外泌体治疗小鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化的时效性和量效性研究

目的探索不同剂量的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchyml stem cell,BMSCs)来源的外泌体对腹膜透析腹膜纤维化的治疗效果,寻找BMSCs外泌体最佳治疗剂量和时机。方法建立高糖腹膜透析液诱导的腹膜纤维化小鼠模型,分为正常对照组、外泌体组、腹膜纤维化组和腹膜纤维化+外泌体组。外泌体组分别于6个时间点予以外泌体干预,并通过4个不同外泌体剂量来确定最佳治疗剂量及时机。结果高糖腹膜透析液诱导的腹膜纤维化模型小鼠从28d开始出现腹膜纤维化病理改变,并随模型建立时间的延长而加重,提示BMSCs外泌体治疗的干预时机可能是28d。在28d予以4个不同剂量的外泌体治疗,50μg/kg组和100μg/kg组与腹膜纤维化组相比腹膜厚度、纤维化标志物(Collagen-I)表达无显著性差异(t=0.540、1.031,P=0.705、0.360),但200μg/kg组和400μg/kg组与腹膜纤维化组相比腹膜纤维化显著改善(t=5.071、5.226,P=0.005、0.005),而200μg/kg组与400μg/kg相比无显著性差异(t=1.540,P=0.280)。结果提示外泌体治疗的最佳剂量为200μg/kg。进一步探索外泌体治疗时机,发现28d、35d分别进行外泌体干预均能明显减轻腹膜增厚(t=4.608、4.608,P=0.007、0.007),并且28d联合35d外泌体治疗相比单次治疗(28d,35d)减轻腹膜增厚效果更佳(t=5.730、5.730,P=0.003、0.003)。结果提示外泌体治疗小鼠腹膜纤维化在28d联合35d的治疗效果最佳。结论本研究发现BMSCs外泌体治疗小鼠腹膜纤维化的最佳时机为28d和35d,且最佳剂量为200μg/kg。

腹膜透析患者定期规律回院随访对透析质量的影响

目的:探讨腹膜透析患者定期规律回院随访对透析质量的影响。方法:回顾性分析行腹膜透析治疗的233例患者,按随访时间间隔分为A组90例和B组143例,A组随访时间间隔≤3个月,B组随访时间间隔>3个月,比较两组透析质量。结果:A组大多为透龄较短、居住地为主城内、文化程度较高且费用类别为医保,与B组比较差异有统计学意义(P<0.05);到研究终点,A组血红蛋白、人血白蛋白、前白蛋白、血磷、全段甲状旁腺激素及生活质量各方面明显优于B组(P<0.05)。结论:坚持定期规律回院随访对提高患者透析质量、改善生存质量、延长生存寿命具有重要意义。

肠道感染导致腹膜透析相关性腹膜炎的相关因素分析

目的：探讨肠道感染导致维持性腹膜透析患者发生腹膜炎的发病诱因、营养状况、致病菌及其转归,为保护腹膜、制定有效防治措施及降低腹膜炎发生率提供临床依据。方法：回顾性分析我院肾脏内科腹膜透析中心2011年1月~2014年12月收治的306例患者,对其并发肠道感染发生腹膜炎的24例43例次患者的相关因素进行分析总结。结果：主要发病诱因：腹泻15例（62.50%）,便秘9例（37.50%）。营养状况：通过对24例患者的血红蛋白、血清白蛋白、血清总蛋白的分析,显示低蛋白血症是导致腹膜炎的一个重要诱因,在我中心尤其当血清白蛋白低于25.73 g/L时更容易发生腹膜炎。主要致病菌：大肠埃希菌32例次（74.42%）,阴沟肠杆菌7例次（16.28%）,鲍曼不动杆菌4例次（9.30%）,其中以大肠埃希菌为主。腹膜炎的转归及预后：首次治愈10例（41.67%）,复发14例（58.33%）,其中复发3次4例,复发2次8例;复发后导致拔管1例,死亡1例,再治愈率41.6%。结论：腹腔的防御功能随透析时间的延长而减退,肠道感染时细菌由肠壁或淋巴途径进入腹腔,并且腹膜透析液是细菌的良好培养基,因此肠道感染是导致腹膜炎的一个危险因素,本中心复发率高达58.33%,首次治愈率较低为41.67%,然而血清白蛋白低于25.73 g/L时更容易诱发腹膜炎,因此应以预防为主,重视腹膜透析患者便秘及腹泻情况,加强患者营养治疗,提前干预、及早处理,对患者积极进行教育,减少肠道感染导致腹膜炎发生,提高腹膜透析患者的生活质量。

居家腹膜透析患者操作环境管理的效果评价

目的探讨居家腹膜透析患者操作环境管理对降低腹膜炎发生的效果。方法将361例居家腹膜透析患者按入组时间先后分为对照组164例和改进组197例,对照组给予常规护理和随访,改进组在此基础上采用自制居家腹膜透析环境评估表进行评估,并针对评估结果予以操作环境管理。结果干预1年内,改进组腹膜炎发生率显著低于对照组(P <0. 05),与腹膜炎有关的拔管率和病死率相对低于对照组,但差异无统计学意义(均P> 0. 05)。改进组腹膜炎患者各项环境评分显著高于非腹膜炎(均P <0. 01)。结论对居家腹膜透析患者进行操作环境管理,能有效减少腹膜炎的发生。

骨髓间充质干细胞外泌体治疗改善高糖腹透液引起的小鼠腹膜纤维化

目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchyml stem cell,BMSCs)来源的外泌体在高糖腹透液诱导的小鼠腹膜纤维化中的作用。方法选取32只6~8周龄的C57bl/6雄鼠,随机分为为4组(n=8):正常对照组、生理盐水组、4.25%腹膜透析液组、4.25%腹膜透析液+外泌体组。建立高糖腹透液诱导的腹膜纤维化小鼠模型,42 d后处死小鼠并收集标本。通过改良腹膜平衡实验(peritoneal balance test,PET)检测小鼠腹膜功能;免疫组化法检测小鼠腹膜纤维化标志物的表达;实时定量PCR法检测小鼠腹膜纤维化因子mRNA的表达;ELISA法检测小鼠促纤维化因子的表达。结果4.25%腹膜透析液组与对照组小鼠比较,腹膜间皮下区域厚度明显增加(P<0.01);4.25%腹膜透析液组腹膜纤维化标志物(α-SMA、Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ)表达显著增强,而4.25%腹膜透析液+外泌体组的腹膜纤维化标志物表达显著低于4.25%腹膜透析液组(P<0.01)。4.25%腹膜透析液+外泌体组小鼠相较4.25%腹膜透析液组的超滤功能显著改善(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与4.25%腹膜透析液组比较,4.25%腹膜透析液+外泌体组腹膜促纤维化因子TGF-β1(转化生长因子-β1)水平明显降低(P<0.05)。结论BMSCs来源的外泌体可有效减轻高糖腹透液诱导的小鼠腹膜纤维化。BMSCs来源的外泌体治疗可能成为抑制腹膜纤维化的新方法。

干细胞外泌体减轻高糖腹膜透析液诱导的腹膜炎症

目的探讨间充质干细胞外泌体是否可减轻高糖腹膜透析液诱导的腹膜炎。方法选取雄性6~8周龄C57BL/6小鼠24只,体重20~25 g,随机分成4组:正常对照组、生理盐水组、4.25%含糖腹透液组、4.25%含糖腹透液+外泌体组。正常对照组不采取任何干预措施;生理盐水组每次腹腔内注射0.9%生理盐水0.1 ml/g;4.25%含糖腹透液组每次腹腔注射4.25%含糖腹透液0.1 ml/g;4.25%含糖腹透液+外泌体组每次腹腔注射4.25%含糖腹透液0.1 ml/g,并在第28天和35天腹腔注射外泌体200μg/kg。以上各组小鼠腹腔注射0.9%生理盐水或4.25%含糖腹透液每日2次,连续6周。6周后,评估小鼠腹膜转运及超滤功能;取壁层腹膜行PAS染色,评估腹膜增厚程度;免疫组化检测MPO、巨噬细胞标志F4/80、CD68,评估炎症细胞浸润情况;实时定量RT-PCR检测IL-6、IL-1β、TNF-α,评估炎症因子表达水平;免疫组化检测GSL-1,评估微血管及毛细血管新生程度。结果4.25%含糖腹透液组腹膜厚度显著高于正常对照组和生理盐水组(P<0.01)。与4.25%含糖腹透液组相比,4.25%含糖腹透液+外泌体组的腹膜增厚程度、腹膜间皮中性粒细胞和巨噬细胞数量、腹膜间皮新生血管数量、以及腹膜炎症因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)的mRNA表达水平均明显下降(P<0.05)。与正常对照组、生理盐水组、4.25%含糖腹透液+外泌体组相比,4.25%含糖腹透液组小鼠的腹膜功能表现为葡萄糖平衡作用快、尿素氮清除力强,但超滤功能显著下降(P<0.05)。结论干细胞外泌体可有效减轻高糖腹膜透析液诱导的腹膜炎症水平,改善腹膜超滤功能。