基于Hg^2＋诱导DNA双链形成的荧光增强法检测Hg^2＋

基于Hg2+与胸腺嘧啶(T)形成"T-Hg2+-T"结构的原理建立了一种简单、灵敏的荧光增强法检测Hg2+的方法。两条部分互补的富含T碱基的ssDNA在常温下分别以单链状态存在。当加入Hg2+,由于T-Hg2+-T键的形成,两条ssDNA形成DNA双螺旋结构,溶液中荧光分子溴化乙锭(EB)嵌入DNA双螺旋结构,EB荧光强度增强。考察了DNA序列及DNA与EB浓度比等因素对检测灵敏度的影响。在优化的条件下,EB荧光强度和Hg2+浓度在1.0×10-8～9.0×10-7 mol/L范围内呈线性关系,检出限为3.0 nmol/L。Ca2+,Mg2+等常见阳离子对Hg2+的检测不产生干扰,方法具有良好的选择性。

镊子型dsDNA稳定的纳米金光度法快速检测Hg^(2+)的研究

利用Hg2+对胸腺嘧啶(T)T-T错配的特异性结合,建立了一种利用盐诱导金纳米粒子聚集的比色定量检测Hg2+离子的方法。设计了一种镊子型dsDNA,其一半为互补碱基形成的双螺旋结构,另一半为T-T错配。错配部分保持单链状态吸附在纳米金表面,使纳米金的稳定性增强,抑制盐诱导的纳米金团聚。当存在Hg2+时,"T-Hg2+-T"结构的形成导致错配部分形成双链,纳米金去保护在盐诱导下发生团聚。溶液颜色由红变蓝,紫外-可见光谱的最大吸收峰由520 nm红移至620 nm。在优化条件下,吸光度的比值(A620/A520)与Hg2+的浓度在5.0×10-8~5.0×10-7mol/L范围内呈良好线性关系,检出限达3.0×10-8mol/L。研究了Ca2+、Mg2+等常见离子的干扰,结果表明该方法具有良好的选择性。由于镊子型dsDNA的独特结构,使得纳米金的团聚在Hg2+加入后的数秒内发生,1 min内达到平衡,大大加快了分析速度。

基于发卡探针DNA/G-四链体模拟酶结构转化的高灵敏无标记荧光检测DNA

建立了基于目标DNA诱导的发卡探针DNA转化为G-四链体DNA过氧化物模拟酶的非标记荧光增强型DNA检测新体系。发卡探针DNA即分子信标探针由两部分构成,环状部分与目标DNA互补,茎部一端由一条富G序列构成。无目标DNA存在时,分子信标处于闭合状态,形成发卡结构;富G序列由于部分处于杂交状态,无法形成G四链体。当目标DNA与发卡探针DNA杂交并打开发卡结构,富G序列解链并自发折叠成G-四链体结构。G-四链体结构与血红素结合形成DNA模拟酶,催化H2O2还原的同时将无荧光的底物10-乙酰基-3,7-二羟基吩恶嗪（ADHP）氧化成荧光产物。通过测量荧光信号,实现对目标DNA的定量检测。优化后的体系检测条件为p H 8.0,10 mmol/L K＋,0.2μmol/L Hemin,50μmol/L ADHP。在优化的条件下,目标DNA在0.005~1.0 nmol/L浓度范围内与体系荧光信号呈线性关系,检出限为3.0 pmol/L。本方法可以区分完全互补和单碱基错配的目标DNA。

土建施工现场管理优化策略分析

土建工程施工现场管理是项具体而细致的工作，是搞好工程质量、强化建筑结构、美化装饰工程的依据方法，及其优化控制的科学，它融合了施工管理人员、监理人员以及建筑工人的综合素质。加强工程现场管理，不但可以为施工单位节省资金，而且也为提高施工效益，强化工程质量、美化城市环境做出贡献。

荧光小分子2-氨基-5,6,7-三甲基-1,8-萘啶识别dsDNA中胞嘧啶凸出

双链DNA(dsDNA)中单碱基凸出结构(bulge structure)具有重要生物学意义,这种结构也是DNA靶向药物的目标部位之一.荧光小分子2-氨基-5,6,7-三甲基-1,8-萘啶(ATMND)能够通过氢键识别胞嘧啶(cytosine),因而对dsDNA中凸出的胞嘧啶表现出明显的特异性结合.与其余三种凸出的碱基相比,ATMND与凸出部位胞嘧啶的结合伴随着ATMND荧光的明显猝灭,因而可以用于胞嘧啶凸出结构的识别.利用解旋温度测量、荧光、圆二色光谱对ATMND和存在胞嘧啶凸出结构的dsDNA相互作用进行了研究.荧光滴定结果表明ATMND和dsDNA中凸出部位未配对的胞嘧啶的结合常数K11=4.8×105M?1.通过对含胞嘧啶凸出结构的dsDNA与ATMND结合前后的解旋温度曲线进行解析,发现胞嘧啶凸出结构相邻碱基对凸出的胞嘧啶与ATMND的结合有较大的影响.荧光测量结果也表明ATMND荧光的猝灭效率与凸出结构相邻碱基的类型有关,当相邻碱基为鸟嘌呤(guanine,G)时,荧光猝灭效率最高.基于dsDNA中凸出的碱基对ATMND荧光猝灭效率存在明显差异这一现象,设计了探针DNA实现了乳腺癌相关基因(PGR gene rs3740753)中单核苷酸多态性(G/C变异)的荧光分型.