肺炎链球菌疫苗的研究进展

肺炎链球菌是引起全球所有年龄组高发病率和病死率的主要病原菌，其疫苗的研制和使用对肺炎链球菌感染的防治具有重要意义。目前临床投入使用的肺炎链球菌疫苗主要有23价荚膜多糖疫苗和7价多糖蛋白结合疫苗，两者都具有一定的效力和良好的安全性，但也存在许多局限性。其他肺炎链球菌多价多糖蛋白结合疫苗、蛋白疫苗、DNA疫苗、联合疫苗等也在研制和开发中。

WBC、CRP和PCT在急诊发热患者诊治中的应用

目的探讨血液白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP)和降钙素原(PCT)检测对发热患者病因诊断的应用。方法选取2014年1～12月入住该院急诊的发热患者123例,检测WBC、CRP和PCT水平,并同时行病因学检查,根据最终诊断结果将所有患者分为细菌感染组和非细菌感染组,行ROC曲线分析,评价WBC、CRP和PCT在急诊发热患者中的鉴别诊断价值。结果细菌感染组患者的WBC、CRP和PCT水平均显著高于非细菌感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。单项检测时,PCT的特异度最高,联用PCT、CRP、WBC三者检测时敏感度、特异度和准确度最高,但是和联用PCT、CRP二者的敏感度、特异度和准确度无明显差异。结论对于感染发热的患者,WBC、CRP和PCT水平升高有助于早期诊断细菌感染。PCT特异性优于CRP和WBC,CRP敏感度优于PCT,联合检测对指导治疗更有积极意义。

免疫荧光法检测阴道加德纳菌的方法学评价

目的 探讨运用免疫荧光法检测阴道加德纳菌（GV）的临床应用价值。方法 选取2015年4~12月进行细菌性阴道炎检测的2 612例患者作为研究对象,每例患者取双份阴道分泌物标本,分为两组,观察组采用免疫荧光法进行检测,对照组采用分离培养法进行检测,分析免疫荧光法检测GV的敏感度、特异度、准确度以及阳性检出率。结果 免疫荧光法检测GV的敏感度为94.31%,特异度为90.75%,准确度为91.20%;分离培养法阳性检出率为34.99%,免疫荧光法阳性检出率为39.01%,两者比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 免疫荧光法检测GV具有灵敏度高、特异性强、阳性检出率高、诊断时间短的优点,适用于临床检测。

中药治疗肠道菌群失调研究分析

目的对中药治疗肠道菌群失调的临床效果进行研究分析。方法 138例肠道菌群失调患者随机分为参照组和实验组,各69例。参照组采用双歧杆菌四联活菌片治疗,实验组在其基础上加用健脾益肠汤治疗,比较两组治疗效果。结果实验组总有效率94.20%明显高于参照组73.91%,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组中,真菌感染2例(2.90%)、杆球比例倒置1例(1.45%)、细菌计数减少2例(2.90%);参照组中,真菌感染15例(21.74%)、杆球比例倒置14例(20.29%)、细菌计数减少17例(24.64%);实验组真菌感染率、杆球比例倒置率以及细菌计数减少率明显低于参照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组双歧杆菌、乳杆菌、肠杆菌以及双歧杆菌与肠杆菌的数量比值(B/E)比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者双歧杆菌、乳杆菌、肠杆菌以及B/E值均明显改善,且实验组双歧杆菌、乳杆菌、肠杆菌以及B/E值均明显优于参照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论健脾益肠汤应用于肠道菌群失调治疗中的效果十分理想,值得大力推广。

广东儿童肥胖基因FTO rs9939609多态性流行病学研究

目的:评估广东学龄儿童FTO rs 9939609基因位点与儿童肥胖关联风险。方法:采用回顾性病例对照研究,纳入290名肥胖儿童,300名正常BMI儿童,体格检查得出儿童的身高、体重、腰围等数据。Taqman荧光探针法测定FTO rs 9939609基因位点多态性,t检验检测连续型变量,logistic回归分析检查FTO rs 9939609基因位点与肥胖发病风险。结果:肥胖组儿童在体重、身高、腰围及BMI等方面与正常组均有显著差异(P<0.001)。logistic回归分析显示,携带AA基因位点的儿童有肥胖的风险是正常组的4.63倍(95%CI=1.29-16.62)。t检验结果显示,等位基因A携带者在体重、BMI、腰围值均比T位点携带者高(P<0.05)。结论FTO rs9939609基因位点多态性显著影响广东地区儿童的肥胖发病风险。

化脓性中耳炎的病原菌分布及其药敏分析

目的了解引起化脓性中耳炎的病原菌及其主要病原菌耐药情况并为临床治疗提供合理的用药指导,方法采用法国生物梅里埃VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定及药敏系统和梅里埃公司ATB真菌鉴定和药敏板条对化脓性中耳炎患者的耳分泌物标本中分离的病原茵进行鉴定和药敏试验。结果共检出病原菌296株,革兰氏阳性球菌l43株,占48.3%;革兰氏阴性杆菌94株,占31.8%;真茵59株,占19.9%。其中前3位分别为金黄色葡萄球菌80株(27.0%)、铜绿假单胞菌57株(19.3%)、凝固酶阴性葡萄球菌55株(18.6%)。细菌对药物的耐药性因菌种不同表现也各异。结论加强对耳分泌物病原茵的动态监测及其抗菌药物耐药情况监测,指导临床合理用药,减缓耐药性的产生。

基于MALDI-TOF-MS和ELISA法对多囊卵巢综合征患者胰岛素抵抗的血清蛋白质组学和细胞因子分析

目的比较多囊卵巢综合征(PCOS)患者发生或不发生胰岛素抵抗(IR)的血清蛋白表达水平差异,确定多囊卵巢综合征发生胰岛素抵抗的潜在血清生物标志物。方法纳入2022年1—12月期间在东莞市中医院诊治的193例PCOS患者,根据胰岛素抵抗稳态模型评估分为胰岛素抵抗组(PCOS-IR,n=95)和非胰岛素抵抗组(PCOS-NIR,n=98),选择同期非PCOS者为健康对照组(n=34)。使用ELISA法测试8个炎症指标:KLF、INF-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-22、TNF-α。基于基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术鉴定PCOS-IR组和PCOS-NIR组之间蛋白表达水平的差异。结果KLF、IL-4、IL-6和TNF-α4个指标,在PCOS-IR组中含量最高,在健康对照组中含量最低,而INF-γ、IL-2、IL-10和IL-22在PCOS-IR组中含量最低,在健康对照组中含量最高。蛋白多肽质谱学分析显示83个离子峰的相对峰强度在组间具有显著性差异(P<0.05),并且PCA及PLS-DA分析能够明显区分开健康对照组和PCOS-IR组,PCOS组与其他两组虽有分离趋势,但会存在重叠。结论该研究发现PCOS患者、PCOS-IR患者、与非PCOS者之间的血清蛋白和多肽成分存在差异,在PCOS-IR诊断或筛查方面具有较好潜力。

溶血素的定点突变及与表面蛋白A的表达

目的利用基因定点突变技术扩增Ply突变基因△Ply,基因重组技术构建△Ply与PspA基因的串联融合表达蛋白PspA-△Ply。方法根据肺炎链球菌TIGR4型表面蛋白A和溶血素基因序列设计引物,定点突变法扩增Ply突变基因,PCR法扩增PspA基因。运用基因重组技术构建pET32a-PspA-△Ply表达载体,双酶切与测序验证重组质粒;重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3),经不同时间、不同温度、不同浓度IPTG诱导表达融合蛋白,Western免疫印迹鉴定表达产物。结果 Ply突变基因测序证实ply基因的△A146R147碱基成功突变,双酶切与测序证实pET32a-PspA-△Ply构建正确,Western免疫印迹见重组质粒转化菌在120×103现特异性条带。结论成功实现Ply基因的定点突变,构建PspA-△Ply融合蛋白表达载体,为研究新型抗肺炎链球菌蛋白疫苗奠定基础。

10—23脱氧核酶抑制铜绿假单胞菌耐药基因VIM2作用的初步研究

目的探讨10-23脱氧核酶（DRz）抑制铜绿假单胞菌耐药基因VIM2的表达及其在逆转铜绿假单胞菌耐药中的作用。方法根据计算机模拟的VIM2 mRNA的二级结构设计合成5条VIM2特异的10-23DRz（DRzl～DRz5），在无细胞反应体系中鉴定10—23DRz对VIM2 mRNA的切割活性后，将其导入铜绿假单胞菌，利用E—test法检测亚胺培南对处理前后铜绿假单胞菌的MIC值。结果DRz3、DRz4和DRz5在无细胞反应体系中可对VIM2 mRNA进行有效切割，且其活性具有高度特异性。与对照相比，10-23DRz可以降低业胺培南对铜绿假译胞菌的MIC值。结论实验中所设计的10-23DRz能在细胞外高效特异性的切割VIM2 mRNA；在细胞内能协同亚胺培南抑制铜绿假单胞菌耐药。

结核分枝杆菌自身淬灭探针荧光定量PCR检测方法的建立

目的利用自身淬灭探针技术建立敏感、特异、快速、价廉且能广泛应用的结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法。方法构建重组质粒PET-32a(+)-16s rRNA作为标准品,自行设计自身淬灭探针,建立、优化定量PCR体系,并进行方法学评价及临床应用。结果所建立方法的线性检测范围为102～109copies/μL,灵敏度为1copy/μL,特异性为100%。高拷贝样品的天间CV为2.65%、批内CV为1.86%,低拷贝样品的天间CV为2.12%、批内CV为0.78%。该方法比培养方法更快速、灵敏。结论以自身淬灭探针技术为平台的结核分枝杆菌荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好,对结核病的早期快速诊断有较高价值。