胆囊结石病家系遗传特征的初步研究

目的 :探讨胆囊结石病家系的遗传特征。方法 :胆囊结石病家系定义为家系内至少有 2名患者 ;采用B超检查和问卷调查方式了解上海地区胆石病家系成员的疾病史和发病情况 ,系谱分析胆石病的遗传特点。结果 :被调查家系总数 93个 ,涵盖家庭成员 5 6 3人 ,患者总数 30 4人 ,患病率达 5 4 .0 %。女性患病率(占 6 1.0 % )显著高于男性 (占 4 4 .3% ) (P =0 .0 0 3)。 6 4个家系含有≥ 3个患者 (即 6 7.7%的胆石病先证者 )具有两名以上 (含两名 )胆石病一级亲属 ;双亲之一或两者均为胆石病患者的家系占 74 .2 % ;先证者的同胞患病率达 5 8.0 % ,双生子均发病 ;年龄大于 6 0周岁的先证者 ,其子女的胆石病患病率达 5 9.0 %。胆石病家系中有高脂血症家族史为 36 .6 % ,高血压家族史为 6 6 .7% ,糖尿病家族史为 2 9.0 %。男女性别间的子代发病率无差异 ,男性受遗传因素的影响可能性较大 ,母亲对后代的影响大于父亲。结论 :胆石病是多基因遗传疾病 ,存在明显的家族聚集性 ,具有常染色体显性延迟遗传的特点 ,与代谢相关的多基因疾病关系密切。

胆固醇结石病人肝脏胆小管侧膜ATP基因表达差异的研究

目的:本研究旨在测定比较胆石病人与对照组肝脏胆小管侧膜转运蛋白表达差异,以探讨胆石病发生的分子生物学机制。方法:研究包括20例胆囊胆固醇结石病人和11例无胆石症的对照。测定血清胆固醇和甘油三酯、胆汁胆固醇、胆汁酸和磷脂含量,采用Carey表计算胆汁胆固醇饱和指数。实时定量PCR法测定肝脏胆小管侧膜转运蛋白(ABCG5、ABCG8、ABCBll和ABCB4)mRNA的表达量。结果:胆石组血清胆固醇低于对照组(P<0.05)。胆石组胆汁胆固醇摩尔百分比和胆固醇饱和指数较对照组显著升高(P<0.01)。胆石组肝脏胆小管侧膜胆固醇转运蛋白ABCG5和ABCG8表达高于对照组,且后者差异具有统计学显著性(ABCG5:31.44±3.17Vs25.72±3.27,ABCG8:27.53±3.06vs17.81±2.23)。ABCBll和ABCB4表达在两组间差异无显著性。结论:本研究显示,胆石病主要病理生理异常为胆汁胆固醇过饱和,与肝脏胆小管侧膜胆固醇转运蛋白ABCG5和ABCG8的mRNA表达增加有关。

胆囊结石病高危人群预测结果的随访研究和预测准确性评判

目的 对胆囊结石病高危人群进行预测结果的随访研究 ,评判新建立的Logistic回归模型预测胆石病高危人群的准确性。方法 预测基地共 4 4 8人 ,病例组 10 1人和对照组 12 7人建立Model 97预测模型。无胆囊结石但不符合对照组标准的作为高危人群随访组。市区随访组 16 2人于 1991年进入预测研究 ,体重指数、血脂、血胰岛素以及B起检查胆囊壁厚和胆囊收缩分数作为预测指标 ,代入预测模型 ,求得成石概率P =0 .2作为判断成石的界值 ,P≥ 0 .2判断为有成石可能。 1997年随访研究 ,以B越复查胆囊 ,检验预测结果。近郊随访组 5 8人于 1997年进入预测研究 ,2 0 0 1年 10月随访研究 ,B超复查胆囊 ,检验预测结果。结果 市区随访组 6年后复查发现 18人新形成胆囊结石 ,14人 (77.8% )预测正确 ,近郊随访组 4年后复查 ,11人新形成胆囊结石 ,9人 (81.8% )预测正确。两个基地合计 2 3例预测正确 ,男性 18例 ,女性 5例 ,准确率为 79.3%。 18人 (6 2 % )为胆固醇结晶 ,11入 (38% )发展成胆石 ,胆石的直径或体积最大径为 5 -2 1mm。结论 预测结果的随访研究表示 ,以年龄、体重指数、血脂、血胰岛素。

大肠癌患者粪胆汁酸代谢状况的研究

一些流行病学研究表明,高脂肪和低纤维素膳食是引起大肠癌的重要原因之一,并认为胆汁酸与大肠癌的发病机理有关。某些临床病例的对照研究发现,大肠癌患者粪便中含有高浓度的总胆汁酸和/或次级胆汁酸,但亦有报道未获得相似的结果。

胆固醇结石病人肝脏SRBI及其转录调节因子LRH-1基因表达的研究

目的:研究胆固醇结石病人BI型清除剂受体(scavengerreceptorBtypeI,SRBI)及其转录调节因子肝脏受体类似物1(liverreceptorhomologue1,LRH-1)的表达,以探讨胆固醇结石发病的机制。方法:对20例胆囊胆固醇结石病人和10例无胆石症对照者测定血清脂质、胆汁成分和计算胆汁胆固醇饱和指数。以实时定量PCR法测定肝脏SRBI和LRH-1mRNA的表达量。结果:胆石组胆石平均胆固醇含量(86.68±5.26)%,均为胆固醇结石。胆石组病人血清高密度脂蛋白(HDL)显著低于对照组[(0.86±0.62)mmol/L比(1.42±0.56)mmol/L,P<0.01]。胆石组胆汁胆固醇在总脂中的摩尔百分比和胆固醇饱和指数显著高于对照组[(7.80±2.06)mol%比(5.26±2.80)mol%,P<0.05]。胆石组SRBI基因mRNA表达量与对照组比较显著增高(2.48±0.44比1.00±0.23,P<0.05),胆石组LRH-1表达也高于对照组(2.05±0.29比1.00±0.28,P<0.05)。结论:胆固醇结石病的主要病理生理异常为胆汁胆固醇过饱和。肝脏LRH-1、SRBI表达增高,参与了胆固醇过饱和胆汁形成,并促进了胆固醇结石形成。

胆囊结石病家系载脂蛋白E基因型分析

目的：探索上海地区胆囊结石病家系的特点和Ａｐｏ Ｅ基因型与该病发病的关系。方法：对５８个胆囊结石病家系（胆囊结石病人１５９例，正常家系成员６１人）进行临床调查并检测血脂水平，采用ＰＣＲ·ＲＦＬＰ方法分析Ａｐｏ Ｅ基因型。结果：胆囊结石病有明显的家族聚集性，体重指数是家系成员发病的高危因素，Ａｐｏ Ｅ等位基因的频率分布为ε２（５．９％、ε３（８３．２％）和ε４（１０．９％，在胆石组中，Ｅ２／３基因型的血清ＡｐｏＢ浓度显著低于其他基因型，胆石组Ｅ２／３频率显著高于非胆石组（Ｐ＜０．０１）。结论：胆囊结石病家系中，不同Ａｐｏ Ｅ基因型的患者有不同的血脂变化特征，Ｅ２／３基因型可能是家系成员发病的一个危险因素。

胆固醇结石患者肝脏核受体基因表达的研究

目的研究胆囊胆固醇结石患者肝脏的核受体基因:肝脏X受体α(liver X receptor α,LXRα)、法尼醇受体(farnesoid X receptor,FXR)、人类固醇异生物受体(steroid xenobiotic receptor,SXR)及肝受体同类物1(liver receptor homolog 1,LRH-1)的表达,探讨胆固醇结石病的发病机理。方法27例胆囊胆固醇结石患者(胆石组),男6例,女21例,平均年龄(52.44±1.92)岁。10例无胆石症的胆囊息肉患者为对照(对照组),男6例,女4例,平均年龄(47.10±2.73)岁。测定胆石胆固醇成分及血清脂类成分:总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-ch)、载脂蛋白(Apo)B和ApoA1和胆汁脂类成分(胆固醇、磷脂和胆汁酸),并计算胆汁总脂和胆汁胆固醇饱和指数。实时定量PCR法测定肝脏LRH-1、FXR、SXR及LXRα基因的表达量。结果胆石组血清中HDL-ch浓度明显低于对照组〔(0.93±0.05)mmol/L vs(1.33±0.09)mmol/L〕,P<0.001;ApoA1浓度也低于对照组〔(1.19±0.05)g/L vs(1.36±0.06)g/L〕,P<0.05;血清ApoB、TC和TG2组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。胆石组胆汁呈胆固醇过饱和(胆固醇过饱和指数:1.17±0.02 vs 0.79±0.10,P<0.001);胆汁胆固醇摩尔百分比浓度较对照组升高〔(7.96±0.39)mol% vs(5.26±0.89)mol%〕,P<0.01;胆汁总脂较对照组明显下降〔(104.72±10.51)g/L vs(154.24±14.20)g/L〕,P<0.05;胆汁中胆汁酸和磷脂成分2组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。胆石组LRH-1表达高于对照组(14.18±1.80 vs 7.22±2.22),P<0.05,LXRα、FXR和SXR表达2组差异无统计学意义(P>0.05)。结论人类肝脏LRH-1的表达增高与胆囊胆固醇结石形成有关。

粪胆汁酸与大肠癌关系的研究

作者以气相色谱法分别测定正常人高、低脂饮食、大肠癌和大肠息肉患者及结直肠次全切除者的类胆汁酸成份和浓度。结果显示,高动物脂肪、高植物脂肪和高混合脂肪饮食者石胆酸(LCA)和脱氧胆酸(DCA)浓度显著高于低脂饮食;大肠癌患者LCA和DCA浓度显著高于对照组,大肠息肉患者DCA浓度亦显著高于对照组;结直肠次全切除者鹅脱氧胆酸(CDCA)浓度显著高于对照组。结果提示,高脂饮食增加次级胆汁酸浓度(被认为是大肠癌的辅致物或促癌物),我国大肠癌发病率不断增高可能与粪胆汁酸代谢改变有关,结直肠次全切除者CDCA浓度显著增高有益于防止剩余结直肠段内息肉的再生或癌变,减少脂肪摄入量可能减少大肠癌的发病率。

基因芯片法检测胆囊胆固醇结石病人肝脏羧肽酶E的表达

目的:利用基因芯片和实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)分析胆囊胆固醇结石病人肝脏中羧肽酶E(carboxypeptidase E,CPE)的mRNA表达,探讨CPE与胆囊胆固醇结石形成可能相关的分子机制。方法:检测病人的血清总胆固醇、三酰甘油以及胆石、胆汁成分测定。正常肝细胞株(HL-7702)为共同参照,用含10 000个cDNA克隆的芯片对8份肝脏标本样品(包括6例胆囊结石和2例无胆囊结石对照)进行基因表达谱对比分析;通过实时PCR验证阳性结果。结果:有效表达基因6 068个,与正常对照组比较,胆固醇结石病人的肝脏有67条差异表达基因,其中CPE基因呈下调表达,经实时PCR验证与芯片筛选结果一致。进一步比较另12例胆固醇结石病人和8例对照组的肝脏组织CPE表达,CPE在胆囊胆固醇结石病人肝脏中的表达也显著低于对照组(39.52±6.21比124.50±36.36,P<0.05)。结论:肝脏CPE表达下降可能与胆囊胆固醇结石的形成有关。

ABCG8基因T400K多态性与胆囊结石病以及血脂水平的关系

目的:探讨人类ABCG8基因T400K多态性与胆囊结石病的关系,以及对血脂的影响。方法:对283例胆囊结石病人和212例健康人群采集静脉血,提取其基因组DNA,采用聚合酶链反应-限制性长度多态性分析ABCG8T400K多态性,并经DNA测序验证;测定血脂。结果:T400K在总体胆石组与对照组之间的分布无显著差异(21.6%比17.0%,P=0.205);但在男性胆石组中,K400频率明显高于对照组(25.9%比11.9%,P<0.01),女性中无差异(18.6%比21.6%,P=0.531)。胆石组血清低密度脂蛋白-胆固醇(2.64±0.88)mmol/L明显高于对照组(2.07±0.78)mmol/L,P<0.01。在TT纯合体胆石病人中,总胆固醇[(4.38±0.98)mmol/L比(4.02±0.83)mmol/L,P<0.05]和低密度脂蛋白-胆固醇[(2.69±0.87)mmol/L比(2.05±0.76)mmol/L,P<0.01]也较对照组显著增加;但在TK/KK中,胆石组和对照组的血脂无差异。结论:ABCG8基因T400K多态性影响胆固醇代谢,K400携带者是男性胆石病的危险因素。

胆囊结石病家系的基因多态性研究

目的 从胆囊结石病多发家系角度来探讨胆石症发病的分子基础并研究部分胆石病易感基因在胆石病家系成员中的分布及与胆石病的关系。方法 收集调查上海地区93个胆石病家系,通过胆囊B超检查证实每个家系至少有2名胆石病患者,对333名家系成员（其中患者239人）进行临床调查并检测血脂水平,应用 PCR-RFLP（PCR-限制性多形性碎片长度）法来检测胆石病易感基因载脂蛋白 B（Apo B）基因Xbal和载脂蛋白E（Apo E）基因Hha I的多态性位点基因型,分析各基因型和等位基因在家系成员中的分布情况。结果 （1）Apo B基因 Xba I多态性 X+/-基因型频率在胆石组为5.9％,非胆石组为10.6％,分布无显著性差异。不同的Apo B基因型,其血液生化指标无显著性差异。（2）Apo E基因多态性各等位基因ε2、ε3和ε4的分布频率在胆石组分别为:6.9％、81.4％和11.7％,在非胆石组分别为:9.0％、81.4％和9.6％,分布无显著性差异。年龄段为≤40岁的家系成员中,Apo E4/x（Apo E3/4,Apo E4/4）基因型在胆石组的分布频率（20.6％）显著高于非胆石组（0％）（P=0.04）。不同的Apo E基因型对血脂水平有着不同的影响,总体上看,E2/x（Apo E2/2,Apo E2/3）基因型者的血清TG和HDLC显著升高,LDLC显著降低（P<0.05）;而E4/x基因型者的TC、LDLC。

正常人胆囊组织基因表达谱的研究

目的:建立正常人胆囊组织基因表达目录。方法:采用含17000cDNA克隆的基因微矩阵与2例正常胆囊之cDNA杂交,取基因表达平均值,分析胆囊的基因表达谱。结果:正常胆囊有11047条基因表达,其前10位高表达基因与平滑肌收缩及物质转运有关。在前200位高表达的基因中,离子通道和转运蛋白、蛋白翻译和合成类以及发育相关类基因占多数。在胆囊所有表达的基因中,12、2、21号染色体表达的数目最多。另外,21条胆石病候选基因在胆囊中有表达,其中主要为脂类代谢相关基因。两条胆囊特异性表达基因:NPC1L1、SLC17A2。结论:胆囊高表达的基因可能与胆囊收缩和胆汁浓缩有关,胆囊不仅参与机体的消化功能,还参与调节脂类代谢平衡。

胆囊切除者的粪胆汁酸代谢状况

一些流行病学研究表明,胆囊切除病人的大肠癌发病率明显增高。据认为是由于胆汁酸的代谢发生了变化。作者用气相色谱法测定了10名单纯胆囊结石患者胆囊切除前后的粪胆汁酸成分和浓度,以探讨胆囊切除者大肠癌发病率的增高与粪胆汁酸成分和浓度的关系。研究结果显示,胆囊切除后病人粪便中总胆汁酸和脱氧胆酸浓度均显著高于胆囊切除前(P<0.05),支持胆囊切除者由于粪便中次级胆汁酸浓度的增高而导致大肠癌发病率增高的假说。

METABOLISM PATTERN OF FECAL BILE ACIDS IN PATIENTS WITH LARGE BOWEL CANCER

The feca! bite acids were extracted from 21 patients with large bowel (colonic and rectal) cancer and 21 controls, and the bile acid composition and concentration were measured by gas chromatography. The total bile acid concentration and concentration of individual bile acids were not statistically different between colonic and rectal cancer. Bat the concentration and the percentage composition of secondary bile acids (deoxycholic and lithocholic acids) were significantly higher than that in controls. However the percentage composition of primary bile acids (cholic and chenocholic acids) were significantly lower than that in controls. The results suggest that incidence of large bowel cancer is closely related to the metabolism of fecal bile acids, and the etiology of colonic and rectal cancers may be the same.

家族性胆囊结石病发病因素研究

目的研究遗传和环境因素在家族性胆囊结石病发病中的作用。方法采用问卷调查方式和B超检查了解家系成员的一般情况和发病情况,采集家系成员外周血用于血脂检查。系谱分析胆石病遗传特点并计算遗传度。结果收集135个家系,共695人,胆石病患者370例,发病率53·24%。其中女性发病率(56·66%)明显高于男性(48·23%)(χ2=4·785,P=0·03)。系谱分析发现男女均可患病,无隔代遗传。一级亲属遗传度138%±7%,双生子同病率100%。胆石病组平均体重指数24kg/m2±3kg/m2,显著高于无胆石病组平均体重指数22·7kg/m2±2·9kg/m2(t=4·035,P<0·01)。胆石病组中有糖尿病、高血压、高血脂病史以及喜油腻饮食者明显多于无胆石病组(P均<0·05)。饮酒习惯、抽烟和胃肠道手术史在胆石病组和无胆石病组中差异无统计学意义。胆石病组高密度脂蛋白和载脂蛋白A1水平低于无胆石病组(P均<0·01)。其余血脂指标在胆石病组和无胆石病组中差异无统计学意义。结论(1)家族性胆囊结石病具有常染色体显性遗传特点,遗传因素是发病的基础。(2)性别、肥胖、喜油腻饮食、高血压、糖尿病和高血脂病史是家族性胆囊结石病发病的危险因素。(3)胆石病患者存在脂类代谢异常。

胆石病易患因素的病例对照研究

分析６６例无症状胆囊结石病人胆囊壁、胆囊动力学和血清中胆汁酸、胰岛素、脂蛋白、载脂蛋白和脂质过氧化物，２４６例正常人作对照，探讨胆石病易患因素，胆石病人胆囊壁较对照组增厚（２．２６±０．５５ｍｍｖｓ２．０６±０．２９ｍｍ）．胆囊餐后体积增大（１０．９７±１０．２５ｍｌｖｓ６．５２±４．６３ｍｌ），收缩率减小（６５．１±２２．２％ｖｓ７６．ｌ±１２．２％）；血清脱氧胆酸增加（０．９５±０．８１ｕｍｏｌ／ｌｖｓ０．６８±０．７１ｕｍｏｌ／ｌ），胰岛素增加（１２．９８±７．７９ｕｕ／ｍｌｖｓｌｌ．２５±４．５２ｕｕ／ｍｌ）。其余指标均无改变。

一个大型胆囊结石病家系的遗传特征及流行病学分析

目的调查某胆囊结石(胆石)病家系的遗传特点及流行病学特征。方法对该家系进行问卷调查、体格检查及实验室检查。结果该家系四代共113人(男55人,女58人),胆石患者33例(男13例,女20例),女性发病率(34.48%)高于男性(23.64%),但差异无统计学意义。和先证者有血缘关系的亲属中Ⅱ、Ⅲ代发病率52%,明显高于配偶的发病率(20%),P=0.003。先证者Ⅰ级亲属遗传度86.38%±46.46%。患者平均体重指数(25.06±2.59)kg/m2,显著高于非胆石病者平均体重指数(22.69±3.24)kg/m2,P=0.012。胆石病患者中有高血压、高血脂病史者明显多于非胆石病者,差异有统计学意义,P值分别为<0.01和0.017。糖尿病病史、饮酒习惯、喜油腻饮食在胆石病患者和非胆石病者中无差异。胆石病患者血糖平均值(5.35±0.77)mmol/L。血胆固醇和甘油三酯在胆石病患者和非胆石病者中无差异。结论该家系胆石病具有明显家族聚集性,符合常染色体显性遗传特点;性别、肥胖、高血压和高血脂病史是该家系的危险因素。

胆结石病人肝脏核受体LRH-1及其调控基因表达的研究

目的研究胆囊胆固醇结石病人肝脏的肝脏受体类似物1（Liver receptor homolog 1，LRH-1）及其调控的三磷酸腺苷结合盒（ABC）转运体家族成员abcg5／8的表达，探讨胆固醇结石病发病的机制。方法27例胆囊胆固醇结石病人，男6例，女21例；年龄平均52岁。10例无胆石症的胆囊息肉病人为对照，男6例，女4例；平均年龄48岁。测定胆汁脂类成分和计算胆汁胆固醇饱和指数。实时定量PCR法测定肝脏LRH-1及abcg5／8mRNA的表达量。结果胆石组LRH-1表达高于对照组（14．18±1．80VS7．22±2．22，P〈0．05），胆石组肝脏abcg基因mRNA表达量均较对照组增高（abcg5：49．34±3．68vs33．48±2．77，P〈0．05；abcg8：38．93±5．70vs18．70±3．42，P〈0．05）。胆石组胆汁呈胆固醇过饱和（1．17±0．02）。结论该研究结果提示人类肝脏LRH-1及其调控的abcg5／8的表达增高与胆囊胆固醇结石形成有关。

胆囊胆固醇结石患者肝脏受体类似物1基因表达差异的研究

目的研究胆囊胆固醇结石患者肝脏受体类似物1(LRH-1)表达,探讨其与胆固醇结石病发病的关系。方法27例胆囊胆固醇结石患者,男6例,女21例,平均年龄52．44岁。14例无胆石症者为对照(肝脏肿瘤2例,胆囊息肉患者12例),男9例,女5例,平均年龄47．50岁。测定胆汁脂类成分和计算胆汁胆固醇饱和指数。实时定量PCR法测定肝脏LRH-1 mRNA的表达量。结果胆石组LRH-1表达14．18±9．37,高于对照组7．86±6．19,(P＜0．05),胆石组胆汁呈胆固醇过饱和(1．17±0．27)。结论本研究提示肝脏LRH-1表达增高与胆囊胆固醇结石病有关。

急性胰腺炎大鼠脑组织TNF-α mRNA和蛋白表达及其意义

目的探讨急性胰腺炎大鼠脑组织中TNF-α mRNA和蛋白的表达及其对胰性脑病发病机制的意义。方法应用5％、1％的牛磺胆酸钠分别诱导急性坏死性胰腺炎（ANP）和急性水肿性胰腺炎（AEP）大鼠模型，同时设立假手术组，每组16只。分别于模型诱导后12h，以酶联免疫吸附（ELISA）法测定大鼠血液和脑脊液标本中TNF-α的含量，RT-PCR方法测定脑组织TNF-α mRNA的表达，Western-Blot测定TNF-α蛋白的表达水平，免疫组化观察TNF-α蛋白的定位表达。结果ANP组、AEP组和假手术组的血清TNF-α水平分别为1065．6pg／ml、577．5pg／ml和543．8pg／ml，脑脊液TNF-α水平分别为820．9pg／ml、307．4pg／ml和481．6pg／ml。ANP组血清和脑脊液TNF-α水平同AEP组和假手术组相比，差异均有显著性（P〈0．05）。ANP组脑组织TNF-α mRNA和蛋白的表达明显增强。ANP组TNF-α蛋白的表达定位于大脑小胶质细胞和神经元细胞。结论在ANP病程中，大鼠脑组织可能是细胞因子过度表达的来源之一；脑组织中，TNF-α主要由小胶质细胞和神经元细胞表达；TNF-α的过度表达可能是ANP早期脑髓鞘损伤的原因之一。