拥挤胁迫对草鱼非特异性免疫功能的影响

在实验室条件下利用放养密度和放养时间构建组间差异,模拟养殖过程中草鱼所面临的拥挤胁迫。胁迫第7、14、30、60d后采样测量免疫指标。结果表明,高密度组(80g·L-1)的血清溶菌酶活性在胁迫后开始升高,并于14d时达峰值,以后逐渐下降,呈倒"U"型趋势。血清杀菌活性随放养密度的剧增而锐减(P<0.005)。白细胞比容在各组间未显示明显差异。而在30d和60d所测的高密度组草鱼的头肾巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数结果显示,高密度组低于对照组(P<0.05)。60d后用嗜水气单胞菌进行攻毒实验,高密度组死亡率高达75.0%,中密度组也达到了63.6%,而对照组只有25.0%。同期所测的脾脏脏器系数显示无论高密度组还是中密度组均显著低于对照组(P<0.01),且经解剖和正常鱼对比,发现其脾脏已明显萎缩。各实验组血清皮质醇浓度均在胁迫初期达到最大值,随后降低,至实验后期基本恢复到正常水平。

嗜水气单胞菌毒力与毒力基因分布的相关性

采用PCR扩增的方法对9株鱼源嗜水气单胞菌AEROM ONAS HYDROPHILA中的气溶素基因(AERA)、溶血素基因(HLYA)和丝氨酸蛋白酶基因(AHPA)进行了扩增。结果表明,6/9的A.HYDROPHILA中存在AERA基因,8/9的A.HYDROPHILA中存在HLYA基因,而在7/9的A.HYDROPHILA中检测到AHPA基因。通过比较基因检测的结果与嗜水气单胞菌对鲫鱼的致病性,发现AHPA阴性菌株是无毒株,强毒株都呈AERA+HLYA+AHPA+基因型。AERA+HLYA+AHPA+基因型是致病性嗜水气单胞菌主要的基因型。本研究首次发现AHPA阳性的嗜水气单胞菌皆为毒力菌株,并且发现AERA和AHPA基因存在相关性,探讨了嗜水气单胞菌致病性与毒力基因分布的关系。

拥挤胁迫后鲫鱼血液皮质醇和溶菌酶水平的变化及对病原的敏感性

分别在拥挤胁迫后第3、10、20、30天对鲫鱼(Carassiusauratus)血液皮质醇水平和血液溶菌酶水平进行了检测,并在每次采集血样后用嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)进行人工感染以评估鱼体抵抗力。结果显示,血液皮质醇水平在胁迫后几天内显著升高(P<0.005),随后虽有所下降,但至第30天高密度组仍保持较高水平(216.32±11.91)ng/mL。实验初期,血液溶菌酶水平小幅升高,但经过长时间的拥挤后,高密度组血液溶菌酶活性受到极大抑制,显著低于同期对照组(P<0.01)。攻毒后的死亡率与胁迫时间成正相关,在最后一次采样期,高密度组死亡率高达58.3%,而同期对照组仅为16.7%,两者具统计学差异(P<0.01)。实验表明,经过拥挤胁迫后,鲫鱼血液皮质醇水平和溶菌酶水平均发生了变化,短期内,两者成正相关,而长期胁迫则表现为负相关。另外,拥挤胁迫也引起了鱼体抵抗力的下降。

淡水养殖鱼类暴发性传染病致病细菌的研究

于1990—1991年的5—10月间,从湖北、湖南、河南和广东4省的9种淡水养殖鱼类的发病鱼睥、肝、肾中分离的93株细菌为材料,经100多个表型特征和细菌DNA中G+Cmol％遗传型特性测定等研究结果,可归属为产气单胞菌属中的运动性嗜中温产气单胞菌和弧菌属中的河弧菌。按照国际细菌命名法规优先律应为点状产气单胞菌[Aeromonas punctata(Zimmermann)nom.rev];而河弧菌与以前所描述的生物变种Ⅰ、Ⅱ型不同:在43℃能生长;发酵水杨苷产酸;利用D-葡糖酸钙、腐胺;不能利用戊二酸,D-葡糖醛酸;从D-葡萄糖产气;DNA中的G+Cmol％为47(Tm),鉴定为河弧菌生物变种Ⅲ(新生物变种Vibrio fluvialis Biovar Ⅲ.Biovar nov.)。

温度和pH值对嗜水气单胞菌毒力基因表达的影响

为了解培养温度和pH值对嗜水气单胞菌的毒力基因表达以及致病性的影响,利用反转录PCR(RT-PCR)对4种基因的表达进行了研究。研究结果显示嗜水气单胞菌毒力基因的表达受温度和pH值影响,其中溶血素(AHH)、气溶素(AerA)、外膜蛋白(OMP)和粘附素(Aha)毒力基因在15℃、25℃和37℃下均能高效表达,在4℃AHH和AerA两基因也能持续表达,但OMP和Aha两基因的表达停止。在中性或偏酸性的条件下(pH5.0和pH7.0)4种毒力基因都得以表达,在碱性条件下(pH9.0)4种基因中只有AHH得以表达,而Aha等其它3个基因的表达减弱或停止。基因表达的研究结果得到鲫鱼攻毒试验结果的支持。此外,研究还表明细菌的毒力与鱼的体温也有关系。

我国鱼类病原——嗜水气单胞的耐药性研究

采用琼脂扩散法和稀释法研究 2 6株嗜水气单胞菌对 2 1种抗菌药物的敏感性 ,分析了其耐药状况。结果表明 :从不同地区分离收集到的 2 6株嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)对青霉素类和头孢菌素类药物全部具耐药性 ,对万古霉素多数不敏感。 2 1种药物中最敏感的是氟哌酸、氯霉素、呋喃唑酮 ,总体耐药率分别为 7.7%、7.7%和 11.5%。氨基糖甙类药物和四环素类药物的耐药频率介于其间。对磺胺药的耐药菌比例也很高 ,高达 73.1%的 A.hydrophila对磺胺及复方磺胺其有耐药性 ,但耐磺胺比耐复方磺胺的现象更为普遍。对 3种常用药物具有耐药性的菌株比例最高。同时对鱼类病原菌耐药性的判定标准以及两种试验方法在鱼类病原菌耐药性研究中的适用性问题进行了讨论。

嗜水气单胞菌和河弧菌二联疫苗对鲫的免疫效果

在采用正交试验设计优化了 Aeromonas hydrophila和 Vibrio fluvialis二联全菌疫苗制备工艺的基础上 ,研究了采用该工艺所制备的疫苗对鲫的免疫保护效果。结果表明注射免疫鲫4周后 ,抗 A.hydrophila和 V.fluvialis血清凝集效价分别为 :1∶ 4— 1∶ 3 2和 1∶ 2— 1∶ 1 6 ,平均都为 1∶ 1 0 ,但对攻毒均具有有效的保护作用。浸泡免疫、高渗浸泡免疫或加多糖浸泡免疫在免疫 4周后 ,对 A.hydrophila攻毒均无保护作用 ;然而 ,加多糖浸泡免疫对 V.fluvialis攻毒可产生有效的保护。免疫扩散试验表明 ,在煮沸并经超声波处理后的 A.hydrophila或V.fluvialis菌液中均存在两种优势抗原。

半咸水、海水对几种渔用抗菌药物体外活性的影响

研究了人工海水、天然半咸水以及生理盐水对６种我国常用抗菌药物（环丙沙星、四环素、土霉素、氯霉 素、磺胺以及呋喃唑酮）体外抗两种鱼类病原细菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ和Ｖｉｂｒｉｏ ｆｌｕｖｉａｌｉｓ）活性的影响。结果表明：海水对几乎所有受试药物的抗菌活性均呈抑制作用，其中对土霉素的影响最为显著；半咸水可使土霉素、 四环素及磺胺药的抗菌活性下降；生理盐水对不同药物或不同细菌的作用不一致；呋喃唑酮的抗菌活性不受 ３种水质的影响。此外，喹诺酮与二价阳离子的螯合产物可能并不稳定，当用无二价阳离子水稀释后药物可 被重新释放。

我国淡水养殖乌鳢的类立克次体感染

2001-2002年,湖北省某养殖场发生一种导致养殖乌鳢(Ophiocephalus argus C)大规模死亡的突发性传染病.该病发病率为60％-70％,发病死亡率高达100％.病鳢腹部膨大,内脏器官出现“粟粒”样结节,肾脏肿大成5-10个乳白色、灰白色“内瘤”状物或溃烂成“豆渣”样.光学显微镜观察发现细胞内出现嗜酸性或嗜碱性内含物,内脏器官出现肉芽肿炎症、细胞大范围的变性和死亡;电子显微镜观察显示细胞内包含物为质膜包绕的类立克次体(RLO).RLO圆形或椭圆形,直径0.5-1.5μm,具中心核区,胞质内含较丰富的核糖体,可见横向二分裂的RLO.组织匀浆分离纯化物的负染观察也表明为RLO.结果证实,养殖乌鳢大规模死亡系类立克次体感染引起.

鲢鳙鱼流行性传染病的流行病学和细菌病因的初步研究

1990年3～10月,作者对湖北、湖南,河南三省部分地区的28个养殖场进行了鲢鳙鱼流行病学调查和致病菌的初步研究。结果显示:在调查范围内发病率达60%以上;受感染的除鲢、鳙外,还有鲫、鳊(鲂)、鲤、草鱼以及其它野杂鱼、河蚌;分离到138株细菌,经鉴定可归为三类,早期(3～4月)出现的鲁克氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)、中后期(5月下旬以后)出现的产气单胞菌(Aeromonas sp.)及弧菌(Vibrio sp.)。结合水质环境条件分析,致病细菌是继发侵入者,原发病因除水体的理化因子外,不排除还有病毒的可能性。

嗜水气单胞菌和河弧菌二联疫苗对鲫鱼的免疫效果

在采用正交试验设计优化了Aeromonas hydrophila和Fibrio fluvialis二联全菌疫苗制备工艺的基础上．研究了采用该工艺所制备的疫苗对鲫鱼的免疫保护效果。结果表明注射免疫鲫鱼4周后，抗A.hydrophila和V．fluvialis血清凝集效价分别为1：4-1：32和1：2-1：16，平均都为1：10，但对攻毒均具有有效的保护作用。浸泡免疫、高渗浸泡免疫或加多糖浸泡免疫在免疫4周后，对A．hydrophila攻毒均无保护作用；然而，加多糖浸泡免疫对V.fluvialis攻毒可产生有效的保护。免疫扩散试验表明，在煮沸并经超声波处理后的A．hydrophila或V.fluvialis菌液中均存在两种优势抗原。

半咸水、海水对几种渔用抗菌药物药效的影响

随着我国海水养殖业以及盐碱水域养殖业的蓬勃发展，鱼类病害问题已相当严重，而且抗菌药物的使用与淡水养殖中同样普遍。然而，有关海水、半咸水对抗菌药物药效的影响我们所知甚少，相关的研究报道鲜见，给这类药物在海水或盐碱水域的合理使用带来困难，因此开展这课题的研究显得十分必要。

择优选点颈丛神经阻滞麻醉探讨

由于颈区局部解剖结构的复杂,传统的三点法和改良一点法颈丛阻滞可能导致双侧颈丛神经被同时阻滞,仍易发生呼吸困难等神经阻滞并发症。为了避免和减少并发症出现,我院对182例颈部手术患者施行了择优选点颈丛神经阻滞麻醉,临床效果较为满意,现总结报告如下:1 临床资料1．1 一般资料:本组182例中男41例,女141例,年龄12~72岁,ASA Ⅰ~Ⅱ级。病种分布:左。

预防性气管插管加硬膜外阻滞在脊柱矫形手术中的临床研究

目的:探讨预防性气管插管加硬膜外阻滞麻醉在脊柱外伤和脊柱畸形手术中临床应用的效果。方法:将24例脊柱外科手术病人随机分为硬膜外麻醉组、全麻组、气管插管加硬膜外组;分别连续观察三组麻醉后病人平均动脉压(MAP)、心率(HR)、呼吸频率RR、脉搏血氧饱和度(SPO_2)在术中的变化情况和麻醉过程中不良反应及并发症。结果:(1)硬麻组术中MAP下降、HR明显增快,SPO_2下降,RR明显增快,(P<0.01),提示术中必须加强呼吸循环管理和监测;(2)全麻组术毕完全清醒时间明显延迟,长时间的全麻对肺部疾患的手术病人不利,且术后并发症增加;(3)硬气组病人麻醉后MAP、HR、SPO_2、RR等生命体征都波动在正常范围,术中麻醉平稳,呼吸循环功能基本稳定,术毕清醒早,无并发症发生。结论:预防性气管插管加硬膜外阻滞麻醉用于脊柱矫形手术是安全可靠的。

硬膜外麻醉术后并发截瘫1例教训

患者女,56岁,农民.右上腹持续性疼痛10余天,加重2天.10日前出现右中上腹疼痛、发胀,病情逐渐加重伴发热、黄疸、呕吐数次(为胃内容物),抬入病房.16年前曾因胆囊炎、胆结石行胆囊切除术.查体:全身皮肤及巩膜中度黄染,神清,表情淡漠,右中上腹压痛、反跳痛.查:白细胞26.4×10~9/L.中性0.92,淋巴0.08,凝血时间2分,出血时间1分,CT检查提示肝内胆管多发性结石伴炎症.胆总管下段结石,重度扩张.诊断为急性化脓性胆管炎伴感染性休克.急诊手术.

转生长激素基因鲤鱼几项血液指标的检测

以F2代转"全鱼"生长激素基因鲤鱼为材料,对其体重、体长和几项血液指标进行了检测.实验显示:转基因鱼体重和体长均极显著地高于对照鱼(P＜0.01);转基因鱼每毫升血液中淋巴细胞总数为(25.2±6.7)×106个,对照鱼为(18.2±6.6)×106个,两者差异显著(P=0.015);转基因鱼红细胞压积值和白细胞吞噬百分率都高于对照鱼(P＜0.05),但是吞噬指数没有统计学差异;转基因鱼的皮质醇水平为(63.8±16.8)ng/ml,对照鱼为(33.2±9.6)ng/ml,前者明显高于后者(P＜0.01).以上结果表明,转生长激素基因不但加速了鲤鱼的生长,还促进了其血液细胞的增殖和吞噬功能,并直接或间接地引起了血清皮质醇水平的升高.