外周T细胞淋巴瘤患者血清代谢产物与临床特征的相关性分析

目的 观察外周T细胞淋巴瘤患者血清能量代谢产物的变化,从能量代谢角度寻找监测外周T细胞淋巴瘤的血清生物标志物。方法 收集2020年11月至2021年12月在陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心诊治的16例外周T细胞淋巴瘤初诊患者,并招募同期10名健康志愿者作为对照。采用选择性反应/多反应监测技术(selected/multiple reaction monitoring, SRM/MRM)检测其血清中能量相关代谢产物的差异,并结合其临床资料,包括病史、影像学、实验室检查等进行回顾性分析。结果 与健康对照相比,外周T细胞淋巴瘤患者血清中能量代谢相关产物水平表达谱存在差异,其中环磷腺苷、琥珀酸、柠檬酸和顺乌头酸含量显著降低(P<0.05),6-磷酸葡萄糖水平升高(P<0.05),且患者血清中的柠檬酸和琥珀酸水平与疾病危险度分级(低危、中危、高危)和临床分期呈负相关(P<0.05),同时,苹果酸和柠檬酸水平与患者中期疗效评估结果[完全缓解/部分缓解(CR/PR)或疾病稳定(SD)]呈明显负相关(P<0.05)。对于结外NK/T细胞淋巴瘤患者(n=10),与健康对照相比,其血清中环磷腺苷、琥珀酸、柠檬酸、异柠檬酸和顺乌头酸含量亦有显著降低(P<0.05),其中柠檬酸与琥珀酸的水平与结外NK/T细胞淋巴瘤患者的临床分期呈负相关(P<0.05),与中期疗效评估(CD/PR或SD)呈明显相关性(P<0.05);对于血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤患者(n=6),与健康对照相比,其血清中环磷腺苷、柠檬酸和琥珀酸的含量明显降低,而6-磷酸葡萄糖的含量明显升高(P<0.05),其中琥珀酸水平分别与患者临床分期和危险度分级都表现出明显的负相关(P<0.05)。结论 外周T细胞淋巴瘤患者与健康对照人群在血清代谢产物水平上共鉴定出5个差异代谢产物,其中琥珀酸、柠檬酸有希望成为血清生物标志物。

小鼠干扰素-γ基因克隆及其腺病毒载体的构建

目的构建含有小鼠干扰素-γ(mIFN-γ)基因的腺病毒载体,为探索IFN-γ在肝纤维化治疗中的作用研究奠定基础。方法从含有mIFN-γ基因的质粒载体pORF5-mIFN-γ中PCR扩增出mIFN-γ基因片段,双酶切将该基因克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV中,限制性内切酶PmeⅠ线性化pAdTrack-CMV-mIFN-γ,转化含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌株BJ5183细胞,同源重组。卡那霉素及酶切筛选出重组子pAd-mIFN-γ,内切酶PacⅠ线性化重组子,用磷酸钙法转染细胞株AD-293进行包装,收集病毒进行鉴定。结果 PCR后测序获得mIFN-γ基因,全长468 bp,与GenBank中发表的mIFN-γ基因核苷酸序列完全一致。经酶切和PCR证实各中间过程载体均含有目的基因。包装的病毒Ad-mIFN-γ在转染的4～6 d观察到荧光产生,8～11 d荧光逐渐增加,12 d收集病毒液。蛋白酶K裂解重组腺病毒,经PCR和Western blot方法鉴定,证实携带有目的基因mIFN-γ。结论大肠杆菌内同源重组法能有效和较为方便地构建出含有目的基因的腺病毒载体pAd-mIFN-γ,重组子能够在AD-293细胞中进行包装和扩增,病毒包装的成功为进一步研究mIFN-γ基因治疗小鼠肝纤维化提供了一个良好的转导载体。

大剂量化疗联合自体移植治疗复发髓母细胞瘤1例并文献复习

目的:探讨大剂量化疗联合自体移植治疗复发髓母细胞瘤的疗效。方法:报告1例大剂量化疗联合自体移植成功治疗复发髓母细胞瘤的经验,并结合文献复习进行分析。结果:患者使用大剂量化疗联合自体移植,术后35个月,疾病无进展、无复发。结论:大剂量化疗联合自体造血干细胞移植治疗复发髓母细胞瘤疗效优于常规化疗,值得进一步临床应用和推广。

二次移植治疗异基因造血干细胞移植后复发急性髓系白血病5例临床观察

目的探讨第2次异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)治疗异基因造血干细胞移植后复发的急性髓系白血病患者的临床疗效。方法收集本院2012年1月至2019年6月在allo-HSCT后复发的急性髓系白血病患者5例,经再诱导后(达到CR2-MRD阴性3例;CR2-MRD阳性1例,NR 1例)行清髓性预处理第2次异基因造血干细胞移植(allo-HSCT2),回顾性分析其治疗过程及转归,并分析allo-HSCT2前患者的缓解状态、供者选择、预处理方案等对移植相关并发症、复发死亡(recurrence and death,RM)、移植相关死亡率(transplant-related mortality,TRM)及移植疗效的影响。结果随访至2019年6月30日,5例患者均达到完全供者植入,3例患者17个月内无复发,2例患者allo-HSCT2后因复发死亡。1例发生Ⅰ度急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)及肺部重度慢性移植物抗宿主病(chronic graft versus host disease,cGVHD)的患者于allo-HSCT2后20个月因呼吸衰竭死亡,其余4例患者未观察到严重的移植相关并发症。allo-HSCT2前骨髓达到完全缓解且微小残留病(minimal residual disease,MRD)阴性的患者预后较好;行二次allo-HSCT与行一次allo-HSCT相比,未增加患者的TRM;对接受第2次异基因造血干细胞移植的患者而言,单倍体移植的移植物抗白血病(graft versus leukemia,GVL)效应与全相合移植相比没有明显的优势。结论第2次异基因造血干细胞移植是治疗异基因造血干细胞移植后复发的急性髓系白血病患者的有效手段。

EVI1基因阳性的急性髓系白血病患者临床特点及其造血干细胞移植的疗效观察

目的探讨EVI1基因阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者及其造血干细胞移植的临床特点、治疗反应及转归。方法收集我院2016年1月至2020年5月确诊急性髓系白血病伴EVI1基因阳性的7例患者,其中男1例,女6例,中位年龄8(3~49)岁。采用巢式PCR检测患者EVI1基因表达水平,并结合患者骨髓形态学类型、细胞遗传学、分子生物学等资料,观察患者的临床特点及造血干细胞移植疗效。结果EVI1阳性的AML患者的危险度分层均为高危。随访至2020年5月31日,7例患者中2例患者在正规化疗过程中复发。有6例患者行异基因造血干细胞移植,5例患者在移植前骨髓细胞学达到完全缓解(complete remission,CR),1例患者行抢救性移植后达细胞学CR;1例患者经正规化疗过程中出现疾病复发未行移植,于确诊后10个月死亡。到随访截止时间,仅1例患者死亡,余6例接受异基因造血干细胞移植的患者均持续缓解。结论EVI1阳性的AML患者预后不良,易复发,但不影响CR率,形态学以M4和M5更常见,异基因造血干细胞移植可以明显改善患者预后。

通光藤提取物对血液肿瘤细胞株增殖和凋亡的影响

目的探讨通光藤提取物抑制人血液肿瘤细胞株增殖及诱导凋亡的作用。方法采用MTT法检测通光藤提取物,包括不同乙醇洗脱组分及C21甾体皂苷单体化合物,作用不同浓度和时间,对人血液肿瘤Raji、NB4和K562细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测通光藤C21甾体皂苷单体化合物诱导上述细胞凋亡的作用。结果通光藤70%乙醇洗脱物,在较高浓度(100μg/mL和200μg/mL)下对3种人血液肿瘤细胞株Raji、NB4、K562细胞增殖有显著的抑制作用,优于50%和30%乙醇洗脱物(P<0.05)。4个C21甾体皂苷单体化合物tenacissosides B、C、I和marsdenoside K在体外实验中均表现出对Raji、NB4和K562细胞增殖的抑制作用;其中tenacissoside C的作用最强,和其他3种单体化合物相比差异具有统计学意义(P<0.05),其对Raji、NB4、K562细胞的半数抑制浓度分别为64.1μmol/L、70.4μmol/L和105.8μmol/L。98.4μmol/L tenacissoside C对Raji、NB4和K562细胞分别作用24h和48h,均可促进各肿瘤细胞的早期凋亡和晚期凋亡,与对照组比较凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。结论通光藤提取物,包括不同乙醇洗脱组分及C21甾体皂苷单体化合物,对多种人血液肿瘤细胞株体外有抑制细胞增殖和促进细胞凋亡的作用,其中以C21甾体皂苷单体化合物tenacissoside C的抑制作用最明显,对人Burkitt’s淋巴瘤细胞株Raji增殖的抑制作用最强。

脂质体包裹水泡口炎病毒基质蛋白对小鼠淋巴瘤的治疗作用及机制研究

目的探讨采用阳离子脂质体包裹水泡口炎病毒(VSV)基质蛋白(M蛋白)基因重组质粒制备的脂质体质粒DNA复合物(Lip-MP)在实验动物体内的抗淋巴瘤效应及其机制。方法建立C57BL/6小鼠EL4淋巴瘤模型,将60只荷瘤小鼠随机分为5组:脂质体-pcDNA3.1-MP复合物(Lip-MP)组、脂质体-pcDNA3.1空质粒复合物(Lip-pVAX)组、单纯脂质体(Lip)组、阿霉素(ADM)组和生理盐水(NS)组,经尾静脉给药,观察各组小鼠的一般情况、肿瘤生长体积、小鼠生存期,采用CD31染色检测肿瘤组织的微血管密度(MVD)、TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡,Ki-67染色检测细胞增殖。结果 Lip-MP组小鼠与Lip-pVAX组、Lip组、NS组相比,中位生存期延长(P<0.05),与ADM组相比中位生存期差异无统计学意义。从治疗的第6 d开始到观察结束时,Lip-MP组小鼠肿瘤生长更缓慢,体积更小,与Lip-pVAX组、Lip组、NS组相比差异有统计学意义(P<0.05),与ADM组相比差异无统计学意义。肿瘤组织TUNEL、CD31和Ki67染色结果显示,Lip-MP组肿瘤组织凋亡细胞增多,微血管数减少,增殖活性降低,与Lip-pVAX组、Lip组、NS组3个组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论体内研究显示脂质体包裹的水泡口炎病毒M蛋白对小鼠EL4淋巴瘤产生明显抑制作用,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成和抑制肿瘤细胞增殖有关。

异基因造血干细胞移植前后应用地西他滨治疗骨髓增生异常综合征转化的急性髓系白血病——1例治疗经验及文献复习

骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndrome,MDS）转化的急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）完全缓解（CR）率低,约为36%,生存期短,预后差[1]。有研究报道19.2%32.0%的AML患者存在FLT3-ITD突变,其中AML-M3患者的阳性率最高,

小剂量地西他滨治疗异基因造血干细胞移植后早期复发髓系恶性血液病患者的疗效分析

近年来地西他滨(DAC)广泛应用于中高危骨髓增生异常综合征(MDS)及难治性急性髓系白血病(AML)患者的诱导化疗和移植预处理,同时DAC也探索性地应用于防控allo-HSCT后的复发[1],并成为分离移植物抗白血病(GVL)和移植物抗宿主病(GVHD)的治疗策略之一[2-3].基于上述理论,新桥医院血液科从2014年6月开始尝试小剂量DAC用于髓系恶性血液病allo-HSCT后早期复发患者的治疗,本文收集自2014年6月7日至2016年10月17日期间治疗的15例患者,对其临床特征和治疗转归分析总结如下.

新药在原发中枢神经系统淋巴瘤诱导和维持治疗的诊疗体会

原发中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)是一种罕见的结外非霍奇金淋巴瘤,其发病率低、恶性程度高、预后差,目前仍无标准治疗方案。早期的手术治疗并没有改善患者预后,联合化疗一定程度提高了疗效但血液学毒性较大,自体造血干细胞移植巩固治疗可进一步提高疗效。近年来随着对PCNSL分子生物信息学的研究进展,新型靶向药物在PCNSL应用中显示出了良好的前景。本文介绍了我中心接受新型靶向药物治疗的5例PCNSL的诊治经过,并对新药在PCNSL中的应用进行综述。