余甘子斑点病病原菌鉴定、生物学特性及防治药剂筛选

【目的】明确余甘子果实斑点病的病原菌种类,了解其生物学特性,筛选有效的防治药剂,为余甘子果实斑点病的科学诊断和田间防治提供理论依据。【方法】从广东省汕尾市陆河县余甘子产业园种植基地采集发生斑点病的余甘子果实,采用组织分离法对余甘子斑点病病果进行病原菌分离,通过形态学特征和基于多基因(ITS、TUB和EF1-α)的系统发育进化分析对病原菌进行鉴定;采用针刺接种法测定病原菌菌株的致病力;采用菌丝生长速率法测定不同培养条件对病原菌菌丝生长的影响;通过室内毒力测定评估12种常见杀菌剂对病原菌的抑菌活性。【结果】从余甘子病果中分离出1株病原真菌菌株PE3,致病性测定结果表明,该菌株为余甘子斑点病致病菌,其形态特征与间座壳菌Diaporthe phoenicicola相似,且其ITS、TUB和EF1-α基因系统发育进化树分析显示与D.phoenicicola聚在同一分支。生物学特性测定结果显示,菌株PE3菌丝生长的最适温度为25℃,最适p H为7,最适生长碳源为甘油和蔗糖,最适生长氮源为酵母提取物。室内毒力测定结果显示,450 g/L咪鲜胺乳油对菌株PE3菌丝生长的抑制作用最强,抑制中浓度(EC_(50))为0.019 mg/L;其次是8%氟硅唑微乳剂、10%苯醚甲环唑微乳剂和25%吡唑醚菌酯悬浮剂,EC_(50)分别为0.023、0.124和0.194 mg/L;而2%春雷霉素水剂对菌株PE3菌丝生长的抑制效果最差,EC_(50)为402.336 mg/L。【结论】间座壳菌D.phoenicicola是引起余甘子果实斑点病的病原菌,450 g/L咪鲜胺乳油、8%氟硅唑微乳剂、10%苯醚甲环唑微乳剂和25%吡唑醚菌酯悬浮剂能有效防治余甘子果实斑点病,可在余甘子种植中推广应用。

金线莲应答高温胁迫的转录组学特征分析

为了研究高温胁迫下金线莲转录组表达特征,分析其热激响应机制。以正常培养和高温胁迫(45o C)的金线莲(NYJ2)为材料,利用Illumina HiSeqTM2000平台进行测序,通过Trinity软件进行De novo组装。结果共获得75688个unigene,有28323个unigene在Nr、KOG、KEGG和Swisspro数据库中得到功能注释,注释率为37.42%。其中,17532个unigene在KOG数据库中可归类到25个功能家族;10108个unigene被KEGG数据库注释到128个代谢途径中;17485个unigene被GO数据库的生物过程、分子功能和细胞组成三大功能注释到47个条目中。777个unigene在高温胁迫前后差异表达显著,其中胁迫后上调表达为362个,下调表达为415个,获得响应热胁迫的基因24个,包括热激蛋白的基因1个,PSⅠ和PSⅡ相关的基因15个、叶绿体rbcL基因3个、PLD基因2个,CAT编码基因、GAPDH基因、CYP编码基因各1个。本研究从转录组水平分析了金线莲对热胁迫的响应,这些数据将为功能基因的鉴定奠定基础,为培育耐高温金线莲品系提供了参考依据。

独脚金转录组特征分析

【目的】获取独脚金[Striga asiatica(L.)O. Kuntze.]的转录组信息特征。【方法】提取独脚金叶片和茎的总RNA、建库、测序、组装,以注释和比对等生物信息分析技术得到独脚金转录组的遗传信息。【结果】共获得38 096 466个高质量Reads,通过de novo组装获得41 918条Unigenes,N50长度为1 754 bp,平均长度1 029 bp。共有27 375条Unigenes(占65.31%)在CDD、PFAM、KEGG、KOG、GO、NR、NT等数据库中得到注释。其中NR数据库注释到27 187条Unigenes,在KEGG中注释到5 331条Unigenes,涉及284条代谢通路。在独脚金中共鉴定到30条Unigenes涉及黄酮类生物合成,同时还鉴定到778个转录因子(TFs)。采用微卫星识别软件(MISA)对组装的1 000 bp以上的Unigenes分析发现,13 107条Unigenes包含17 036个简单重复序列(SSR)位点。【结论】利用转录组数据分析为独脚金的重要功能基因鉴定和次生代谢通路的挖掘奠定了研究基础。

南药三桠苦研究进展

三桠苦为芸香科蜜茱萸属植物,分布广泛,是岭南地区重要的传统特色药材,其干燥茎和带叶嫩枝为多种中成药材原料药,具有清热解毒、祛风除湿、消肿止痛等功效。三桠苦中富含生物碱类、香豆素类和黄酮类等生物活性物质,现代药理学研究表明其具有降尿酸、抗炎、抗肿瘤、抗氧化和抑菌等作用。目前已开发出感冒灵、三九胃泰、三金片等30多种药剂。近年来,随着三桠苦药用需求量的日益增大,野生三桠苦的资源量不断减少,且其来源较为混乱,药材质量参差不齐,面对中药质量控制标准的不断提高,为满足用药需求,三桠苦的研究也逐渐成为热点。本文综述了近年来三桠苦在生药学、化学成分、药理作用、临床应用等方面的研究现状及进展,以期为三桠苦的开发使用和深入研究提供理论依据。

罗汉果组培快繁试验

对罗汉果茎段进行诱导及继代培养的组培快繁研究结果表明:罗汉果茎段在MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L诱导培养基上培养30天后的腋芽诱导率达100%;在继代培养基中添加IBA0.2mg/L有利于腋芽的重新诱导和生长,添加NAA0.2mg/L则不能重新诱导腋芽产生和生长,却有利于愈伤组织的形成;腋芽接种在MS+IBA0.2mg/L生根培养基上,培养1周后开始被诱导出根。小苗假植结果表明罗汉果组培苗成活率达90%以上。

石韭的研究现状与种植技术

石韭,学名宽叶韭(Allium hookeri Thwaites),属于百合科(Liliaceae)葱属(Allium L.)粗根组多年生草本植物,别名野韭菜和观音菜。野生石韭原产于乳源南岭山脉中的石韭岭,因人们发现石头缝中长满了“石韭”而获其名。

走马胎的离体培养与快速繁殖

【目的】走马胎是我国传统药用植物,长期依赖自然采挖,以致野生资源枯竭,急需发展驯化种植。采用走马胎的茎作为外植体,建立组织培养快速繁殖方法。【方法】采用70%酒精和0.1%的升汞溶液为消毒液,设置不同处理时间对外植体进行消毒,得到无菌外植体后接种在含有6-BA、KT和IBA的改良MS培养基进行丛芽增殖;采用1/2改良MS培养基作为基础培养基,添加NAA和IBA不定芽进行生根诱导,再生植株经过炼苗后,移栽。【结果】走马胎外植体消毒采用70%酒精处理30 s结合0.1%的升汞溶液消毒处理7~9 min最合适,诱导不定芽的增殖培养基配方为改良MS培养基+6-BA 1.0 mg/L+KT 1 mg/L+IBA 0.05 mg/L,生根培养基配方为1/2改良MS培养基+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.3 mg/L。【结论】通过对快速繁殖体系中外植体的消毒方法,优化增殖和生根培养基,建立走马胎的离体培养与快速繁殖方法,为人工种植提供种苗基础。

中草药脱毒技术研究进展

中草药是中医药产业可持续发展的物质基础,对推动社会经济的全面发展具有重要意义。优良种苗是中草药标准化生产和高效种植的基础,也是中药农业的重要组成部分。在中草药农业生产上,病原菌或病毒的侵染是导致中药材产量和品质降低的主要原因之一。特别是无性繁殖的中草药品种,在自然环境中长期经受各种病菌或病毒的重复传染而影响光合作用效率导致种苗的生长势变弱,种性退化,种植效益降低。而使用植物脱毒技术培育的种苗可有效避免病菌或病毒的传播积累,获得健康种苗,具有重要应用价值和商业前景。植物脱毒技术是一项现代生物技术,大多是基于植物组织培养技术,植物脱毒技术的利用,促进了果树、作物良种的推广,给农业带来一场新的技术革命。利用植物脱毒技术培育健康中草药种苗,达到提纯复壮,增强中草药种苗的抗性,也促进中药材种业的发展。综述了植物脱毒的技术方法及其在中草药种苗上的研究进展与应用现状,同时对利用植物脱毒技术开展中草药健康种苗的标准化生产进行探讨,以期为中草药种业的持续发展提供参考。

铁皮石斛生产关键技术

在文献资料的基础上,结合实际种植管理经验和生产考察结果,对铁皮石斛种植中的种苗繁殖、种植模式及种植基质选择等几个重要环节进行总结,提出了铁皮石斛的生产关键技术,为其人工种植提供参考。

金毛狗转录组测序及生物信息学分析

【目的】利用二代高通量测序技术获得金毛狗的转录组信息。【方法】金毛狗叶片总RNA经过提取、建库、测序和组装,获得单基因簇(Unigene)序列,再进行注释和分析,得到金毛狗转录组信息。【结果】共获得877918条金毛狗Unigene,平均长度为697.85 bp,N50为1262 bp。其中,33682条(38.37%)Unigene在数据库中获得功能注释,并与江南卷柏的序列相似度最高。分别有20379条和25246条Unigene在京都基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)数据库获得注释,包括代谢过程、刺激响应、生物调节、转运活性等。此外,4605条1000 bp以上Unigene经过卫星识别工具(MISA)进行简单重复序列(SSR)检测,共鉴定到6456个SSR位点,并使用Primer 3.0软件设计引物。【结论】金毛狗的转录组信息为其生物学过程、次生代谢通路和功能基因的挖掘提供了遗传资源信息,有利于其资源保护和开发利用。

木本番茄组织培养快速繁殖技术研究

以无菌播种取得的无菌苗顶芽为材料,研究基本培养基、激素浓度配比对诱导分化芽、芽的增殖、伸长及生根的影响,水分、温度、基质对试管苗移栽成活率的影响。结果表明:培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L+蔗糖3%有利于诱导芽的形成、培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L+蔗糖3%有利于芽的增殖、培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖3%有利于壮芽伸长;1/2MS+NAA 0.2 mg/L+蔗糖1.5%有利于诱导芽生根;在试管苗移栽阶段,基质选用泥炭土、椰糠和珍珠岩混合,于晚春和秋季移栽,可提高试管苗移栽的成活率,使移栽成活率达到90%左右。

独脚金离体培养与快速繁殖

采用茎段作为外植体,建立独脚金Striga asiatica的组织培养快速繁殖方法。结果显示,0.1%升汞溶液处理7~9 min是较有效的消毒方法;诱导不定芽增殖培养基适宜配方为MS+6-BA 3.0 mg·L^(-1)+IBA 0.1mg·L^(-1);生根培养基配方为MS+NAA 0.1 mg·L^(-1)+IBA 0.5 mg·L^(-1),培育周期为3个月。

我国竹芋的研究与开发现状

竹芋是华南地区的特色经济作物之一,本文从竹芋形态与营养、产品开发与利用、标准化种植技术和产业开发前景等进行综述,为今后竹芋的规模化种植和产业化应用提供参考。

铁皮石斛主要农艺性状与多糖含量相关性多重分析

目的:研究铁皮石斛多糖含量与农艺性状之间的相互关系,为提高铁皮石斛种质资源创新利用和铁皮石斛新品种选育提供依据。方法:对30份铁皮石斛种质资源总计110个单株的植株多糖含量和各农艺性状指标进行调查和测定,在此基础上进行相关分析和通径分析。结果:相关性分析表明,铁皮石斛平均节间距与多糖含量的负相关性达显著水平,相关系数为-0.695,叶厚与多糖含量呈正相关,但相关性不显著。通径分析中,茎长的影响最大,为正效应,直接通径系数为1.568。结论:在铁皮石斛资源筛选与新品种选育时,通过考察这些农艺性状指标即可兼顾其多糖含量指标,可为铁皮石斛优良品种的选育实践提供直观而实用的技术指导。

‘三棱榄’橄榄果实香气成分分析

1 材料与方法 选取广东优良鲜食橄榄品种‘三棱榄',2001年12月6日采样,采用固相微萃取法(SPME)富集香气成分(鲜橄榄果肉于15℃下捣碎后取样1.0 g放入4 mL聚四氟乙烯硅橡胶垫密封螺口玻璃瓶中,插入100 μm聚二甲基硅氧烷纤维头于室温25～30℃顶空取样2 h),用美国Finnigan TRACE GC-MS气相色谱-质谱联用仪进行分析.

棚栽铁皮石斛的主要病害及其防治

在华南等亚热带地区,大棚种植的铁皮石斛因长期处于高温高湿的苗床小气候环境下,极易遭受各种病害的侵染。介绍了影响棚栽铁皮石斛产量、质量和种植效益的主要病害(炭疽病、茎腐病、疫病、软腐病等)及其防治措施。

石斛SSR标记的开发及可转移性分析

当前已开发的石斛（Dendrobium）SSR标记仅100余对，难以满足研究的需要。为开发更多石斛分子标记，本研究通过生物信息学方法从公共核酸数据库搜索石斛SSR。结果表明，GenBank收录的3599条石斛DNA序列经拼接获得1343条Uni—DNA序列。经搜索，共检测出283个SSR，分布于205条Uni—DNA序列，平均每2815bp含一个SSR。通过序列比对，剔除86条已开发引物的SSR—DNA序列，从剩余的119条序列设计76对引物，并在石斛属32个种间进行可转移性分析，结果显示47对引物得到有效扩增，种间可转移率为51．1％N95．7％，平均为75．9％。有效扩增引物中有46对在石斛种间具多态性，检测出等位基因数2～8个，平均4．0个。选取10对多态性引物扩增60份铁皮石斛资源，每对引物检测出等位基因数2～5个，平均3．4个。根据SSR扩增带型将60份铁皮石斛资源聚为5大类，同一类型内的表型较类群间接近。对DMl21扩增产物测序表明铁皮石斛种内的SSR等位变异由SSR重复次数差异造成，而石斛种间的SSR等位变异还包含SSR位点侧翼序列的插入缺失以及替换。