不同授粉隔离方式对荔枝杂交育种效率的影响

荔枝雌雄同株、花量大,杂交育种效率低下。为提高花期不遇荔枝品种的单位时间杂交效率,研究了几种授粉隔离方式的杂交育种效率。结果表明:在100目防虫网的网室隔离条件下,杂交前后都套袋具有最高的杂种率,其次为授粉前套袋隔离;网室内不进行套袋隔离直接授粉是最有效的授粉方式,荔枝坐果率最高,虽然杂种率最低,但单位时间内获得的杂种植株最多。

芒果MinSPP基因的克隆及表达载体构建

磷酸蔗糖磷酸酶(sucrose phosphate phosphatase)是合成蔗糖的关键酶,为了研究其在芒果果实中蔗糖合成的作用机制,从芒果果肉中克隆得到1个与蔗糖合成相关的基因,将其命名为MinSPP,其cDNA全长序列为1561bp,开放阅读框为1275bp,编码424个氨基酸,蛋白质分子量为48.46ku,等电点为5.34,对MinSPP基因编码的蛋白进行系统发育分析,发现其与克莱门柚具有较近的亲缘关系。采用qRT-PCR对该基因在后熟处理的贵妃芒果肉中的表达量进行分析,结果显示从青熟期到成熟期芒果果肉中该基因表达量逐渐上升,从成熟期到完熟期芒果果肉表达量逐渐降低,其中成熟期芒果果肉中表达量较高。本研究深入了解了芒果蔗糖合成的分子机制,进一步构建了pBI121-MinSPP过表达载体,为MinSPP的功能鉴定奠定了理论基础。

芒果无机焦磷酸酶基因的克隆及其表达载体构建

无机焦磷酸酶(inorganic pyrophosphatase,PPase)催化焦磷酸(PPi)水解为2个无机正磷酸(Pi),是蔗糖合成途径中的调控关键节点之一。本研究根据已经报道的PPase基因的序列设计兼并引物,采用3′RACE和5′RACE方法,从贵妃芒果的果实中克隆得到了一个芒果PPase基因,将其命名为MiPPase,其全长cDNA序列为1014 bp,开放阅读框为837bp,编码278个氨基酸,分子量为30.85ku,等电点为4.68。通过系统发育分析发现该基因编码的蛋白与红花烟草具有较近的亲缘关系。为深入探究MiPPase基因在蔗糖代谢过程中的作用,本研究成功构建出pGreenII62-SK-MiPPase基因过量表达载体,为后续研究MiPPase基因在芒果果实蔗糖合成的作用机理提供理论依据。

芒果MinMYBPA基因的克隆及载体的构建

MYB (Myeloblastosis)是植物最大的转录因子家族之一,广泛参与植物代谢调控。为了研究其在芒果果皮中花青苷合成的作用机理,本研究从芒果果皮中克隆得到一个与花青苷合成相关的基因,将其命名为MinMYBPA,其cDNA全长序列为1 081 bp,开放阅读框为843 bp,编码280个氨基酸,蛋白质分子量为32.09 k D,等电点为9.01,对MinMYBPA基因编码的蛋白进行系统发育分析,发现其与克莱门柚具有较近的亲缘关系。本研究为深入了解其在芒果花青素合成和积累的分子机理,进一步构建了pTRV2-MinMYBPA沉默表达和pGreenⅡ62-SK-MinMYBPA过表达载体,为MinMYBPA的功能鉴定提供参考依据。