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快速检测干旱和脱水可诱导植物启动子瞬间表达特性的方法 被引量:3
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作者 萧凤回 段承俐 +2 位作者 翟虎渠 薛刚平 张红生 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期85-91,共7页
选择合适的诱导表达启动子是开展植物耐干旱和脱水等非生物逆境转基因研究的重要环节。我们通过几年的研究,已建立了一套以大麦幼苗完整活体和植物离体叶片为主要材料通过瞬间表达鉴定来快速检测干旱和脱水可诱导基因启动子表达特性的... 选择合适的诱导表达启动子是开展植物耐干旱和脱水等非生物逆境转基因研究的重要环节。我们通过几年的研究,已建立了一套以大麦幼苗完整活体和植物离体叶片为主要材料通过瞬间表达鉴定来快速检测干旱和脱水可诱导基因启动子表达特性的方法。来自大麦和水稻的启动子Dhn4 s、Dhn8 s、HVA1 s、Rab16B j、wsi18 j在大麦、小麦、水稻、高粱和蕨类植物的离体叶片中经干燥诱导可以瞬间表达GFP,在绿豆、番茄叶片中不表达。鉴定了HVA1 s和wsi18 j在大麦不同器官或组织中启动子的定性表达情况。进一步建立了GFP荧光点/GUS染色点计数分析和GUS活性/XYN活性测定分析的启动子表达的定量分析方法,并讨论该方法在环境可诱导植物启动子功能分析中的应用价值和前景。 展开更多
关键词 植物启动子 干旱 脱水 瞬间表达 检测
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大麦脱水可诱导启动子的克隆及其瞬间表达载体的构建
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作者 萧凤回 段承俐 +2 位作者 张红生 翟虎渠 薛刚平 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期1-7,共7页
为进一步研究脱水可诱导启动子的结构和功能,并为开展禾谷类植物转基因研究选择启动子提供依据,用大麦品种撒哈拉幼苗提取的总DNA为模板,利用设计合成的引物对进行PCR定向扩增,获得了HVA1s、Dhn4s和Dhn8s启动子片段。通过分离、纯化、... 为进一步研究脱水可诱导启动子的结构和功能,并为开展禾谷类植物转基因研究选择启动子提供依据,用大麦品种撒哈拉幼苗提取的总DNA为模板,利用设计合成的引物对进行PCR定向扩增,获得了HVA1s、Dhn4s和Dhn8s启动子片段。通过分离、纯化、酶切和连接,把启动子片段分别插入到带有GFP和GUS报告基因的表达载体质粒中。经测序确认,目标启动子片段与原报道的同源启动子序列一致性达95.3%以上。HVA1s、Dhn4s和Dhn8s启动子在构建的瞬间表达载体pHVA1sGFPG、pDhn4sGFPG、Dhn8sGFPG和pHVA1sGUSR、pDhn4sGUSR、pDhn8sGUSR中,都具有启动表达报告基因的能力,通过基因枪转化大麦幼苗可有效启动gfp和gus基因瞬间表达。 展开更多
关键词 大麦 脱水 启动子 序列 表达载体
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Production of bacterial blight resistant lines from somatic hybridization between Oryza sativa L. and Oryza meyeriana L. 被引量:15
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作者 严成其 钱凯先 +5 位作者 薛刚平 吴忠长 陈跃磊 颜秋生 张雪琴 吴平 《Journal of Zhejiang University Science》 CSCD 2004年第10期1199-1205,共7页
Novel bacterial blight (BB) resistance gene(s) for rice was (were) introduced into a cultivated japonica rice variety Oryza sativa (cv. 8411), via somatic hybridization using the wild rice Oryza meyeriana as the donor... Novel bacterial blight (BB) resistance gene(s) for rice was (were) introduced into a cultivated japonica rice variety Oryza sativa (cv. 8411), via somatic hybridization using the wild rice Oryza meyeriana as the donor of the resistance gene(s). Twenty-nine progenies of somatically hybridized plants were obtained. Seven somatically hybridized plants and their parents were used for AFLP (amplified fragment length polymorphism) analysis using 8 primer pairs. Results confirmed that these plants were somatic hybrids containing the characteristic bands of both parents. The morphology of the regenerated rice showed characters of both O.sativa and O.meyeriana. Two somatic hybrids showed highest BB resistance and the other 8 plants showed moderate resistance. The new germplasms with highest resistance have been used in the rice breeding program for the improvement of bacterial blight resistance. 展开更多
关键词 细菌枯萎病 抵抗力 基因 体细胞杂交 水稻 野稻
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