锔瓷的修复和再造——蔡雪辉紫砂器锔瓷修复作品赏析

“没有金刚钻,别揽瓷器活”说的是古老的民间手工艺——锔瓷。锔瓷指的是对磕、残、裂、碎的陶瓷器,以金、银、铜、铁等材料为“钉子”,在陶瓷器上打孔,嵌入锔钉,固定裂损部位。如今,锔瓷修复陶瓷的内容宽泛了很多,用锡填补和再造残缺,用金银铜片包残损或者磨损部位,也通过对金属材料进行图案造型錾刻装饰缺损部分。现代锔瓷除了复原器物的功用,已经越来越成为对残器进行美化的技术。锔瓷技艺对中华民族传统民间手工艺的传承、中国瓷文化的发展以及日用器、古玩古旧瓷器的修复具有重要的意义。

猪繁殖与呼吸综合征病毒的持续感染和传播特点及防控出路

1PRRS简述。1987年,美国首次暴发猪繁殖与呼吸综合征(PRRS),随后在世界各国陆续暴发该病,截至目前PRRS已遍布世界主要的养猪业国家,成为各国养猪业最为严重的疫病之一,每年给全球养猪业造成数十亿甚至上百亿美元的经济损失。

2016~2021年我国猪伪狂犬病病毒的分子流行病学调查与分析

为探究近几年猪伪狂犬病病毒(PRV)在我国的流行情况及遗传演化特征,本研究对2016年~2021年采自全国17个省、市和自治区的2299份临床样品经PCR检测,并利用PCR扩增阳性样品中的PRV gB、gE和gC基因并测序,采用MegAlign分析三者与GenBank登录的PRV参考株相应基因序列的同源性;利用MEGA 7.0分别构建上述3个基因的遗传进化树,并采用MegAlign分析gB、gE和gC蛋白氨基酸序列的差异,分析其遗传演化及分子特征的变化。结果显示,共扩增出24份PRV阳性样品,阳性率约1.04%,且不同年份及不同地区均有PRV的检出。PRV gB、gE和gC基因序列的同源性及遗传进化分析结果显示,3个基因及其编码氨基酸序列均与2011年以来的PRV变异株同源性最高,且均属于基因Ⅱ型PRV变异株;氨基酸序列比对结果显示,与基因Ⅰ型PRV相比,所测PRV gB、gE和gC中均存在特征性氨基酸突变位点:gB氨基酸序列aa75~aa77连续缺失3个氨基酸(SPG),aa93~aa94连续插入2个氨基酸(DG);gE氨基酸序列在aa48和aa496各插入1个氨基酸(D);gC氨基酸序列在aa63~aa69连续插入7个氨基酸AAASTPA。此外,本研究通过比对国内外经典株以及2011年以来国内PRV gE蛋白的氨基酸序列,确定了不同亚型PRV(即指基因Ⅱ型PRV变异株和经典株)的分子特征即基因Ⅱ型PRV变异株:gE aa496为“D+”或aa496为“D-”+aa448“I”;基因Ⅱ型PRV经典株:gE为aa496“D-”+aa448“V/A”。上述结果表明,我国现阶段仍以基因Ⅱ型PRV变异株的流行为主,进一步明确了不同基因型和亚型PRV的分子特征,对了解我国PRV的流行现状及当前流行株的分子特征具有重要意义,为PRV诊断试剂的研发及PR的防控提供了参考。

中国新发L1A PRRSV变异株的出现与流行状况分析

2017年我国首次发现类NADC34 PRRSV,该类病毒属于L1A(Sublineage1.5)亚型。近年来,新发类NADC34 PRRSV在我国不断变异,已经成为危害我国养猪业重要的PRRSV亚型。为了确定新发类NADC34 PRRSV的流行特征,本研究从2021年~2023年37份新发类NADC34 PRRSV阳性病料样品中选择4份样品经PCR分段扩增PRRSV全基因组序列并测序,利用SeqMan软件拼接,获得了4株完整的PRRSV全基因组序列,相应的病毒分别命名为TZJ2165、TZJ2451、TZJ2756、WK621株。下载GenBank中所有中国类NADC34 PRRSV和美国L1C变异株的ORF5基因及NSP2基因序列,利用MEGA7.0构建上述PRRSV ORF5基因序列的遗传进化树,分析其遗传变异情况。利用Megalign软件分析各分支内ORF5基因序列的相似性,以及新发类NADC34 PRRSV NSP2氨基酸序列,分析其是否存在一致的氨基酸缺失特征。根据PRRSV ORF5基因的限制性片段多态性(RFLP)分类方法,对新发类NADC34 PRRSV的ORF5基因序列分类。利用Simplot软件分析新发类NADC34 PRRSV和L1C变异株全基因组序列中的重组事件。基于ORF5基因进化树结果显示,这4株新发类NADC34 PRRSV与之前分离的TZJ2007、BJ-20-06等12株PRRSV均属于L1A亚型,与早期类NADC34 PRRSV相比,这些病毒株形成了一个独立分支,将其命名为L1A变异株,且其ORF5基因序列的相似性≥93%。NSP2氨基酸序列比对分析发现,L1A变异株具有一致的131个氨基酸不连续缺失的分子特征。ORF5基因的RFLP模式分析结果显示,L1A变异株RFLP模式分为1-4-2、1-4-4、1-5-4、1-7-4和1-6-4,模式并不一致。重组分析结果显示,L1A变异株存在相似的重组模式,它们均是以NADC30株(类NADC30 PRRSV)为主要亲本,JXA1株(类HP-PRRSV)提供部分非结构蛋白基因区域、IA/2014/NADC34株(类NADC34 PRRSV)提供ORF2a~ORF6区域的重组病毒。目前L1A变异株已经在黑龙江、内蒙古、辽宁、北京、广西、江苏、四川、福建、山东、广东和山西等11个省份检出。通过与美国L1C变异株比较,发现二者流行特征有诸多相似性,鉴于L1C变异株对美国养猪业造成严重影响,加大对L1A变异株的监测力度至关重要。本研究聚焦新发类NADC34 PRRSV的流行及变化特征,对了解我国PRRSV流行现状以及对PRRS的防控均具有重要的指导意义。

猪繁殖与呼吸综合征病毒凝胶层析纯化方法的建立与初步应用

为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRSV。结果显示,与氯化铯密度梯度离心相比,凝胶层析纯化可以得到纯度更高、结构更完整的病毒粒子。将凝胶层析纯化得到的PRRSV免疫小鼠制备多抗,间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,多抗血清可与PRRSV发生特异性反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,抗体效价可达到1∶25600以上,纯化的病毒具有良好的免疫原性。结果表明,应用凝胶层析技术可得到高纯度、结构完整的PRRSV粒子,且纯化后PRRSV能够诱导良好的免疫应答,本试验结果可为PRRSV的纯化提供参考。

NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路参与化脓隐秘杆菌感染小鼠肝脏炎症反应的研究

为探究化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)在肝脏中诱导炎症小体活化的机制,本研究以2×106 cfu/只腹腔注射化脓隐秘杆菌的小鼠为感染模型,分别于感染后不同时间采集小鼠肝脏组织,分别提取肝细胞RNA和蛋白质,将RNA反转录成cDNA作为模板,利用荧光定量PCR检测小鼠肝脏组织中NLRP-3、ASC、IL-18、IL-1β和TNF-αm RNA的转录水平,同时通过western blot检测小鼠肝细胞中炎症小体信号通路蛋白NLRP-3、AIM2、ASC、Caspase-1、NLRP-1和细胞焦亡信号通路相关蛋白GSDMD-C、IL-18和IL-1β的表达。结果显示,与对照组相比,感染化脓隐秘杆菌后1 d、2 d和7 d的小鼠肝组织内炎症小体信号通路蛋白基因及促炎细胞因子基因的转录水平均显著升高(P<0.05);western blot检测感染后1 d、2 d、4 d和7 d的小鼠肝细胞蛋白,结果显示,与对照组相比,小鼠肝细胞内除NLRP-1的表达无差异外,其他炎症小体信号通路相关蛋白及促炎细胞因子表达量均显著或极显著升高(P<0.05,P<0.01)。上述结果证实化脓隐秘杆菌可诱导肝细胞中NLRP-3/ASC和AIM2/ASC炎症小体复合物的激活,继而促进Caspase-1的成熟与GSDMD的切割,引起肝细胞焦亡,导致大量促炎细胞因子释放。本研究进一步通过western blot检测化脓隐秘杆菌感染后1 d、2 d、4 d和7 d的小鼠肝细胞中NF-κB信号通路中p65和磷酸化p65蛋白(p-p65)的表达水平,结果显示,与对照组相比,p-p65蛋白的表达量显著升高(P<0.05),表明NF-κB信号通路被激活。同时,本研究也对化脓隐秘杆菌感染小鼠后1 d、2 d、4 d和7 d采集的肝脏组织进行病理学观察,结果显示,与对照组织相比,肝细胞均发生变性及坏死。本研究证实在化脓隐秘杆菌感染的小鼠肝细胞内炎症小体和NF-κB信号通路参与了感染期间的炎症反应,为化脓隐秘杆菌引起肝脏炎症反应发生的机制研究提供参考依据。

猪繁殖与呼吸综合征病毒国内分离毒株GP3、GP5和N蛋白抗原性分析

本研究利用抗美洲型病毒株的GP3、GP5和N蛋白的11株单克隆抗体,对国内分离毒株的GP3、GP5和N蛋白的抗原表位进行鉴别,并同国外参考毒株VR_2332、NVSL(美洲型,B型)、Lelystad(欧洲型,A型)及商品化疫苗毒的抗原多样性进行了比较与分析。通过对免疫过氧化物酶单层试验改进,建立了免疫荧光单层试验(IFMA),并采用该方法对国内分离毒株的GP3、GP5和N蛋白的抗原特性进行了鉴定,研究结果发现国内分离毒株和北美洲型VR_2332株的抗原性比较相近,而与欧洲型LV株的GP3、GP5的抗原性差异较大。根据N蛋白的单克隆抗体(ISU15A_E)与国内分离毒株的反应谱,按照美国L.Yang等[3]分类方法,本试验中的国内分离毒株均属于I组。

禽白血病／肉瘤病毒群特异性抗原P_（27）^（gag）的分离和纯化

本试验用差束离心和非线性蔗糖密度梯度离心法从感染雏鸡血浆中分离和提纯了禽成髓细胞性白血病病毒（ＡＭＶ）。并以ＳＤＳ法裂解病毒，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析ＡＭＶ结构蛋白成分，最后选用（ＬＫＢ）水平板式电泳系统，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ比较大量地分离提纯了Ｐｇａｇ２７。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和琼脂扩散试验检验其抗原活性，并且用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其分子量和纯度。结果表明，提纯的病毒蛋白具有抗原活性，且达到电泳纯。

大智移云时代高校财务工作的挑战与创新

大智移云时代,高校财务工作面临着巨大的困境与挑战。高校财务管理工作应予实现向管理会计职能的转变,财务运行的流程化、信息化与智能化将会成为高等院校财务工作未来发展的必由之路。基于"互联网+"、大数据、云计算等智能科技理念,高校有必要以财务部门为核心,实现与后勤、学务以及科研等各个部门的数据共享,参与全局性的动态实时财务预测、分析、决策与管理。基于大智移云时代特征,分析高校财务工作的困境,探索高校财务工作的优化策略,阐释高校财务信息化创新的相关案例,旨在为高校财务运行的实践提供理论性建议。

基于契约视角的企业内部控制问题探析

内部控制是企业管理的关键问题之一,内部控制质量直接关系到企业的成长与发展。基于契约理论的视角,通过分析发现,当前我国企业内部控制存在内部控制制度不完善和设计不合理、内部控制监督机制不健全和执行力度不强、企业管理层对内部控制的认识存在偏差和内部控制风险意识淡薄、市场对内部控制信息的接受力不强和外来监督机制不健全等问题,在此基础上分别从企业角度和政府角度提出了优化企业内部控制的建设性策略。