埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白PGRP-S2的克隆及原核表达

昆虫可通过体内肽聚糖识别蛋白识别外来微生物的肽聚糖而启动免疫机制,从而降低微生物对昆虫自身的影响,但关于蚊虫的相关报道较少。为了解埃及伊蚊的肽聚糖识别蛋白特性,本研究通过分子克隆技术,成功克隆并测序获得了埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白AePGRP-S2的ORF序列。该ORF序列有510个碱基,可编码170个氨基酸。生信分析发现其具有典型的PGRP超家族保守结构域与酰胺酶结构域,表明该基因序列很有可能为埃及伊蚊的肽聚糖识别蛋白基因,且可能具有直接的抗菌活性。通过系统进化树分析,发现埃及伊蚊PGRP-S2与埃及伊蚊的PGRP-S的亲缘关系最近;为进一步获得埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白AePGRP-S2,本研究构建表达载体,并将靶基因原核表达于大肠杆菌BL21(DE3)中,通过SDS-PAGE及Western Blot的检测,获得46 kDa目的蛋白,为进一步深入了解埃及伊蚊体内肽聚糖识别蛋白PGRP的功能及作用机制奠定基础。

日本眼科学会《早产儿视网膜病变的抗VEGF疗法临床指南》解读

早产儿视网膜病变(ROP)是全世界儿童致盲的首位原因。近年来抗血管内皮生长因子(VEGF)玻璃体内注射成为ROP应用越来越广泛的一线治疗方案,但抗VEGF药物治疗ROP在中国仍属于超适应证用药,其注射方法、剂量等也与成人有所不同。2020年12月日本眼科学会发布了《早产儿视网膜病变的抗VEGF疗法临床指南》,是目前唯一一个关于ROP抗VEGF治疗的指南;且日本与中国的人种相似度高,该指南对于中国ROP治疗实践具有重要的参考意义。本文将对该指南进行解读,以期为中国眼科医生对ROP抗VEGF疗法的认识、诊断、治疗及相关临床研究提供参考。

苏云金芽孢杆菌LLP29菌株中ykkB基因的克隆、表达及活性分析

乙酰化是蛋白质翻译后修饰的一种重要方式,可参与多种细胞进程,但迄今未见有关乙酰化修饰在Bt中发挥作用的报道.本课题组前期通过对高效杀虫Bt菌株LLP29的基因组进行测序分析,发现该菌株也存在编码乙酰转移酶的基因(如ykkB).为探讨乙酰化修饰在Bt菌株中的作用,以ykkB为靶标,利用无缝克隆技术成功克隆与测序了ykkB基因.通过生物信息学分析,发现该基因编码的蛋白可能是一类N-乙酰转移酶,赖氨酸和亮氨酸含量最高,半胱氨酸含量最低,是一种亲水性蛋白质,且无跨膜区;同时,成功表达、纯化了YkkB蛋白,通过体外自乙酰化分析,证实该蛋白可发挥乙酰基转移的作用.

全自动阴离子表面活性剂测定仪与手工测定比较

为了使亚甲蓝分光光度法测定水体中阴离子表面活性剂的试验更节省劳动力并提高萃取效率,可采用全自动阴离子表面活性剂测定仪替代手工测定。该测定仪按照GB/T 7494—1987中的试验方法及步骤,测定饮用水、地表水、生活污水和工业废水中低浓度亚甲蓝活性物质时,其线性相关系数、准确度、稳定性、样品平行性以及加标回收率的测定结果均优于手工测定。测定仪的检出限为0.015μg/mL,符合国家标准要求的0.05μg/mL。手工测定的标准曲线相关系数平均值为0.9994,而全自动仪器的相关系数平均值为0.9998。在准确度测定中,质控液理论值为0.8025μg/mL,全自动仪器测定结果为0.8020μg/mL,手工测定结果为0.7760μg/mL,全自动仪器更接近真值。由于水样浓度本身低于方法检出限浓度,水样稳定性的手工测定和全自动仪器的检测结果相差无几,但全自动仪器的检测结果波动更小,稳定性更好;全自动仪器的回收率在97.87%~100.71%,而手工测定的加标回收率在92.20%~95.04%。

先天性玻璃体囊肿合并弱视1例

患儿女,4岁。因体检发现右眼视力不佳2个月,于2022年1月25日到中南大学湘雅二医院眼科门诊就诊。既往无眼外伤史及眼部手术史,无传染病及寄生虫接触史,无食物药物过敏史,无全身其他疾病史。