从高血压肝火亢盛证的应激变化探讨肝主疏泄的生物学基础

目的:通过比较分析应激状态下高血压肝火亢盛证大鼠的宏观表征及微观理化指标的变化,探讨肝主疏泄的生物学基础。方法:模拟现代社会的应激刺激,给予高血压肝火亢盛证大鼠和正常Wistar大鼠相同的应激刺激,动态监测其血压、易激惹程度、行为及血液中Ang-Ⅱ、NE含量变化,进行多个维度的差异性及关联性分析。结果:高血压肝火亢盛证大鼠应激组与无应激组相比,应激组高血压肝火亢盛证大鼠血压升高幅度更大(P<0.05),易激惹程度评分更高(P<0.05),血液中Ang-Ⅱ、NE含量升高(P<0.05),且应激结束2周后各项指标仍然显著高于无应激组高血压肝火亢盛证大鼠(P<0.05),而Wistar应激组与无应激组相比,虽然也各项指标均有升高(P<0.05),但相较高血压肝火亢盛证大鼠较晚出现升高,且应激结束2周后与对照组无统计学意义(P>0.05)。结论:在肝疏泄功能正常的状态下,受到外界应激时,一定程度上机体可作出适应性反应,而高血压肝火亢盛证属肝失疏泄状态,应激刺激下出现应激损伤表现,其机制可能与外周Ang-Ⅱ、NE含量升高有关。

四逆散治疗抑郁症研究进展

本文对四逆散治疗抑郁症的研究进行总结,分四逆散治疗抑郁症的效应及机制研究两部分进行综述。目前的临床及动物实验研究结果均提示四逆散是一种有效、安全的抗抑郁方剂。四逆散可通过多靶点发挥抗抑郁作用,但其机制研究并不深入,且切入点多限于现代医学中公认的与抑郁症发病机制密切相关的生物学指标。对已发现的有效靶点进行深入研究,并从中医理论出发,多角度对四逆散的抗抑郁机制进行研究,是四逆散抗抑郁机制研究取得更多成果的有效途径。

促红细胞生成素抗抑郁作用研究进展

促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)不仅具有促红细胞生成作用,更是一种多组织分布、具有组织保护作用的多功能细胞因子。近年来,越来越多科学家注意到EPO的抗抑郁潜能,并提出可作为新型抗抑郁的选择性药物。该文概括了EPO在抗抑郁效应的基础及实验研究,并阐述了其可能机制及其临床应用前景,旨在对EPO在抑郁症中的研究及应用现状有一个系统认识。

活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜病变的影响研究

目的观察活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜中转化生长因子-β2(TGF-β2)、Smad2及基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、Ⅳ型胶原表达的影响,从TGF-β/Smads信号转导通路调控基质代谢的角度探讨活血解毒方改善糖尿病大鼠视网膜病变的可能作用机制。方法 SPF级雄性SD大鼠12只,大鼠适应性喂养1周后,按照随机数字表法选取8只大鼠以65 mg/kg的剂量一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ),诱导糖尿病模型。剩余4只作为正常组注射等量的柠檬酸钠溶液。1周后尾静脉采血检测血糖,以禁食12 h血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病模型造模成功。将8只糖尿病模型大鼠按照拉丁方设计,分为模型组和活血解毒方组,各4只。活血解毒方组给予活血解毒方7.70 g/kg,1次/d,正常组和模型组予以等体积纯净水,持续16周。采用Real-time PCR法检测大鼠视网膜中TGF-β2mRNA及Smad2 mRNA的表达;Western blotting检测MMP-9、MMP-2蛋白的表达;免疫组织化学法检测Ⅳ型胶原的表达。结果 3组大鼠视网膜中TGF-β2mRNA、Smad2 mRNA表达比较,差异均有统计学意义(F=6.232,P=0.034;F=9.518,P=0.014),其中模型组和活血解毒方组视网膜中TGF-β2mRNA、Smad2 mRNA表达水平均高于正常组;活血解毒方组视网膜中TGF-β2mRNA、Smad2 mRNA表达水平均低于模型组(P<0.05)。3组大鼠视网膜中MMP-9、MMP-2蛋白表达比较,差异均有统计学意义(F=17.387,P=0.001;F=8.593,P=0.008),其中模型组和活血解毒方组视网膜中MMP-9、MMP-2蛋白表达均高于正常组(P<0.05);活血解毒方组视网膜中MMP-9、MMP-2蛋白表达均低于模型组(P<0.05)。正常组大鼠视网膜中Ⅳ型胶原表达低,呈淡棕色;模型组:视网膜Ⅳ型胶原表达升高,呈深棕褐色;活血解毒方组:视网膜Ⅳ型胶原表达呈淡褐色,较模型组表达降低。结论活血解毒方可能通过下调TGF-β2mRNA及Smad2 mRNA的表达,干预TGF-β/Smads信号转导通路调控基质代谢,使MMP-9、MMP-2、Ⅳ型胶原的表达下调,从而改善糖尿病视网膜病变。

基于脑功能核磁的抑郁症肝郁脾虚证大鼠中枢分子生物学基础研究

目的:研究抑郁症肝郁脾虚证大鼠中枢分子生物学基础。方法:慢性不可预知温和应激方法对大鼠进行造模,磁共振功能成像技术扫描大鼠全脑信息,利用SPM8软件计算出抑郁症肝郁脾虚证大鼠与正常组比较在低频震荡(Amplitude of the Low-frequency Fluctuations,ALFF)和局部一致性(Regional Homogeneity,Re Ho)中存在异常的脑区;高效液相色谱法对所探索的密切相关脑区进行单胺类神经递质检测;四逆散方剂反证确定其中枢分子生物学基础。结果:模型大鼠下丘脑Reho与ALFF均减弱,下丘脑DA、5-HT、5-HIAA和NE含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),四逆散组较模型组比较下丘脑5-HT含量显著升高(P<0.05),NE、DA、5-HIAA存在升高趋势,差异有统计学意义(P>0.05)。结论:下丘脑5-HT、5-HIAA、NE、DA是肝郁脾虚型抑郁症的分子生物学基础之一。

葛根芩连汤对2型糖尿病模型大鼠作用的研究

目的探索葛根芩连汤单药及联合西格列汀对2型糖尿病模型大鼠血糖值、胰岛素耐量、葡萄糖耐量的作用,从而初步揭示葛根芩连汤治疗2型糖尿病的生物学机制。方法采用高脂饲料喂养合并链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导建立2型糖尿病模型大鼠58只,予以无菌水(正常组和模型组)、葛根芩连汤(中药组)、西格列汀(西药组)、葛根芩连汤联合西格列汀(中加西组)给药6周的治疗方案,动态监测各组模型动物体重、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG),以及给药前、给药后3周、给药后6周的胰岛素耐量试验和葡萄糖耐量试验。结果给药6周后,与模型组相比,中药组FBG降低(P<0.05),葡萄糖耐量改善(P<0.05);西药组体重降低改善(P<0.05),FBG降低(P<0.05),胰岛素耐量、葡萄糖耐量改善(P<0.05);中加西组体重降低改善(P<0.05),FBG降低明显(P<0.01),胰岛素耐量、葡萄糖耐量均改善明显(P<0.01)。给药各组疗效顺序如下:中加西组>西药组>中药组。结论葛根芩连汤与西格列汀单独使用时,西药组疗效优于中药组,联合使用时其疗效明显优于两药单独使用,表明葛根芩连汤对西格列汀的疗效有一定的辅助作用。

品管圈管理模式提高血液标本采集时间标记率降低血常规和CRP标本周转时间的研究

目的:运用品管圈(QCC)管理模式提高血液标本采集时间标记率,降低血常规和C反应蛋白(CRP)标本周转时间(TAT)。方法:成立检验科携手共进圈,选定“提高有效标本采集时间标记率,降低血常规和CRP标本TAT”为活动主题,绘制柏拉图和鱼骨图分析血液标本采集时间标记率低及血常规和CRP标本TAT平均较长的原因,设定改进目标值,并制定对策实施。结果:血液标本采集时间标记率低的主要原因为护士采血时不方便记录及对该记录意义认识不足,血常规和CRP标本TAT平均较长为标本送检时间集中及现有仪器通量小造成。执行相应改善措施后,有效标本采集时间标记率由15.42%提升至44.31%,血常规和CRP标本TAT中位数由156.58 min降至67.12 min,第90位百分数指标值由322.43 min降至115.83 min。结论:QCC模式能有效提高血液标本采集时间标记率,降低血常规和CRP标本TAT。

肝纤维化大鼠肝气郁结证与肝藏血关系的研究

目的:探讨中医藏象理论"肝藏血主疏泄"相关肝脏病理生理学基础。方法:以四氯化碳皮下注射法建立肝纤维化肝气郁结证大鼠模型,利用血生化检测法及高效液相色谱检测法,研究其血清及脑部主要蛋白标志物的含量变化。结果:在肝纤维化病程之中大鼠的肝纤维化标志物ALT、AST、Ⅳ-C、LV、HA、TGF-b,脑血管轴标志物ANG-Ⅱ、NE,脑肠轴标志物5-HT、CRH-ACTHCORT等均有升高,神经内分泌轴标志物等多种蛋白含量均有发生变化。结论:血清及脑部主要蛋白标志物含量变化与肝藏血主疏泄理论具有相关性。

血细胞分析仪室内质控方案的设定及分析

目的采用合适的方法设定质量控制(简称质控)靶值和控制限,保证血细胞分析仪检测结果的可靠性,减少室内质控假失控的现象。方法在保证仪器准确度和正确度的前提下,该文分别采用了3 d 10点定值法、23 d 30点定值法和时间曲线拟合定值法这3种不同方法设定L-J质控图中心线,并比较其优劣。结果3 d 10点定值法绘制L-J质控图中的白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)结果稳定,而3 d 10点定值法和23 d 30点定值法绘制L-J质控图中的红细胞平均体积(MCV)、血细胞比容(HCT)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)项目出现较多假失控现象,但用时间曲线拟合定值法绘制L-J质控图中的MCV、HCT、MCHC失控现象明显少见。结论3 d 10点质控值均值作为L-J质控图中的WBC、RBC、Hb、PLT、MCH中心线质控结果稳定,而时间曲线拟合定值法可以良好地制订MCV、HCT、MCHC质控图中心线,符合全血细胞分析质控品特性,可以有效避免假失控,能更好地监测仪器稳定性。

肝纤维化大鼠肝气郁结证与肝藏血关系的研究

目的:探讨中医藏象理论"肝藏血主疏泄"相关的肝脏生理病理生物学基础。方法:以四氯化碳皮下注射法建立肝纤维化肝气郁结证大鼠模型,采用肝脏超声检测和功能核磁灌注方法,检测肝气郁结证大鼠动态活体肝纤维化过程中脑部和肝脏血管血流速度、血管直径、血流量变化,同时进行大鼠大脑功能核磁分析。结果:在肝纤维化肝气郁结证病程中,大鼠肝动脉、肝静脉血管管径及血流量明显增加,海马及下丘脑脑区灌流量明显增加,且脑杏仁核异常激活。结论:脑部和肝脏血流变化与肝藏血理论之间具有相关性,肝藏血功能异常与肝脏和脑部血流动力学改变密切相关。

创伤较小的小鼠主动脉弓缩窄术的建立

目的探索一种对小鼠创伤较小的主动脉弓缩窄术的手术方法。方法 32只雄性昆明(KM)小鼠,随机分为假手术10只及模型(主动脉弓缩窄术)组22只;模型组动物麻醉后仰卧位固定,行气管插管接通呼吸机。右侧卧位重新固定,左侧第二肋间开胸,分离主动脉弓并用5-0真丝编织线将其套扎在26G注射器针头行缩窄操作,缩窄后退出针头,关胸。假手术组动物同期行开胸,而不进行缩窄操作,其余操作步骤与模型组相同。造模期间及造模后4周记录动物死亡情况;于术后4周对两组小鼠行心脏超声及心脏病理学检测。结果 1模型组总死亡率约为32%。2超声心动图结果:模型组主动脉弓缩窄处血流速率均大于2 400 mm/s;假手术组主动脉弓缩窄处血流速率均小于900 mm/s。与假手术组比较,模型组左室收缩末期内径(LVSD)、左心室收缩期容积(LVSV)、左心室重量(LV mass,LVM)、左心室重量指数(LV mass index,LVMI)明显增加(P<0.05);射血分数(EF)、左心室缩短分数(FS)显著降低(P<0.05)。3病理切片可见血管扩张及血管壁增厚表现。结论本造模方法能够成功增加心脏后负荷,诱导后负荷增加所致的心肌肥厚病理生理过程。与国内报道较多的劈开胸骨的造模方法相比,该造模方法对模型动物的损伤更小,在与心肌肥厚病理生理机制及相关药效研究中具有很大的应用价值。

慢性应激和利血平拮抗2种抑郁大鼠证候演变规律及其生物学基础

目的从中医证候的角度比较慢性不可预知温和应激(CUMS)和利血平拮抗2种抑郁大鼠模型,描述2种模型的证候演变规律,并初步阐释其分子机制。方法采用CUMS和腹腔注射利血平2种方法建立大鼠抑郁症模型,通过行为学测定、临床症状等效转化为大鼠宏观表征等方法来进行大鼠的证候判别。Elisa法测定血清中去甲肾上腺素(NE)含量,免疫组织化学法测定脑组织海马CA2区5-羟色胺(5-HT)含量。结果 CUMS组大鼠应激2周后出现肝气郁结证,6周后出现肝郁脾虚证;利血平组大鼠注射药物2周后出现脾气虚证,4周后出现肝郁脾虚证。CUMS组大鼠血清NE水平应激4周后升高(P<0.05),应激8周后又降低(P<0.05),而利血平组大鼠血清NE水平持续降低(P<0.05)。CUMS组和利血平组大鼠脑组织5-HT水平明显低于正常组(P<0.05),但CUMS组脑组织5-HT水平与利血平组相比无明显差异(P>0.05)。结论 CUMS抑郁模型证候由肝气郁结证逐渐演变为肝郁脾虚证,利血平拮抗抑郁模型证候由脾气虚证逐渐演变为肝郁脾虚证,这种证候演变差异与5-HT和NE有关。

高血压肝火亢盛证动物模型相关指标的研究

目的：前期研究发现自发性高血压大鼠（SHR）14-18周龄表现为稳定肝火亢盛证,现从宏观表征及行为学,微观理化指标,方剂反证验证,初步研究高血压肝火亢盛证生物学机制。方法：14周龄SHR 55只经证候属性判别,筛选出肝火亢盛证SHR,根据收缩压差异用拉丁方分组法将其分为：模型组、三草降压汤组、四逆散组和硝苯地平组,正常血压大鼠（WKY）为正常组。动态采集大鼠宏观表征、行为学指标和收缩压;酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测大鼠给药4,6周时血清5-羟色胺（5-HT）,血管紧张素Ⅱ（ANGⅡ）,去甲肾上腺素（NE）含量。结果：与正常组相比模型组14-20周龄血压值和易激惹程度升高（P〈0.05）,旋转耐受时间减少,且血清5-HT,ANGⅡ,NE升高。与模型组相比三草降压汤组和硝苯地平组给药4,6周收缩压降低（P〈0.05）,四逆散组收缩压先升高后降低,不稳定;三草降压汤组14-18周龄肝火亢盛证症状包括旋转耐受时间,易激惹程度和宏观表征有较明显的改善,四逆散组改善不明显,三草降压汤组血清5-HT,ANGⅡ,NE降低。结论：14-18周龄是SHR稳定的肝火亢盛证期,5-HT,ANGⅡ,NE升高可作为高血压肝火亢盛证客观指标。

葛根芩连汤对2型糖尿病大鼠表征的影响

目的：考察葛根芩连汤对2型糖尿病模型大鼠宏观表征、肛温、抓力及相关生化指标的影响，从而探索葛根芩连汤治疗2型糖尿病的可能作用机制。方法：采用高脂饲料喂养合并链脲佐菌素（STZ）诱导建立2型糖尿病模型，予以葛根芩连汤9．1g·kg^-1组（GGQLl），18．2g·kg^-1组（GGQL2）不同剂量的治疗方案，采集大鼠宏观表征、肛温、抓力及相关生化指标。结果：给药后，GGQL1组与模型组相比，血糖降低（P〈0．05），给药后1～3周饮食量降低（P〈0．05）；GGQL2组与模型组相比，血糖降低（P〈0．05），给药1周后的饮食量减少，给药后5周抓力值升高（P〈0．05），甘油三酯（TG）值降低（P〈0．05）；GGQL1，GGQL2组大鼠轻响抬头、活动减少、抓取反抗、眼睛黯淡无神、唇少光泽不润、舌少津液、鼻少光泽不润、毛干燥、爪干涩不润等表征均有不用程度改善。结论：葛根芩连汤可维持2型糖尿病大鼠体重，具有降低空腹血糖，减少进食量，增加抓力，降低TG作用，对于倦怠乏力、津液亏虚的症状具有一定改善作用。

肝纤维化肝气郁结证大鼠模型研究与证候时间窗方剂验证

目的为进一步研究肝纤维化相关机制及中医证候,建立中西医病证结合的肝纤维化大鼠模型。方法采用四氯化碳皮下注射法建立的肝纤维化肝气郁结证大鼠模型为研究对象,通过体重、旷场行为学测定、抓力测试、宏观表征采集等方法进行大鼠证候判定,病理进行肝纤维化疾病判定,并使用柴胡疏肝散、逍遥散、四逆散等方剂对证治疗,秋水仙碱对病治疗。结果多数肝纤维化大鼠造模4周后出现肝气郁结证,并且持续至造模12周;病理变化为造模4周多为肝纤维化S2~S3期,造模8周多为S3期,造模12周多为S4期;方剂反证肝气郁结证症状及病理结果有不同程度改善。结论该造模方法建立的肝纤维化肝气郁结证证候时间窗约为4~10周,方剂反证有一定效果,该病证结合模型建立基本成功。

基于五运六气学说的慢性心力衰竭患者发病与出生日期关联性分析(英文)

目的:探讨慢性心力衰竭患者发病、中医证型、证素与出生日期五运六气相同属性因子叠加效应的关联性。方法:收集17家中医院慢性心力衰竭患者相关资料,分析出生日期五运六气因子的分布,采用非参数检验分析患者与总体人群出生日期五运六气相同属性因子叠加分布的差异,采用Logistic回归分析出生日期五运六气因子与证素的关联性。结果:纳入1 013例患者,患者与总体人群出生日期的五运六气相同属性因子叠加分布无显著性差异,Logistic回归显示司天的太阳(ST5)是慢性心力衰竭患者气虚证和阴虚证的危险因素,客气的太阴(KQ2)是血瘀证的危险因素,主气的太阳(ZQ5)是水停证的危险因素。结论:慢性心力衰竭患者出生日期五运六气相同属性因子叠加效应对发病、证素的影响未显示出显著性差异,出生日期五运六气因子对疾病的影响并非如预想的那么重要。