低氧对RAW264.7细胞中糖皮质激素受体表达的调节

目的观察小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞在低氧培养箱(1%O2)内不同时间段糖皮质激素受体(glucocorti-coidreceptor,GR)mRNA和蛋白表达的变化,探讨低氧对RAW264.7细胞中GR表达的调节。方法采用体外培养的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞,将细胞接种于60mmdish内,细胞长至50%时,将培养液置换为含5%无激素胎牛血清的无糖DMEM培养液,放入低氧培养箱内,同时输入含1%O2、5%CO2、94%N2的混合气体,分别于低氧处理4、8、12h后将细胞取出,抽提RNA或者蛋白,应用real-timePCR和Western印迹分析测定GR mRNA和蛋白的表达水平,以未低氧处理RAW264.7细胞为对照。结果低氧处理4h可使RAW264.7细胞中GR mRNA的表达明显上调为对照的1.8倍(P<0.05),处理至12hGR mRNA的表达仍高于对照,约为对照的2.7倍(P<0.05);低氧处理RAW264.7细胞8hGR蛋白的表达也明显升高,约为对照的1.7倍(P<0.05),至低氧处理12h,GR蛋白的表达仍高于对照。结论低氧可以上调体外RAW264.7细胞GR mRNA和蛋白的表达。