DOX(2.5 mg/kg)以腹腔注射方式在2周内达到注射次数为6次即可建立心肌毒性损伤模型,并且观察G-Rb3对DOX所致心肌毒性过程中的作用;使用HE染色观察大鼠心肌病理改变;用ELISA试剂盒检测心肌组织中心肌损伤标志物,炎症因子标志物,氧化应激标志物等水平;用Western blotting检测p-PI3K、PI3K、p-AKT和AKT的蛋白水平。结果DOX诱导心肌毒性会导致心肌损伤加剧,炎症和氧化应激反应增加。G-Rb3可改善DOX所致的心脏损伤,主要体现在心肌中胶原积累显著减少,心肌损伤标志物表达水平降低。G-Rb3可显著抑制DOX诱导的心肌炎症和氧化应激反应。G-Rb3对DOX诱导心肌毒性损伤具有保护作用主要通过激活PI3K/AKT信号通路,而PI3K/AKT抑制剂Wortmanin可以逆转人参皂苷Rb3对心肌的保护作用。结论人参皂苷Rb3可通过激活PI3K/AKT通路改善DOX诱导的心脏毒性。

不同中医证型冠心病患者血脂代谢、冠脉病变程度差异分析

目的:观察不同中医证型冠心病患者血脂代谢、冠脉病变程度差异。方法:选取我院于2019年5月~2022年1月收治的冠心病患者174例,根据《中医病证诊断疗效标准》分为4种中医证型,分析不同证型冠心病患者病变支数、冠状动脉病变程度Gensini评分、血脂代谢水平的差异。结果:174例冠心病患者中以心血瘀阻证为主,共57例,占比32.76%;其次为心肾阴虚证52例,占比29.89%;第三和第四分别为痰浊闭阻证和心气虚弱证,对应43例(24.71%)和22例(12.64%)。病变支数方面发现单支和双支病变多以心血瘀阻证为主,而多支病变主要以心气虚弱证为主,其次是心肾阴虚和痰浊闭阻证。病变血管方面发现右冠状动脉(RCA)病变以心肾阴虚证和心气虚弱证为主,左前降支(LAD)病变以痰浊闭阻证和心血瘀阻证为主,左回旋支(LCX)病变以心血瘀阻证和心气虚弱证为主,左主干(LM)病变在不同证型冠心病患者均分布较少。冠脉病变程度方面发现Gensini评分在21~32分范围内以心血瘀阻证和心气虚弱证为主,Gensini评分在>32分范围上则以痰浊闭阻证为主。血脂代谢方面发现痰浊闭阻证患者总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)和载脂蛋白水平高于其他三种证型,而心气虚弱证患者甘油三酯(TG)水平高于其他三种证型,4组不同证型患者脂蛋白和高密度脂蛋白(HDL-C)水平比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:冠心病患者血脂代谢、冠脉病变程度、病变支数及病变血管有助于中医证型的辨别,为辨证施治提供依据。

肾病综合征患者感染粪类圆线虫1例

患者，男，60岁，黄石市阳新县龙港镇大坜村人，农民。2014年9月在黄石市中心医院诊断为“肾病综合征非典型膜性病变”，一直口服曲安西龙20mg／d。2015年5月上旬起出现食欲下降，全身乏力，伴有恶心、呕吐，