沉默lncRNA ANRIL对Ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞凋亡相关蛋白的影响

目的:探讨沉默长链非编码RNA(lncRNA)细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B反义RNA(ANRIL对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡相关蛋白的影响。方法:培养HUVECs,设置空白对照(control)组和不同浓度(25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L)Ox-LDL诱导组,用RT-qPCR检测ANRIL的表达量。采用小干扰RNA(siRNA)技术沉默ANRIL基因表达,将siANRIL(ANRIL基因沉默组)和siNC(沉默对照组)转入细胞内,培养24 h,再选择最佳Ox-LDL浓度(100 mg/L)干预24 h进行实验。用RT-qPCR检测转染ANRIL干扰片段后人脐静脉内皮细胞中ANRIL表达情况,Western blot检测BAX和BCL-2的相对表达量。结果:Ox-LDL干预组ANRIL表达量较control组显著增高(P<0.05),且随着Ox-LDL浓度增加,ANRIL的表达越高(P<0.05)。转染ANRIL干扰片段后,与control组相比较,Ox-LDL组、Ox-LDL+siNC组和Ox-LDL+siANRIL组ANRIL的表达水平显著上调(P<0.05);与Ox-LDL组比较、Ox-LDL+siANRIL组ANRIL的表达水平显著下调(P<0.05),Ox-LDL+siNC组ANRIL表达未见明显差异;与Ox-LDL+siNC组相比,Ox-LDL+siANRIL组ANRIL的表达水平显著下降(P<0.05)。与control组相比较,Ox-LDL组、Ox-LDL+siNC组和Ox-LDL+siANRIL组BAX上调,BCL-2下调(P<0.05)。同Ox-LDL组比较,OxLDL+siANRIL组BAX下调,BCL-2上调(P<0.05),Ox-LDL+siNC组BAX和BCL-2表达未见明显差异。与Ox-LDL+siNC组相比,Ox-LDL+siANRIL组BCL-2上调,BAX下调(P<0.05)。结论:Ox-LDL可以上调ANRIL的表达量,使内皮细胞功能障碍,导致动脉粥样硬化的发生。沉默lncRNA ANRIL使BAX下调,BCL-2上调,减轻Ox-LDL诱导的HUVECs凋亡,抑制AS的进程。

冠心病患者环形反义非编码基因表达与冠状动脉血管病变程度的相关性研究

目的观察冠心病患者与对照组体内环形反义非编码基因(circANRIL)表达量差异,并进一步分析circANRIL表达量与冠状动脉血管狭窄程度的相关性,探究circANRIL表达在冠心病发生发展中的临床意义。方法选取2021年2月至2021年11月因胸痛或胸闷入住山西医科大学第二医院心内科的患者共100例。根据冠脉造影结果将患者分为对照组(n=29)及冠心病组(n=71),冠心病组患者根据Gensini评分三分位数等分为轻度狭窄组(≤13分,n=23)、中度狭窄组(14~60分,n=24)、重度狭窄组(≥61,n=24)。应用RT-qPCR法检测入组患者全血circANRIL表达量。结果与对照组相比,冠心病组患者circANRIL表达量明显增加(t=-8.229,P<0.05),circANRIL表达与冠状动脉血管狭窄程度呈显著正相关(r=0.722,P<0.001)。多因素logistic回归示,circANRIL是冠状动脉血管狭窄程度的独立危险因素(P<0.001,β=0.970)。结论冠心病患者circANRIL表达显著高于对照组,在冠心病组中,circANRIL表达量重度狭窄组>中度狭窄组>轻度狭窄组,且circANRIL与冠状动脉血管狭窄程度呈显著正相关。CircANRIL是冠状动脉血管狭窄程度的独立影响因素,与冠状动脉血管狭窄程度有一定相关性。

环状RNA在心血管疾病发病机制中的研究进展

环状RNA(circRNA)是通过将RNA的3′末端连接到5′末端而环化,形成没有聚腺苷酸尾巴的共价闭环结构,具有广泛的分布性,在不同物种及亚细胞间均能发现。目前发现circRNA与心血管疾病、神经系统疾病、癌症等多种疾病的发生与发展密切相关,其作用机制包括充当miRNA海绵、与RNA结合蛋白相互作用、调控基因表达及编码蛋白质。本文从circRNA的生物发生和功能、circRNA在心血管疾病中的研究进展等方面进行综述。

胆固醇酯转移蛋白抑制剂在动脉粥样硬化性心血管疾病治疗中的研究进展

动脉粥样硬化性心血管疾病与多种因素相关,其中血脂异常占有极其重要的地位。胆固醇酯转移蛋白抑制剂是一种以升高高密度脂蛋白胆固醇为目标的调血脂药,可联合他汀类药物在降低低密度脂蛋白胆固醇的基础上升高高密度脂蛋白胆固醇水平,从而降低高危患者心血管不良事件风险。现将胆固醇酯转移蛋白抑制剂的作用机制、研究现状和未来前景等进行综述。

同型半胱氨酸和lncRNA ANRIL对动脉粥样硬化炎症反应的影响

目的研究血清同型半胱氨酸(Hcy)水平与长链非编码RNA(lncRNA)细胞周期依赖激酶抑制剂2B基因的反义非编码基因(ANRIL)的相关性及对动脉粥样硬化炎症,即人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达白介素-10(IL-10)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法体外培养HUVEC,给予不同浓度梯度(空白对照组、0.5、1.0、2.0、5.0 mmol/L)Hcy处理细胞。用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测lncRNA ANRIL表达水平。酶联免疫吸附(ELISA)法检测MCP-1及IL-10含量。用LipoFiter转染试剂分别将shANRIL、shNC转染入不同细胞内。再选取前述实验中最佳Hcy浓度(5.0 mmol/L)干预24 h进行实验。蛋白免疫印迹(Western blot)检测MCP-1及IL-10的蛋白表达水平。结果用不同浓度Hcy干预HUVEC 24 h后,Hcy明显损伤内皮细胞,且Hcy浓度越高,细胞损伤越严重。与空白对照组相比,Hcy干预组lncRNA ANRIL、MCP-1增加,IL-10降低(P<0.05);随着Hcy干预浓度增加,IL-10降低,lncRNA ANRIL、MCP-1升高(均P<0.05)。与空白对照组相比,Hcy组、shNC+Hcy组、shANRIL+Hcy组IL-10蛋白表达量较低、MCP-1蛋白表达量较高(均P<0.05)。与shANRIL+Hcy组相比,Hcy组、shNC+Hcy组IL-10蛋白表达量较低、MCP-1蛋白表达量较高(均P<0.05)。shNC+Hcy组及Hcy组间IL-10蛋白、MCP-1蛋白表达量差异无统计学意义(均P>0.05)。结论Hcy通过促进lncRNA ANRIL表达,使MCP-1表达上调、IL-10表达下调,从而促进细胞炎症反应,参与动脉粥样硬化。