湖羊繁殖性状相关候选基因的RFLP分析

选择与繁殖性状相关的BMPR-IB、BMP15、GDF9、MTNR1A基因作为候选基因,采用PCR-RFLP方法分析这些基因在湖羊中的多态性。结果发现,GDF9基因的FecGH突变和BMP15基因的FecXI、FecXH突变和FecXG(B2)突变没有被检测到,而BMP15基因的FecXB(B4)突变均为杂合型(+B);BMPR-IB基因和MTNR1A基因存在多态,等位基因B频率较高,分别达到0.784和0.676;表明可能与湖羊的繁殖性状存在一定的联系。

绵羊催乳素受体基因外显子10的多态性分析

将催乳素受体(prolactin receptor,PRLR)基因作为绵羊高繁殖力的候选基因,对其外显子10设计2对引物,采用PCR-SSCP技术检测其在常年发情的湖羊及季节性发情的中国美利奴羊、罗米丽羊和罗米丽×中国美利奴(新疆军垦型)中的单核苷酸多态性。结果表明,引物P1、P2的扩增片段均有多态性。与已知序列相比,P1扩增片段的AB型在第53 bp处出现A→G突变、在81 bp处出现G→A突变,BB型在该片段第53 bp处发生A→G的突变;对于P2扩增片段,CC、DD、CE和EF型均在第89 bp处发生C→T的突变,导致氨基酸由脯氨酸变为亮氨酸(Pro→Leu),DD型还在146 bp处出现了C→G的突变,此突变导致氨基酸由丙氨酸变为甘氨酸(Ala→Gly);CE型在该片段第132 bp处发生G→A的突变,未导致氨基酸的改变;EF型还在第132 bp处和第167 bp处分别发生了G→A、C→T突变,第167 bp处的突变导致氨基酸由脯氨酸变为亮氨酸(Pro→Leu)。通过卡方独立性检验结果发现,4种绵羊在P1、P2引物扩增片段上各基因型的构成与品种间有极显著差异(P<0.01),说明PRLR基因对绵羊的繁殖性状有一定的影响。

绵羊褪黑激素受体1a基因第二外显子的多态性分析

采用2种限制性内切核酸酶MnlⅠ和RsaⅠ对常年发情的湖羊以及季节性发情的中国美利奴羊、罗米丽羊、罗米丽(Romilly Hills)×中国美利奴(新疆军垦型)褪黑激素受体1a(MTNR1A)基因外显子2的824bp扩增产物进行PCR-RFLP分析。结果表明:MTNR1A基因外显子2的在605位碱基处表现出MnlⅠ酶切多态性,在604位碱基处表现出RsaⅠ酶切多态性。χ2适合性检验结果表明4种绵羊MTNR1A基因第二外显子在RsaⅠ和MnlⅠ酶切位点上都达到Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);4种绵羊在RsaⅠ和MnlⅠ酶切位点上各基因型的分布通过χ2独立性检验,结果表明差异极显著(P<0.01)。