鸡新城疫病毒与传染性支气管炎病毒同胚培养的试验研究

将鸡新城疫病毒（NDV）和鸡传染性支气管炎病毒（IBV）按一定的稀释比例等量混合接种9～10日龄SPF鸡胚,让其在同一鸡胚中增殖（简称同胚培养）。试验结果表明,用5倍稀释的ND-Lasota病毒液与5000倍稀释的IBH120病毒液等体积混合后尿囊腔接种鸡胚,能在同一鸡胚中正常增殖,接种后96 h收毒,用红细胞凝集试验（HA）测得NDV、IBV两种病毒的血凝价分别为11 log2和12 log2,不低于各自病毒单独增殖的HA滴度,病毒的增殖基本趋于平衡。同时也证实了在合适的培养条件下,IBV对NDV的复制不会产生干扰。

缓释复方免疫增强剂对雏鸡免疫功能各项指标影响的研究

将40只14日龄蛋用雏鸡随机分成2组,每组20只,A组为对照组,颈部皮下注射新城疫疫苗0.2ml/只,B组为试验组,在颈部皮下注射新城疫疫苗的同时,每只雏鸡投服缓释复方免疫增强剂1粒(0.25 mg左右),在试验后10、20、30和40d时检测的新城疫HI抗体效价、T淋巴细胞ERFC形成率、外周血T淋巴细胞ANAE阳性率,试验组显著高于对照组(P<0.01),对免疫器官相对重量变化具有明显的促生长作用,对机体的囊体比和脾体比有一定的提高,但差异不显著(P>0.05)。由此可见,研制的缓释复方免疫增强剂的免疫增强效果明显,持续时间长,同时还可促进机体的生长发育,是一种效果好、副作用小的新型免疫增强剂。

红茂草注射液对鸡传染性支气管炎病毒抑制效果的观察

用不同含量的红茂草注射液 ,对鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)的H52 毒株进行稀释 ,在鸡胚尿囊腔中接种传代 ,测试了红茂草注射液对H52 毒株的抑制作用。试验结果显示 ,红茂草注射液能有效的抑制H52 毒株在鸡胚中的增殖 ,其最终有效浓度为 2 5～ 5mg/mL ,而且抑制作用随着红茂草注射液浓度含量的提高而增强 ,同时红茂草注射液对鸡胚的生长、发育无任何不良影响。

中草药复方免疫增强剂对蛋鸡免疫功能的影响

选用14味中草药组成3个配方、9个添加剂量饲喂蛋鸡,测定了鸡的体重、免疫器官重量和淋巴细胞相对数、转化率等试验,筛选出了由8味中药组成的复方免疫增强粉剂配方,其添加剂量为1%。试验组体组重(517.3g)均比对照组(407.3g)提高27.0%(P<0.05);脾重(619mg)比对照组(412mg)提高50.24%(P<0.01);法氏囊重(506mg)比对照组(344.4mg)提高了46.9%(P<0.01);T淋巴细胞、B淋巴细胞相对数高于对照组(P<0.05);35日龄鸡的淋巴细胞转化率83.61%,比对照组提高5.11个百分点,比免疫前提高了15.17个百分点(P<0.01);55日龄鸡的淋巴细胞转化率84.78%,比对照组提高11.33个百分点,比免疫前提高了16.34个百分点(P<0.01)。

单味免疫增强剂对雏鸡免疫功能各项指标的影响研究

将90羽健康蛋雏鸡随机分成9组，每组10羽，其中Ⅰ组为对照组，Ⅱ-Ⅸ为试验组。用中草药黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、生物制荆犊牛胸腺肽、化学合成药左旋味唑、脂质体、维生素E和亚硒政钠8种具有免疫增强作用的药物，配合鸡新城疫（ND—lasota）疫苗注射使用，采用β-微量血凝抑制试验（ND—HI），α-醋酸萘酯酶染色（ANAE）厦试验各组免疫器官相对重量的变化，检测了参试雏鸡的三项免疫指标。结果表明，所选用的药物都不同程度的增强了鸡的免疫功能，并依据其自然特性、免疫增强机理压其特异性。从中筛选出了5种免疫增强剂药物，为下一步筛选高效、经济、实用的复合免疫增强剂的研究提供依据。

用免疫荧光技术检测细胞培养物中兔出血症病毒

用本所实验室制备的兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic diseasevirus,RHDV)高免血清,按常规方法提纯出抗体(IgG),用异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG。在细胞培养时,培养瓶中放入玻片,当细胞长成单层时,按常规方法接种病毒液,培养24、48、96、120h时取出玻片,用荧光抗体染色,在荧光显微镜下观察不同代次的细胞毒。经观察:兔肾上皮细胞(RK)毒培养到36～48h、羊睾丸细胞(ST)毒培养到72～96h时可观察到特异性荧光,随着培养时间的延长,荧光亮度增强,胞浆内充满特异性荧光。用肝组织强毒病料触片,呈特异性荧光,对照细胞培养48h无荧光出现,证实了两株细胞培养物中有大量的兔出血症病毒存在,从而成功的分离培养出了兔出血症病毒细胞毒。

鸡产蛋下降综合症（EDS_（76））灭活疫苗研究──EDS_（76）灭活疫苗的研制和检验

将ＥＤＳ７６－Ｎ株病毒种毒接种于鸭胚尿囊腔，培养增殖４８—１２０小时，收集尿囊液，经福尔马林灭活加吐温－８０为水相，以１５号白油、司本－８０和硬脂酸铝为油相，制出灭活疫苗三批共二十多万羽。对疫苗的安全性和免疫原性等进行了试验，疫苗以双倍和三倍使用剂量注射４—８周龄易感鸡，安全性良好；对２日龄雏鸡接种１个使用剂量进行急性毒性试验观察，对雏鸡没有急性毒性作用，雏鸡生长发育正常。用１个和１／２个使用剂量分别免疫４—８周龄易感鸡，免疫后７天血清中能检测到抗体，１４天和２１天血清中血凝抑制抗体的几何平均滴度（ＧＭＴ）均可达１∶２６２以上；疫苗滴于冷水表面不扩散，４℃存放７个月不破乳。说明我们研制的ＥＤＳ７６油佐剂苗安全无毒，有效稳定。

鸡产蛋下降综合症灭活疫苗研究──EDS_（76）—NE_（4）株病毒的培养与鉴

在对ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒进行血清学鉴定之后，于鸭胚（ＤＥ）、鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）、鸡胚（ＣＥ）、鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚肝细胞（ＣＥＬ）上适应培养。结果表明，ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒，该病毒能在ＤＥ、ＤＥＦ、ＣＥＬ上增殖，在ＤＥ上增殖，尿囊液的血凝价（ＨＡ）可达１∶２０４８０─１∶３２７６８０倍。

黄牛传染性流行性感冒的诊治

黄牛传染性流行性感冒的诊治薛掌林王廷璞（甘肃省畜牧兽医研究所平凉７４４０００）黄牛传染性流行性感冒是由牛流感病毒引起的一种急性接触性传染病，通过呼吸道、空气接触传染。１９９５年８—９月份，我省陇东地区由东向西，相继暴发该病，引起大规模流行，现将该病流...

缓释复方免疫增强剂有效药物释放量及安全性试验

将100只14日龄健康肉杂仔鸡随机分成A、B、C、D、E 5个试验组,每组20只鸡,A、B、C、D 4组为试验组,E组为对照组。A、B、C 3组试验鸡每只分别投服批号为0308、0312、0402的缓释复方免疫增强剂1粒,进行有效药物释放量测定试验,试验结果表明,药物投服后日均磨损量20d前为6.2~6.7 mg,30 d前为6.0~6.3 mg,日均药物有效释放量为2.40~2.52 mg,经方差分析,批间差异不显著（P〉0.05）,均在有效剂量之间,药物的有效释放期均在30 d以上。D组试验鸡每只投服缓释复方免疫增强剂3粒,进行有效药物安全性试验,试验结果表明,仔鸡投服后食、饮欲正常,精神状态良好,与对照组鸡相比未发现任何不良反应,从而说明该缓释制剂在鸡体内是安全有效的。

牛猝死病的调查与防治研究

1995年 3月对平凉地区东五县 ,4 3个乡 (镇 )流行的一种不明原因 ,引起牛只大量急性死亡的疾病进行了流行病学调查、病理解剖学、细菌学检验、肠内容物毒素检验及产气荚膜梭菌A、B、C及D型多价菌苗的诊断性预防注射 ,初步确定该病为产气荚膜梭菌引起的出血性肠毒血症。在发病区免疫注射 2 70 0余头牛 ,接种 3个月后 ,经回访调查凡接种菌苗的牛未曾发病死亡 ,而未注射菌苗牛只继续呈散发性发病死亡 ,初步试验结果表明 。

鸡用缓释复方免疫增强剂的研究

本研究用黄芪多糖(APS)、淫羊藿多糖(EPS)、左旋咪唑、亚硒酸钠(Na2SeO3)、维生素E(VE)等药物混合,加入粘合剂制成鸡用缓释复方免疫增强剂,给鸡投服后日均磨损量6.0～6.3mg、药物有效释放量2.40～2.52mg,鸡体内的有效释放期在40天以上。配合鸡新城疫(ND)-Lasota疫苗免疫雏鸡,免疫后10、20、30和40天用β微量血凝抑制试验(HI)、T淋巴细胞E玫瑰花环形成试验(ERFC)、酸性α-醋酸奈酯酶染色试验(ANAE)、琼脂扩散试验(AGP),检测鸡抗体水平和细胞免疫功能,结果试验组与对照组相比差异极显著(P<0.01)或显著(P<0.05);对免疫器官相对重量变化测定,缓释复方免疫增强剂对雏鸡具有明显的促生长作用,与对照组相比差异显著(P<0.05)。表明研制的鸡用缓释复方免疫增强剂能够增强鸡的体液免疫功能和细胞免疫功能。

用酶联免疫吸附法检测细胞培养物中兔出血症病毒

用本实验室提纯的兔出血症病毒抗体(IgG),采用改良过碘酸钠(NaIO4)交联法,将辣根过氧化物酶(HRP)标记在抗体上,以4×10聚苯乙烯微量酶标板作为载体,用酶联免疫吸附法双抗体夹心法检测了兔肾上皮细胞(RK)培养的RHDV16代、18代细胞毒和羊睾丸细胞(ST)培养的RHDV19代、24代、26代细胞毒,均呈特异性阳性反应,P/N值>2.1,正常细胞培养物标本为阴性结果,P/N值<2.1,试验结果与免疫荧光试验相吻合。

用免疫荧光技术检测细胞培养物中兔出血症病毒

用本实验室制备的兔出血症病毒（rabbit hemorrhagic disease virus，RHDV）高免血清，按常规方法提纯出抗体（IgG），用异硫氰酸荧光素（FITC）标记IgG。在细胞培养时，培养瓶中放入玻片，当细胞长成单层时，按常规方法接种病毒液，培养24、48、96、120h时取出玻片，用荧光抗体染色，在荧光显微镜下观察不同代次的细胞毒。经观察：兔肾上皮细胞（RK）毒培养到36—48h，羊睾丸细胞（ST）毒培养到72—96h时可观察到特异性荧光，随着培养时间的延长，荧光亮度增强，胞浆内充满特异性荧光。用肝组织强毒病料触片，呈特异性荧光，对照细胞培养48h无荧光出现，证实了两株细胞培养物中有大量的兔出血症病毒存在，从而成功的分离培养出了兔出血症病毒细胞毒。

羊传染性脓疱皮炎病毒的细胞培养

在确定内蒙古白音锡勒牧场羊传染性脓疱皮炎的基础上,我们利用犊牛睾丸细胞培养白音锡勒牧场传染性脓疱皮炎病毒(Orf virus)获得成功,现将培养方法介绍如下。

缓释复方免疫增强剂对4种鸡传染病疫苗免疫增强效果研究

为了验证缓释复方免疫增强剂对鸡减蛋综合征(EDS-76)、鸡新城疫(ND)、鸡传染性支气管炎(IB)和鸡传染性法氏囊病(IBD)4种疫苗的免疫增强作用,试验选用30日龄海兰褐蛋鸡80只,随机分为4组,每组又均分为试验组和对照组,分别注射EDS-76、ND、ND-IB和IBD疫苗,同时对试验组雏鸡投服缓释复方免疫增强剂1粒/只,在免疫前、免疫后12、27 d采血测定抗体效价(或阳性率)、T淋巴细胞花环形成率和ANAE阳性率。结果表明,试验组鸡EDS-76、ND、IB抗体效价和IBD抗体阳性率、T淋巴细胞花环形成率和ANAE阳性率均显著或极显著高于对照组。以上结果说明,缓释复方免疫增强剂可以提高EDS-76、ND、ND-IB和IBD4种疫苗抗体效价(或阳性率),增强鸡体液免疫功能和细胞免疫功能。

羊传染性脓疱皮炎病毒弱毒株的培育研究

羊传染性脓疱皮炎(Contagious Pustulaz dermatitis)是羊的一种急性病毒性传染病,在全国养羊区普遍流行,危害严重。1980年开始,我们首先确定了病原,并在犊牛睾丸细胞上培养成功。在此基础上,对毒力强、免疫原性好的HCE毒株通过犊牛睾丸细胞连续继代,毒力出现不同程度的减弱。

黄芪多糖、淫羊藿多糖对鸡新城疫疫苗免疫增强作用的研究

6 0羽 14日龄罗曼雏鸡随机分成三组 ,每组 2 0羽。对照组颈部皮下注射用生理盐水稀释的ND—Lasota弱毒冻干苗 0 2mL/羽 ,试验Ⅰ组颈部皮下注射用 10 %黄芪多糖 (APS)溶液稀释的ND—Lasota弱毒冻干苗 0 2mL/羽 ,试验Ⅱ组颈部皮下注射用 10 %淫羊藿多糖 (EPS)溶液稀释的ND—Lasota弱毒冻干苗 0 2mL/羽。分别于免疫后第 10、2 0、30、4 0天采血测定ND血凝抑制 (HI)抗体。结果表明 ,试验用药鸡血清中HI抗体效价比对照鸡明显提高 ,而且维持时间延长。此外 ,T淋巴细胞ANAE阳性率与HI抗体效价有相应的消长趋势。由此可见 ,黄芪多糖、淫羊藿多糖对鸡新城疫疫苗有明显的免疫增强作用。

羊传染性脓疱皮炎细胞弱毒苗的研究

羊传染性脓疱皮炎是由痘病毒科副痘病毒属的羊传染性脓疱病毒(ORF Virus)引起的。笔者从多株病毒中选育出毒力强、免疫原性好的HCE毒株,于犊牛睾丸细胞上连续继代,诱导变异,使其毒力降低,至85—95代毒力致弱,且免疫原性好,本动物回归5代以上不发病。