中药肠吉安对肠易激综合征内脏高敏感模型大鼠的作用及其机制

目的研究5-羟色胺转运体(SERT)与内脏高敏感的联系,探讨中药复方肠吉安对内脏高敏感大鼠的治疗作用及其机制。方法制备肠易激综合征的内脏高敏感模型,将雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、肠吉安高剂量组及肠吉安低剂量组。在造模第10周开始灌胃给药或生理盐水共10天,干预后通过腹肌回缩反射(AWR)半定量评分测定大鼠内脏敏感性;取脑、肠组织,应用Western BIot及real-time PCR方法检测各组织SERT表达;通过免疫组化方法对各组织5-HT进行半定量分析。结果(1)模型组AWR评分显著高于对照组,肠吉安高、低剂量组治疗后评分降低(P<0.05)。(2)模型组结肠、脑中缝背核SERT的mRNA及蛋白表达较对照组显著降低(P<0.05),肠吉安高、低剂量组结肠SERT蛋白表达较模型组显著增加(P<0.05)。(3)模型组结肠5-HT含量明显高于对照组,肠吉安治疗后含量较模型组显著降低(P<0.05),模型组及肠吉安高、低剂量组中缝背核5-HT含量则显著低于对照组(P<0.05)。结论中药复方肠吉安可以通过改变肠道SERT表达及5-HT含量来改善肠易激综合征的内脏高敏感。

人类真核翻译延长因子1A2在胰腺癌的表达研究

目的 研究人类真核翻译延长因子1A2（EEF1A2）及其表达产物eEF1A2蛋白在人胰腺癌细胞株和组织标本中的表达。方法 收集人胰腺导管腺癌病理标本15例，人正常胰腺组织标本8例。运用RT—PCR、Realtime—PCR、Westernblot以及免疫组化等技术检测人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3、PaTu8988和胰腺癌组织标本中EEF1A2的表达水平。结果 人胰腺腺癌细胞株PaTu8988、SW1990和BxPC3中，EEF1A2 mRNA和eEF1A2蛋白表达水平与正常胰腺组织相比．均明显上调。8例癌旁正常胰腺组织标本中仅1例胰腺导管细胞内eEF1A2呈弱阳性表达，而15例胰腺导管腺癌病理标本中．胰腺导管腺癌细胞内eEF1A2均呈中至强阳性表达，两者比较有显著差异（P〈0．05）。结论 EEF1A2在胰腺癌中呈异常高表达。EEF1A2的致癌机制可能与加速蛋白质翻译速度、抑制凋亡以及改变细胞骨架有关。EEF1A2有可能成为胰腺癌一个有效的诊断标志物和基因治疗靶点。

人类真核翻译延长因子1A2在胰腺癌中抑制凋亡致癌机制研究

目的探讨人类真核翻译延长因子1A2(Homo sapiens eukaryotic translation elongation factor 1 alpha 2,EEF1A2)可能的致癌机制。方法培养人胰腺导管细胞腺癌细胞株BxPC-3;采用EEF1A2 siRNA干扰EEF1A2高表达的胰腺癌细胞株BxPC-3,另设空白对照组和阴性对照组。采用Western印迹检测各组EEF1A2蛋白水平变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率;分别应用流式细胞仪、透射电镜以及末端脱氧核苷酰转移酶原位标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果靶向EEF1A2的序列特异性的siRNA可以高效地抑制BxPC-3细胞EEF1A2基因表达。EEF1A2 siRNA干扰细胞24、48 h后,与阴性对照组相比,实验组细胞的细胞增殖被显著抑制(23.51%比37.67%和11.53%比48.89%,P<0.05),凋亡明显增加[(2.820±0.240)%比(8.505±2.454)%和(2.850±1.117)%比(4.075±1.068)%。P<0.05].TUNEL标记分析和透射电镜均发现典型凋亡特征。结论EEF1A2可能是胰腺癌的一个癌基因。EEF1A2可能通过抑制细胞凋亡途径促进胰腺癌细胞生长。