滑囊腔/关节腔穿刺液直接镜检有助于无绿藻致感染性滑囊炎/关节炎的早期诊断

目的探讨滑囊腔/关节腔穿刺液直接镜检对于无绿藻致感染性滑囊炎/关节炎的早期诊断价值及临床应用。方法报道我科2022年3月发现的1例小型无绿藻致感染性指间关节炎病例的检查经过,并回顾1964年1月1日至2022年5月31日之间在PubMed、中国知网及万方数据库上发表的无绿藻致感染性滑囊炎/关节炎病例的主要病原学检查方法。通过比较不同患者主要病原学检查方法的异同点,探讨滑囊腔/关节腔穿刺液直接镜检的早期诊断价值。结果经删选,最终纳入符合研究目的的文章18篇(21例病例)。病原学检查的主要方法为真菌培养、组织病理,而真菌直接镜检常常被忽略。在22例患者中,只有2例患者同时行真菌直接镜检和真菌培养检查,18例患者行真菌培养检查但未行真菌直接镜检,其余2例患者未行真菌直接镜检及真菌培养检查而依靠病理检查结果进行诊断。结论滑囊腔/关节腔穿刺液直接镜检有助于无绿藻致感染性滑囊炎/关节炎的早期诊断,但临床缺乏正确应用,值得引起重视并推广。

误诊为手足综合征的手足癣1例

患者,女,51岁。1个月前因乳腺癌进行第2次化疗后出现双足皮损,之后左手及臀部出现皮损,伴痒,按照手足综合征对症治疗无效。皮肤科检查示双足背侧、双足跖及侧缘、右侧臀部、左手背侧、左手掌侧、左手虎口处可见鳞屑性红斑,边缘环状脱屑,境界清楚。手足及臀部皮损真菌直接镜检阳性,真菌培养为红色毛癣菌。诊断:手癣、足癣、股癣。给与口服及外用抗真菌药物治疗痊愈。

地塞米松对F.monophora感染巨噬细胞模式识别受体及炎症因子表达的影响

目的:探讨F.monophora体外感染模型中地塞米松(DEX)对模式识别受体及免疫炎症因子表达的影响。方法:实验分为四组:F.monophora与加入DEX的巨噬细胞共培养组、F.monophora与巨噬细胞共培养组、单纯加入DEX的巨噬细胞组及巨噬细胞空白对照组。定量PCR检测各组中模式识别受体Dectin-1、TLR-2、TLR-4的表达;ELISA法测定培养上清中TNF-α的表达量。结果:F.monophora与巨噬细胞共培养组相对于空白对照组及单纯加入DEX组的Dectin-1表达显著升高,在加入DEX后Dectin-1表达明显受到抑制(t=121 900,P<0.05);加入DEX的共培养组中TLR-2表达增加,但与F.monophora和巨噬细胞共培养组相比,差异无统计学意义(t=3 022,P>0.05);F.monophora感染引起TLR-4显著下调,加入DEX对TLR-4表达无影响(t=2 021,P>0.05)。相对于F.monophora与巨噬细胞共培养组,DEX共培养组中巨噬细胞分泌TNF-α的量显著下调(t=1 514 000,P<0.05)。结论:DEX可抑制巨噬细胞Dectin-1的表达,并下调TNF-α的表达量,进而使机体处于免疫耐受状态,但对TLR-2、TLR-4表达无明显影响。

血清(1-3)-β-D-葡聚糖检测对深部真菌感染辅助诊断的临床价值

目的:探讨血清(1-3)-β-D-葡聚糖(BDG)检测对深部真菌感染辅助诊断的价值。方法:对我院2014年336例疑似深部真菌感染病例分别进行血清BDG检测和真菌培养鉴定;对比分析血清BDG检测和真菌培养的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值。结果:BDG检测阳性171例,阳性率为50.89%(171/336);真菌培养阳性141例,阳性率为41.96%(141/336)。真菌培养阳性组血清BDG含量为(131.18±102.91)pg/m L,真菌培养阴性组血清BDG含量为(45.06±33.64)pg/m L,两组差异有统计学意义(t=9.57,P<0.01)。以真菌培养结果为标准,BDG检测的敏感性为54.61%(77/141),特异性51.79%(101/195);阳性预测值和阴性预测值分别为45.03%(77/171)和61.21%(101/165)。真菌培养显示白念珠菌仍然是临床深部真菌感染的主要病原菌。结论:BDG检测可实现疑似深部真菌感染的快速诊断,但对(1-3)-β-D-葡聚糖阳性结果需辅以真菌培养鉴定,两者联合使用具有较高的临床应用价值。

MALDI-TOF MS自建库在红色毛癣菌感染中的临床快速诊断价值

目的建立并评价实验室自建的红色毛癣菌基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)数据库的可行性。方法将红色毛癣菌标准菌株ATCC 28188用沙保罗葡萄糖琼脂(SDA)平板28℃培养5d,分别用双甲酸夹心法和甲酸提取法作为蛋白提取方法,利用MALDI-TOF MS对标准菌株进行质谱数据采集,建立2种不同蛋白提取方法的菌株数据库"双甲酸夹心法自建库"和"甲酸提取法自建库";并用2种蛋白提取方法对21株红色毛癣菌临床分离株进行蛋白提取后,分别选取"双甲酸夹心法自建库+Bruker商品库"、"甲酸提取法自建库+Bruker商品库"和"Bruker商品库"做质谱鉴定,从而对各数据库的鉴定效果进行评价。结果"甲酸提取法自建库+Bruker商品库"对21株红色毛癣菌临床分离株的鉴定得分显著高于其余两组,差异有统计学意义(P<0.05),匹配率为21/21;"Bruker商品数据库"与"Bruker商品数据库+双甲酸夹心法自建库"的鉴定得分比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验室建立的"甲酸提取法自建库+Bruker库"对红色毛癣菌的鉴定能力好,适用于临床微生物实验室。与待测菌统一培养条件所建立的数据库丰富了原有的数据库信息,使待测菌的鉴定更为准确。双甲酸夹心法操作简便,但对红色毛癣菌蛋白提取的效果欠佳。

Fonsecaea monophora对巨噬细胞TLR2、TLR4、Dectin-1和TNF-α表达的影响

目的探讨F.monophora对巨噬细胞模式识别受体TLR2、TLR4及Dectin-1的表达及介导炎症因子TNF-α分泌的影响。方法 F.monophora分生孢子突变株(色素株,CBS122845)及白化突变株(CBS125149)菌液分别与小鼠巨噬细胞(RAW264.7)共培养,RAW264.7巨噬细胞作为阴性对照。采用Real Time PCR检测各组TLR2、TLR4、Dectin-1和下游信号分子MyD88、NF-κB mRNA的表达情况,流式细胞术检测TLR2、TLR4、Dectin-1蛋白的表达水平,ELISA法检测培养上清中TNF-α因子的分泌情况。结果与对照组比较,CBS122845和CBS125149组中巨噬细胞TLR2、TLR4、Dectin-1和MyD88、NF-κB的mRNA和蛋白表达量均升高;与CBS125149比较,CBS122845组中TLR2的mRNA和蛋白的表达量无明显变化,而TLR4、Dectin-1和MyD88、NF-κB的mRNA和蛋白的表达量升高更明显;与对照组比较,CBS122845组培养上清TNF-α因子的分泌量明显减低,CBS125149组TNF-α因子的分泌量明显升高。结论 TLR2、TLR4、Dectin-1这三个模式识别受体可能共同参与巨噬细胞对F.monophora的识别过程,并可激活下游信号分子MyD88和NF-κB;且CBS122845可以通过抑制TNF-α分泌来抑制炎症反应,维持菌体在巨噬细胞中的长期生存和繁殖。

1%卢立康唑乳膏治疗足癣的疗效和安全性评价

目的评价1%卢立康唑乳膏治疗足癣的疗效及安全性,并与1%盐酸特比萘芬乳膏对照。方法采用单中心随机单盲对照试验。试验组外用1%卢立康唑乳膏,1次/d,疗程2周;对照组外用1%盐酸特比萘芬乳膏,2次/d,疗程2周。在治疗开始及治疗2周、停药2周时进行观察。结果试验组30例、对照组30例患者完成了观察。在治疗2周时,试验组临床有效率为63.33%,对照组为76.67%,停药2周时试验组和对照组临床有效率分别为93.33%和90.00%;治疗2周和停药2周时真菌学清除率试验组为46.67%和86.67%,对照组为53.33%和80.00%;治疗2周时试验组总有效率为43.33%,对照组为60.00%,停药2周时分别为86.67%和80.00%。试验组和对照组药物不良反应表现为局部刺激,发生率均为3.33%。结果显示1%卢立康唑乳膏治疗足癣的疗效及安全性与1%盐酸特比萘芬乳膏相似(P>0.05)。结论 1%卢立康唑乳膏治疗足癣有效、安全。

掌黑癣1例并中国大陆文献总结

目的报道1例手掌发病的儿童掌黑癣,并文献复习此病临床特点。方法患儿女,5岁9个月,因左手掌黑色斑疹6个月就诊。取局部皮屑完善真菌学检查,分离菌株进行分子生物学鉴定,并文献检索统计在中国大陆报道掌黑癣患者的临床特点。结果分离菌株鉴定结果为威尼克何德霉。总结文献病例9例特点:多见于儿童;左手掌受累比例略多;长江以南为主要发病区域;致病菌均为威尼克何德霉;全部病例外用抗真菌药,3周内治愈。结论掌黑癣主要发生于儿童手掌,镜检可快速诊断,菌种鉴定建议完善分子鉴定,外用抗真菌药膏疗效显著。

综合医院肿瘤急症的特点与救治

目的:分析一般综合性医院急诊科的肿瘤急症的特点,探讨其救治措施。方法:对我院急诊科1997-2006年收治留观的肿瘤急症患者的临床资料进行统计分析。结果:本组197例,77.7%入院前已诊断患有肿瘤。恶性肿瘤占98.0%。经急诊治疗后好转93例(47.2%),死亡50例(25.4%)。发生急症的肿瘤主要有肺癌(57.9%)、肝癌(5.1%)、直肠癌(5.1%)等。肿瘤急症常表现为感染(37.1%)、疼痛(11.2%)、出血(10.2%)等。67.7%外周血白细胞总数升高,最常见的是肺部感染。血象升高的患者中发生死亡的比例高于血象正常的患者(P<0.01)。57.0%出现贫血,多属于轻～中度,常见发生贫血的是肺癌(57.5%)、消化系统肿瘤(29.2%)。肿瘤急症的急诊处理主要是内科治疗,只有1.6%进行了急诊手术治疗。结论:随着恶性肿瘤的发病率、死亡率增加及癌症生存者人群迅速增长,急诊医师应加强对肿瘤急症的认识,及时处理,避免危及生命,也为以后的治疗争取时间、提供机会。

8867株深部真菌感染分离株的菌种分析

目的：分析我院1991～2011年疑诊深部真菌感染的分离株的菌种情况，了解其动态变迁，为临床医生对深部真菌感染性疾病的诊治提供帮助。方法：统计、分析1991～2011年我科真菌室接受的疑诊为深部真菌感染的临床标本中分离出的真菌，并对前后十年白念珠菌、非白念珠菌，马尔尼菲青霉的感染率进行比较。结果：从27801份标本中分离出阳性标本8794份，阳性率31.63％，分离出26个菌种，共8867株真菌。分离出的菌株主要有：白念珠菌，热带念珠菌，光滑念珠菌，近平滑念珠菌，其他念珠菌，曲霉菌，新生隐球菌，申克孢子丝菌，马尔尼菲青霉，着色真菌等。2001～2011年间与1991～2000年间比较，白念珠菌构成比下降（礸2＝62.3），而非白念珠菌（礸2＝125.9）和马尔尼菲青霉（礸2＝5.1）构成比上升，均具有统计学差异（P值均＜0.05）。结论：白念珠菌和非白念珠菌是深部真菌感染的主要致病菌。后十年来，白念珠菌的构成比显著下降，非白念珠菌、马尔尼菲青霉构成比显著上升。

复发性外阴阴道念珠菌菌种分布及药敏结果分析

目的:从病原学方面探讨复发性外阴阴道念珠菌病(RVVC)病原菌和药敏差异,指导临床治疗。方法:对RVVC的病原菌进行鉴定并加以比较,同时采用真菌药敏培养法对常用抗真菌药物进行体外药物敏感研究。结果:1 634例RVVC患者中,共分离出569株念珠菌,其中白念珠菌339株,占59.58%;非白念珠菌230株,占40.42%。非白念珠菌由高到低依次为光滑念珠菌59.57%(137/230),热带念珠菌17.39%(40/230),克柔念珠菌12.61%(29/230),近平滑念珠菌5.65%(13/230),清酒念珠菌4.78%(11/230)。白念珠菌对抗真菌药物敏感性均高于非白念珠菌,非白念珠菌对唑类药物耐药凸显。结论:白念珠菌仍是RVVC的主要致病菌,非白念珠菌中以光滑念珠菌比例最高。念珠菌对两性霉素B敏感率最高,对唑类药物耐药性有增加趋势。

Phialemonium curvatum致侵袭性皮肤软组织感染1例

患者女,40岁,因左小腿红肿、结节伴发热4月就诊。皮肤科检查:左小腿见大片红斑、肿胀,触之感皮下结节,质软,结节中央见破溃及结痂。右股外侧、腰部、骶尾部可见散在红斑,右股外侧及骶尾部可见数个溃疡及窦道,溃疡口见大量脓性分泌物。取皮下结节内穿刺液进行真菌镜检和培养并对培养物进行分子生物学鉴定,确定致病真菌为Phialemonium curvatum。使用伏立康唑及伊曲康唑治疗后,患者皮损消退。

马尔尼菲青霉酸性磷酸酶在宿主氧化杀伤中的作用

目的探讨马尔尼菲青霉(Penicillium marneffei,PM)酸性磷酸酶(Acid phosphatase,ACP)在宿主氧化杀伤中的作用。方法在培养基中加入不同浓度H2O2模拟氧化应激环境,于25℃和37℃震荡培养后检测上清液中ACP的活性。通过用特定培养基诱导酶分泌、灭活、抑制剂处理的方法获得不同酶活性的PM分生孢子,建立分生孢子与巨噬细胞共培养模型;利用H2DCFDA标记联合流式细胞术检测巨噬细胞ROS的释放量,CFU及透射电镜观察巨噬细胞对PM的杀伤情况。结果 PM菌丝相及酵母相均能分泌ACP,加入H2O2后两相ACP活性均提高;诱导PM分泌酸性磷酸酶,巨噬细胞ROS释放量及对菌体杀伤能力被抑制;将酶抑制后,巨噬细胞ROS释放量增加,对菌体杀伤能力增强。结论 PM在氧化应激条件下能通过分泌ACP抑制巨噬细胞ROS产生,从而抵御宿主的氧化杀伤作用。

254例皮下组织真菌感染回顾性分析(1990—2019年)

目的:了解广东地区皮下真菌感染的临床流行病学特征及致病菌菌学动态变化。方法:回顾分析1990年1月—2019年12月近30年我院皮肤科254例皮下组织真菌感染患者的一般特征、皮损组织病理、诊断及菌种分析。结果:平均每年确诊8.47例,患者平均年龄为47.78岁,男女患病率为1.46∶1,最常见感染部位为上肢(31.10%),31~60岁患者为主要感染人群(46.12%)。孢子丝菌病仍是最常见的皮下组织真菌感染(55.91%),但近20年其病例数有下降趋势。着色芽生菌病病例数近10年发病较前20年明显升高(P<0.05)。球形孢子丝菌和Fonsecaea monophora分别为孢子丝菌病及着色芽生菌病主要致病菌。结论:孢子丝菌病为最常见皮下真菌感染,着色芽生菌病例有增多趋势。基于原发与继发免疫缺陷疾病发病率的增高,少见菌种引起的感染在近10年明显增多。分子鉴定可为发现新致病菌、疾病的流行病学调查提供可靠依据。

原生质体介导马尔尼菲青霉基因转化体系的优化

目的 优化原生质体介导的马尔尼菲青霉转化体系,为其基因功能研究提供良好的平台。方法 通过原生质体介导将构巢曲霉（Aspergillus nidulans）pyrG基因插入马尔尼菲青霉尿嘧啶缺陷株ligD（pyrG-,ligD-）中,在不含尿嘧啶的培养基中筛选阳性转化子,运用PCR验证重组子,通过改变影响转化效率的酶解时间、培养基浓度、质粒浓度、不同配方的原生质体洗涤液STC和不同配方的原生质体助融剂PTC 5个条件对体系进行优化。结果 PCR验证A.nidulans pyrG基因成功的插入ligD中,转化子可稳定传代。最适合ligD原生质体转化效率的条件为：酶解时间6h,PTC（60%PEG-4000,100mmol/L Tris-HCl pH8.0,100mmol/L CaCl2）,每100μL原生质体（106-107/mL）加入2.5μg质粒,0.6 mol/L蔗糖SD/SDU筛选/再生培养基,每1μg质粒转化子可达68个左右。结论 成功优化了原生质体介导马尔尼菲青霉转化体系的条件,优化后该方法转化效率高,为基因功能研究提供良好平台。

英语教师信念因素研究

随着教学法的发展,教学的研究主体逐渐转向学生,但对教师的教学研究仍然匮乏。本文研究教学环节中的重要因素——教师信念,试图分析影响教师信念的主要因素,并探讨教师信念的变化特征,从而推进教师信念更新,促进教学实践实现真正变革。

广州地区241例头癣及病原菌分布情况分析

目的了解广州地区头癣及其病原菌分布情况。方法对1997年2月至2010年8月在本院皮肤科诊治的241例头癣患者资料进行回顾性分析。结果241例头癣患者中白癣179例占74．27％，脓癣34例占14．11％，黑点癣28例占11．62％，未发现黄癣。病原菌中犬小孢子菌182株占80．89％，紫色毛癣菌25株占11．11％，须毛癣菌10株占4．44％，断发毛癣菌3株占1．33％，红色毛癣菌2株占0．89％，石膏样小孢子菌2株占0．89％，疣状毛癣菌1株占0．44％。患者年龄段分层分析结果显示，主要感染人群为学龄前儿童占39．00％。结论广州地区头癣中自癣所占比例最高；犬小孢子菌为头癣患者的主要致病菌；主要感染人群为学龄前儿童。

130例深部真菌感染患者血液中病原菌分布及耐药性情况分析

目的了解深部真菌感染患者血液中病原菌的分布及耐药性情况。方法对2007年1月至2012年10月在本院诊治的130例深部真菌感染患者的血液实验室检查资料进行回顾性分析。结果分离白念珠菌41株(31.54%)、热带念珠菌29株(22.31%)、近平滑念珠菌26株(20.00%)、马尔尼菲青霉14株(10.77%)、光滑念珠菌13株(10.00%),新生隐球菌4株(3.08%),烟曲霉、镰刀菌和季也蒙念珠菌各1株(0.77%)。入组分析患者多存在血液病、恶性肿瘤、肺部感染等基础性疾病。耐药性分析显示,除有1株菌株对氟康唑耐药外,未发现对两性霉素B、伏立康唑和伊曲康唑耐药的菌株。结论白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌为主要的感染病原菌,分离菌株未发现严重的耐药现象。重症监护病房、儿科、外科及血液科应重视患者深部真菌感染并及时给予检查治疗。

伏立康唑联合光动力治疗难治性脓癣一例

脓癣是人体皮肤对亲动物性或亲土性皮肤癣菌发生的严重炎症反应,多见于儿童,感染早期常无典型临床表现,因而容易扩散传染。炎症反应明显,可快速发展为隆起性斑块或脓肿,易误诊为单纯细菌感染,延误治疗。目前尚无确切的治疗方案或共识,现报告1例特比奈芬联合伊曲康唑治疗后效果不佳、采用伏立康唑联合光动力治疗后达到完全治愈的儿童难治性脓癣病例。

广东省68家医院下呼吸道标本分离曲霉菌分布及其药物敏感性

目的分析广东地区下呼吸道标本分离曲霉菌的菌种及药物敏感性。方法对广东省68家医院2020-2021年度下呼吸道标本分离曲霉菌的数据进行分析。菌株鉴定通过形态学、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)等方法;采用Sensititre Yeastone真菌药敏检测试剂盒检测两性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑、泊沙康唑的最低抑菌浓度(MIC),卡泊芬净、米卡芬净的最低有效浓度(MEC)。结果68家医院下呼吸道标本共分离曲霉菌1569株。男性患者是女性患者的1.85倍,60岁以上占61.70%。烟曲霉是最常见的菌种,占66.79%,其次是黄曲霉16.19%、黑曲霉7.20%等。烟曲霉对于伏立康唑的敏感率为94.34%,对于两性霉素B、伊曲康唑、卡泊芬净的野生型菌株占比在93.58%~98.49%之间;黄曲霉和黑曲霉对于两性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、卡泊芬净的野生型菌株占比分别在92.45%~100.00%之间;黄曲霉对于两性霉素B的MIC_(50)为4μg/ml,MIC范围为1~4μg/ml;土曲霉对于两性霉素B的范围为2~4μg/ml。结论广东地区下呼吸道标本中曲霉菌以烟曲霉为主;三唑类及棘白菌素类药物对于曲霉菌具有良好的体外抗菌活性;两性霉素B的MIC分布明显偏高。