miR-505通过靶向核因子-κB调控脂多糖诱导的巨噬细胞活性研究

目的:探讨究微小RNA 505(miR-505)通过靶向调控核因子-κB(NF-κB)对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)活性的影响。方法:通过生物信息学方法预测miR-505和NF-κB潜在的结合位点,扩增NF-κB基因的3’端非编码区,同时对结合位点进行突变,将野生型(WT)及突变型(MUT)序列克隆至pSicheck2载体中,进行双荧光素酶报告实验。利用Liposome 3000将miR-505 mimics及inhibitor转染至RAW264.7细胞中,逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot实验检测miR-505、NF-κB的表达。用脂多糖(LPS)及miR-505共处理RAW264.7细胞,采用CCK-8实验检测细胞的活力,ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达。结果:双荧光素酶结果表明miR-505可与NF-κB的3’UTR端结合,且miR-505与NF-κB的表达呈负相关。CCK8结果提示miR-505可抑制LPS对RAW264.7细胞的毒性作用;ELISA结果表明miR-505可抑制LPS作用下炎症因子TNF-α和IL-6的分泌。结论:miR-505可通过靶向作用NF-κB基因以抑制TNF-α和IL-6的分泌,并降低LPS对RAW264.7细胞的损伤。

乙酰肝素酶在重症急性胰腺炎相关肺损伤中的表达及意义

目的探讨乙酰肝素酶(heparananse,HPSE)在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)相关肺损伤中的表达及意义。方法选取2021年5月至2023年5月在本院就诊的SAP患者112例,依据患者是否发生肺损伤分为肺损伤组和无肺损伤组,对比两组临床资料、HPSE mRNA相对表达量,并多因素Logistic回归分析SAP患者发生肺损伤的相关因素,绘制ROC曲线,分析HPSE mRNA对SAP患者肺损伤发生的预测价值。结果112例SAP患者并发肺损伤55例(肺损伤组)、未并发肺损伤57例(无肺损伤组)。两组性别、年龄、BMI、基础疾病、Hb、WBC、AMY比较差异无统计学意义(P>0.05),两组BISAP评分、LDH、IL-6、CRP、Fib、PCT、TNF-α比较差异具有统计学意义(P<0.05)。肺损伤组外周血HPSE mRNA水平高于无肺损伤组(3<0.05)。BISAP评分[OR=2.891,95%CI:1.481~5.644]、HPSE mRNA[OR=3.335,95%CI:1.711~6.513]、Fib[OR=3.285,95%CI:1.524~6.231]、IL-6[OR=1.654,95%CI:1.105~5.254]、CRP[OR=1.884,95%CI:1.112~5.885]、PCT[OR=1.713,95%CI:1.121~5.126]、TNF-α[OR=1.624,95%CI:1.087~6.321]均是影响SAP患者肺损伤的危险因素(P<0.05)。外周血HPSE mRNA联合Fib预测SAP患者肺损伤敏感性为85.51%、特异性79.35%、AUC为0.821(95%CI:0.754~0.903)高于单一检测。结论外周血HPSE、Fib均与SAP相关肺损伤有关,且外周血HPSE联合Fib对SAP患者发生肺损伤的预测效能高。

复方灵芝口服液对睡眠剥夺大鼠睡眠的影响

目的:探讨复方灵芝口服液对睡眠剥夺大鼠睡眠的影响。方法:利用腹腔注射氯苯丙氨酸(PCPA)制造睡眠剥夺模型,参照《保健食品检验与评价技术规范实施手册》(2003版)中的标准检测复方灵芝口服液是否具有改善睡眠的作用。结果:复方灵芝口服液可延长戊巴比妥钠诱导的睡眠时间(P<0.05),但对增加睡眠剥夺大鼠的入睡动物数和缩短巴比妥钠诱导的潜伏期无明显作用(P>0.05),且无直接睡眠作用。结论:复方灵芝口服液可明显延长戊巴比妥钠诱导的睡眠时间。

复方灵芝口服液对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响及机制

目的探讨复方灵芝口服液对睡眠剥夺大鼠学习记忆的影响及机制。方法雌性SD大鼠50只,随机分为5组(n=10):正常对照组(C组)、睡眠剥夺模型组(M组)、复方灵芝口服液低(0.15 g/kg,GL组)、中(0.75 g/kg,GM组)、高剂量(1.5 g/kg,GH组)干预组。腹腔注射氯苯丙氨酸(PCPA)制造睡眠剥夺模型,Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,比色法检测血清MDA含量及SOD活力,Western Blot法检测大鼠脑组织海马区p-p38MAPK蛋白的表达。结果根据行为学观察确定大鼠睡眠剥夺模型的成功。Morris水迷宫实验中,M组大鼠穿越平台的次数较正常对照组明显减少(P<0.05),而GH组寻找平台的潜伏期较M组明显缩短(P<0.05)。血清SOD活力和MDA含量的检测结果显示,与C组相比,M组大鼠血清SOD活力明显减少(P<0.05)、MDA含量明显增加(P<0.05);与M组相比,复方灵芝口服液各剂量组血清SOD活力均明显增加(P<0.05),而MDA含量均明显减少(P<0.05)。脑组织海马区p-p38MAPK蛋白表达检测结果表明,M组较C组明显增加(P<0.05),而复方灵芝口服液各剂量组p-p38MAPK蛋白的表达比M组均明显减少(P<0.05)。结论复方灵芝口服液可改善睡眠剥夺大鼠的学习记忆功能,其机制可能与减弱氧化应激和抑制P38MAPK信号通路有关。