目的:探究B16黑素瘤小鼠脾脏淋巴细胞的抗肿瘤效应与机制,为过继性免疫治疗提供新的思路。方法:B16黑素瘤小鼠模型构建,B16细胞分别与正常小鼠脾脏淋巴细胞(Spleen lymphocytes of normal mice,NL)和荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞(Splenic lymph...目的:探究B16黑素瘤小鼠脾脏淋巴细胞的抗肿瘤效应与机制,为过继性免疫治疗提供新的思路。方法:B16黑素瘤小鼠模型构建,B16细胞分别与正常小鼠脾脏淋巴细胞(Spleen lymphocytes of normal mice,NL)和荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞(Splenic lymphocytes of tumor-bearing mice,ML)按照1∶20共培养,并加入刀豆蛋白A(ConA)刺激24 h,CCK8检测各组细胞活力,Calcein/PI荧光染色同步检测;流式细胞术检测NL/ML中CD4^(+)、CD8^(+)比例占比;ConA刺激NL/ML 24 h,Western blot检测PD-1、颗粒酶B、穿孔素的表达水平,ELISA检测TNF-α、IFN-γ表达水平。结果:CCK8以及Calcein/PI荧光染色结果提示ML具有更明显的抑瘤效果;与NL相比,在ML中CD8^(+)表达比例增加,PD-1表达下调(P<0.05);ConA刺激后,ML中颗粒酶B、穿孔素以及TNF-α、IFN-γ表达较NL上调(P<0.05)。结论:黑素瘤小鼠脾脏淋巴细胞较正常小鼠脾脏淋巴细胞对黑素瘤具有更明显的抑瘤效应。展开更多
文摘目的:探究B16黑素瘤小鼠脾脏淋巴细胞的抗肿瘤效应与机制,为过继性免疫治疗提供新的思路。方法:B16黑素瘤小鼠模型构建,B16细胞分别与正常小鼠脾脏淋巴细胞(Spleen lymphocytes of normal mice,NL)和荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞(Splenic lymphocytes of tumor-bearing mice,ML)按照1∶20共培养,并加入刀豆蛋白A(ConA)刺激24 h,CCK8检测各组细胞活力,Calcein/PI荧光染色同步检测;流式细胞术检测NL/ML中CD4^(+)、CD8^(+)比例占比;ConA刺激NL/ML 24 h,Western blot检测PD-1、颗粒酶B、穿孔素的表达水平,ELISA检测TNF-α、IFN-γ表达水平。结果:CCK8以及Calcein/PI荧光染色结果提示ML具有更明显的抑瘤效果;与NL相比,在ML中CD8^(+)表达比例增加,PD-1表达下调(P<0.05);ConA刺激后,ML中颗粒酶B、穿孔素以及TNF-α、IFN-γ表达较NL上调(P<0.05)。结论:黑素瘤小鼠脾脏淋巴细胞较正常小鼠脾脏淋巴细胞对黑素瘤具有更明显的抑瘤效应。
