低剂量长期砷暴露对HaCat细胞凋亡及其调控蛋白Bcl-2和Bax的影响

目的探讨低剂量砷长期暴露对HaCat细胞凋亡及其调控蛋白Bcl～2和Bax表达的影响。方法HaCat细胞暴露于浓度为O（对照）、0．05、0．10μmol／L的亚砷酸钠（NaAsO2），在体外培养15周后收集细胞，用流式细胞仪测定10000个细胞的凋亡发生水平，用蛋白印迹法（Westernblot）检测细胞Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果细胞凋亡率组间比较差异有统计学意义（F=17．19，P〈0．05）；其中0．05、0．10μmol／L组细胞凋亡率分别为（1．23±0．08）％和（1．04±0．06）％，与对照组（1．42±0．13）％比较显著降低（P均〈0．05），且0．10μmol／L组细胞凋亡率显著低于0．05μmol／L组（P〈0．05）。细胞调控蛋白Bcl-2、Bax表达组间比较差异有统计学意义（F值分别为107．38、346．45，P均〈0．05）；其中0．05、0．10μmol／L组Bcl-2蛋白表达分别为（143．89±7．74）％和（199．96±12．18）％，与对照组（100．00±1．45）％比较显著增高（P均〈0．05），且0．10μmol／L组Bcl-2蛋白表达显著高于0．05μmol／L组（P〈0．05）；0．05、0．10μmol／L组Bax蛋白表达分别为（70.78±1．53）％和（54．80±1．34）％，与对照组（100．00±3．09）％比较显著降低（P均〈0．05），且0．10μmol／L组Bax蛋白表达显著低于0．05μmol／L组（P〈0．05）。结论长期低剂量砷暴露对细胞凋亡的诱导作用降低，可能与调控蛋白Bcl-2表达升高、Bax表达降低有关。

低剂量长期砷暴露对HaCat细胞PKB/Akt及其下游信号因子IKK、IκB和NF-κB的影响

目的探讨低剂量长期砷暴露对人皮肤角质形成细胞系(HaCat)细胞蛋白激酶B(PKB/Akt)及其下游信号因子IKK、IκB和NF-κB的影响。方法将HaCat细胞暴露于浓度为0、0.05、0.10μmol/L的NaAsO215周后,采用Western Blot法检测细胞磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化IKK(p-IKK)和磷酸化IκB(p-IκB)及胞核和胞浆中核转录因子NF-κB的蛋白表达水平。结果 0.05、0.10μmol/L染砷组细胞内p-Akt、p-IKK、p-IκB及胞核NF-κB蛋白表达水平与对照组相比均显著增高(P<0.05);胞浆NF-κB蛋白表达水平与对照组相比均显著降低(P<0.05)。结论长期低剂量砷暴露可诱导HaCat细胞Akt蛋白磷酸化活化,激活其下游信号因子IKK,进而诱导IκB的磷酸化及核转录因子NF-κB的入核表达。