海参肠道中乳酸菌的分离鉴定及活性物质研究

从辽宁大连海域的海参肠道中经初筛和复筛分离得到一株具有广谱抑菌活性的乳酸菌HS-R13。经过16S rDNA序列同源性比对及系统发育树分析,鉴定该菌株为乳酸片球菌属(Pediococcus)。通过抗菌作用的排酸实验、过氧化氢排除实验和蛋白酶敏感实验以及Tricine-SDS-PAGE电泳,初步确定该菌株所产生的抗菌活性物质为多肽类,它对李斯特氏菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌等常见的食品病原菌有明显抑制作用。生物学特性研究表明,该活性物质对在不同的酸碱度及高温条件下,均能保持较高活性,为海洋源细菌素的研究提供了基础。

海洋链霉菌HS-B31发酵条件优化及活性物质分离纯化

以海洋链霉菌HS-B31发酵液所产抑菌物质的活性为评价指标,采用单因素和正交试验对基础发酵培养基和发酵条件进行优化,并利用硅胶柱层析及高效液相色谱对抑菌活性物质进行抑菌活性测定和分离纯化。结果表明,最适培养基为玉米淀粉25 g/L、蛋白胨1 g/L、K2HPO4·3H2O 0.3 g/L、MgSO4·7H2O 0.3 g/L、CaCO30.4 g/L,最适发酵条件为初始发酵液pH 7.2、温度28℃、转速220 r/min、发酵时间7 d。优化后菌株HS-B31发酵产物对副溶血性弧菌抑菌活性提高了25.9%。进一步研究发现该抑菌活性物质具有良好的pH稳定性和热稳定性。经柱层析分离纯化确定粗提物中存在4个组分A1、A2、A3和A4,其中前3个组分显示出明显的抑菌活性。