CT引导脑内植入携带人类酪氨酸羟化酶基因腺相关病毒载体治疗实验性帕金森病猴

目的 观察CT引导脑内注射人类酪氨酸羟化酶基因腺相关病毒载体 (AAV hTH)对神经细胞的转染能力 ,以及对帕金森病 (PD)猴的治疗效应。方法 经右侧颈内动脉注射 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)制作 6只偏侧帕金森病恒河猴模型 ,经CT引导将AAV hTH注入 5只帕金森病猴右侧尾状核内 ,观测猴模型的行为学改变 6个月以上 ,以高效液相色谱法 (HLPC)测定转染后尾状核内多巴胺 (DA)及其代谢产物含量 ,并以免疫组化检测法及逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)方法检测酪氨酸羟化酶 (TH)基因的表达情况。结果 CT引导定位穿刺有实时操作、定位精确、微创的优点。所有注射AAV hTH的偏侧PD猴模型术后 2周即有帕金森病症状改善 ,持续 6个月以上 ,其中 1只动物阿朴吗啡旋转实验示完全停止了帕金森病旋转现象 ,其余动物旋转次数较术前减少约4 2 %～ 70 %。实验侧与健侧尾状核区多巴胺及其代谢产物含量比值较未治疗模型增高。免疫组化染色见穿刺针道部位有大量TH阳性细胞 ;RT PCR检测到实验侧尾状核区有TH mRNA存在 ;而对照侧尾状核区、其他部位脑组织与心、肝、肾组织及未注射模型实验侧尾状核区均未见阳性发现。结论 CT引导立体定向穿刺PD猴尾状核注入AAV hTH能使TH基因精确地在特定部位有效表达 。