分散液液微萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定环境水中7种新烟碱类农药

建立了巴氏滴管辅助的分散液液微萃取(PTD-DLLME)结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定环境水中7种新烟碱类农药的方法。该方法首次以巴氏滴管作为萃取容器,低密度低毒性的乙腈作为萃取剂,丙酮为分散剂。采用BEH C_(18)(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱分离,0.01%甲酸水溶液(含2 mmol/L甲酸铵)和0.01%甲酸乙腈溶液(含2 mmol/L甲酸铵)为流动相梯度洗脱,电喷雾离子源(ESI)正离子方式扫描,多反应监测(MRM)模式监测,以保留时间和特征离子定性,外标法定量。在最优实验条件下,目标化合物在0.05~100μg/L范围内线性关系良好,相关系数(r2)不低于0.996,检出限(LOD)为0.02~0.1μg/L,定量下限(LOQ)为0.05~0.2μg/L,富集倍数为10倍。在1倍、2倍和10倍LOQ 3个加标水平下,各待测物的回收率为75.3%~116%,日内相对标准偏差(Intra-RSD,n=6)为2.7%~8.2%,日间相对标准偏差(Inter-RSD,n=3)为3.1%~10%,基质效应为-0.18%~6.66%。采用该方法对20批环境水样进行检测,其中1批河水样品中检出吡虫啉与噻虫啉,其浓度低于LOQ。该方法具有便于操作、富集效果好、回收率稳定、绿色环保以及成本低廉的优点,为环境水样中新烟碱类农药的检测提供了一种全新的解决方案。

杯碟法检测乳中的β-内酰胺酶

采用微生物杯碟法对乳中β-内酰胺酶进行检测。基于青霉素抑制藤黄微球菌(Micrococcus luteus)生长并产生抑菌圈,利用舒巴坦特异性抑制β-内酰胺酶活性的特点,通过比较含青霉素样品中加入和未加入舒巴坦所产生的抑菌圈直径差异,间接判断样品中是否含有β-内酰胺酶。结果表明:青霉素G的最佳使用质量浓度为0.5μg/mL,β-内酰胺酶的检测限因生产厂家随标注单位不同而不一致,舒巴坦的最佳使用质量浓度为50μg/mL;在此基础上确立杯碟法检测β-内酰胺酶的优化方案:设立阴阳性样品对照组;并对同一样品进行4个不同添加处理:青霉素G处理,青霉素G、舒巴坦处理,青霉素G、β-内酰胺酶处理,青霉素G、β-内酰胺酶、舒巴坦处理,通过比较4个不同处理产生的抑菌圈直径差异,并同时参照阴阳性样品对照组结果,判定样品中是否存在β-内酰胺酶。

副猪嗜血杆菌aroA基因鉴定及遗传进化分析

【目的】细菌aroA基因参与芳香族氨基酸的生物合成,被成功应用于细菌分类和基因失活致弱突变菌株的构建。副猪嗜血杆菌(Hps)是感染猪出现多发性浆膜炎和关节炎的一种病原细菌,鉴定该菌aroA全基因序列将有助于鉴定遗传进化关系和突变分析。【方法】利用PCR和细菌基因组步移技术鉴定Hps的aroA基因序列,进而对不同血清型菌株该基因序列进行鉴定,并与其它革兰氏阴性细菌进行比对和遗传进化分析。【结果】自Hps血清5型基因组DNA中获得包含完整aroA基因的3.7kb基因片段,其中aroA基因全长1314bp,编码产物长度437aa,分子量大小47.9kDa,该基因上游为磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因。自本试验选择的Hps不同血清型菌株中均可扩增出包含完整aroA基因的1476bp片段,且这些不同血清型菌株间核酸序列同源性在97.7%以上。Hps血清5型aroA基因序列与巴氏杆菌科其它成员核酸序列同源性为70.6%～78.9%,与E.coli和S.typhi-murium的同源性分别为66.4%和67.2%。【结论】本试验首次对Hps的15个血清型国际参考菌株及地方分离株aroA全基因序列进行了鉴定,序列比较结果显示aroA基因在革兰氏阴性细菌中具有较高的同源性。aroA基因鉴定对构建基因失活突变菌株以研究Hps生物学特性奠定了基础。

分子生物学方法鉴定新资源食品中乳杆菌

采用16S rDNA扩增同源性分析、16S rDNA PCR-RFLP技术、种特异性序列扩增技术,对新资源食品中的副干酪乳杆菌Lactobacillus paracasei、鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus、嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus、植物乳杆菌Lactobacillus plantarum进行鉴定分析。结果表明,16S rDNA扩增同源性分析能够有效鉴定嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌,无法区分副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌;16S rDNA PCR-RFLP技术可以有效鉴定嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌;种特异性序列扩增能够有效鉴定副干酪乳杆菌和鼠李糖乳杆菌。结合检验工作需要,运用以上方法可以对食品安全国家标准中生化鉴定法难以确认的乳杆菌进行有效鉴别。

实时荧光聚合酶链式反应技术与国标方法检测致病菌的应用与研究

目的比较实时荧光聚合酶链式反应技术(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)与国标方法在食品致病菌检测中的异同。方法应用RT-PCR法及国标GB 4789系列对采集的60件畜产品、禽产品、水产品和乳及乳制品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌以及副溶血性弧菌同时进行检测。结果除了金黄色葡萄球菌检测结果均为阴性外,其他3种致病菌2种方法都有检出,但RT-PCR方法的阳性率均高于国标方法。对于沙门氏菌,国标方法阳性率为1.67%,RT-PCR方法阳性率3.33%;单核细胞增生李斯特氏菌国标方法阳性率为7.50%,RT-PCR方法阳性率为15.00%;副溶血性弧菌国标方法阳性率为8.33%,RT-PCR方法阳性率为11.67%。结论在本实验条件下,RT-PCR技术的阳性检测结果多于国标GB4789系列,并且结果可完全覆盖国标GB4789。各企业实验室甚至政府主导的食品风险监测项目可根据产品特点,合理应用RT-PCR技术以减少人员工作量,方便产品放行并提高工作效率。

GPS/INS组合导航技术研究

随着GPS和INS技术的发展,组合导航系也逐渐成熟。采用卡尔曼滤波对GPS/INS组合导航系统进行仿真,并将仿真结果和INS仿真结果相比较得出,GPS/INS组合导航系统经过滤波的误差估计精度得到了显著提高,并比INS单一导航有明显优势。

原料乳中三聚氰胺和β-内酰胺酶检测快速筛选法与确证方法比对研究

目的对原料乳中三聚氰胺检测的液质确证方法与快速筛选方法进行比对验证。方法 SNAP双流向酶联免疫法快速检测还原乳中的三聚氰胺。结果其最低检出限达到0.10 mg/kg,还原乳中三聚氰胺浓度与SNAP读数仪读数呈显著正相关(r2=0.986)。同时通过对原料乳中β-内酰胺酶加标试样的比对快速筛选方法与微生物法(杯碟法)完全相符,且二者最低检出限均可达到0.000 25 IU/mL。结论双流向酶联免疫法可以用于原料乳中非法添加的三聚氰胺和β-内酰胺酶的快速筛选,其检测速度和灵敏度均能满足奶户、奶站、乳品厂和部分实验室的快速筛选检测,但是其使用目前还仅限于原料乳或原料乳粉。

井下小型永磁发电机的结构与特性对比研究

井下环境对发电机有一些特殊要求。永磁发电机体积小,能量密度大,适宜于井下运行。该文针对径向磁路和轴向磁路两种结构的永磁发电机进行了研究,通过磁场计算和样机测试,进行了结构和性能方面的对比。该文的工作对井下小型发电机的选用具有一定的指导意义。

食品微生物学能力验证

实验室应用2010版国标4789.2、4789.3、4789.4、4789.10、4789.30,参加了CNAS T 0504的菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及单增李斯特氏菌5项微生物能力验证。结果显示:定量项目菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌的Z值均<2;定性项目沙门氏菌、单增李斯特氏菌均为检出。结果满意,实验室能很好的应用国标4789(2010)系列开展微生物检测。

多靶标微生物能力验证样品的均匀性研究

实验室通过前期大量试验,制备了在一种基质中含多种目标微生物的样本,通过对样本的均匀性分析来判断是否符合能力验证的要求。随机抽取能力验证样本10个,在可重复条件下,采用国标4789.2、4789.3、4789.10(2010版)进行检测。应用单因素方差分析对结果进行统计。结果显示:项目菌落总数、大肠菌群及金黄色葡萄球菌的F值均<F0.05(9,10),表明样品内和样品间无显著性差异,样品是均匀的,可满足能力验证的要求。

贝类中诺如病毒定性检测能力验证结果与分析

为了确认实验室的检测能力,提升实验室对诺如病毒的定性检测水平,增强实验室的竞争力,中国检验检疫科学研究院综合检测中心实验室参加了青岛海关技术中心组织的“贝类中诺如病毒定性检测”能力验证。利用噬菌体MS2作为过程控制病毒,按照GB 4789.42—2016《食品微生物学检验诺如病毒检验》进行试验,实验室2个测试样品的结果与样品指定值完全一致,能力验证结果均为满意。此次能力验证不仅提升了实验室人员的检测水平,还给实验室人员积累了诺如病毒的检测经验。

进出境微生物气溶胶监测检测技术及装备研究进展

国门安全是国家安全的重要组成部分,进出境通道或场所中微生物气溶胶的危害不可小觑。本文介绍了微生物气溶胶的概念、来源、采样及检测鉴定方法,综合分析了已有研究成果,对今后研究方向和发展前景进行了展望,以期为进出境微生物气溶胶的技术研究和实际防控提供参考依据。

微孔板式微生物法检测乳粉中叶酸的质量分数

建立微孔板式微生物法检测乳粉中叶酸的快速方法。筛选不同品牌和型号微孔板,基于微生物法的原理,样品提取液和标准品工作液,在聚苯乙烯材质的96孔微孔板中直接梯度稀释。测定用培养基中加入0.3%的菌悬液,混匀后分配到含有样品和标准品的微孔中,培养22 h后用酶标仪测定吸光度值。结果表明各种规格的聚苯乙烯微孔板均适用本实验。本方法标准曲线相关系数0.9997,叶酸质量浓度在30,60,120μg/100g和240μg/100g添加水平的回收率为96.5%~104%,相对标准偏差在1.60%~4.27%之间,国标GB 5009.211-2014相比,检测结果无显著性差异(P>0.05)。该方法操作简单、培养时间短、结果稳定、准确、通量大,适合检测乳粉中叶酸的含量。

非洲猪瘟病毒核酸定性检测方法比对

为提升兽医实验室非洲猪瘟病毒核酸检测能力和质量控制水平,积累检测经验,以更好地开展非洲猪瘟检测,2020年7月,参加了北京市农业农村局组织的“非洲猪瘟实验室检测能力比对”项目。本次比对同时选用《非洲猪瘟检疫技术规范》(SNT 1559—2010标准)中的普通PCR方法、荧光定量PCR方法以及商品化试剂盒,对5份验证样品开展非洲猪瘟病毒核酸检测和结果比对。比对发现,3种检测方法结果一致,样品检测结果与预期一致,结果满意。此次比对确认了实验室现有检测方法能够满足非洲猪瘟病毒核酸的日常检测需求,同时提升了实验室人员的检测能力,积累了检测经验,可为非洲猪瘟防控提供有力的技术支撑。

GB/T 25165-2010对肉类食品中牛羊猪源性成分检测的适用性研究

为研究国标方法 GB/T 25165-2010《明胶中牛、羊、猪源性成分的定性检测方法实时荧光PCR法》对肉类食品检测的适用性,本文优化其样品前处理方法,验证标准中引物、探针对肉类食品检测的特异性和灵敏度,并通过大量市售样品进一步确认方法的适用性。结果表明,该方法适合检测肉类食品中的牛、绵羊、猪源性成分,不适合山羊源性成分检测。本文旨在为肉类掺假鉴别提供方法依据及技术支撑。

硫化和硒化对Cu/Sn/ZnS预置层薄膜结构和性能的影响

采用磁控溅射法沉积Cu/Sn/ZnS预置层薄膜,经硫化和硒化热处理制备Cu_2ZnSnS_4和Cu_2ZnSnSe_4薄膜,研究两种热处理方式对薄膜的结构、形貌及性能的影响。结果表明:硫化和硒化热处理制备的Cu_2ZnSnS_4和Cu_2ZnSnSe_4薄膜均为单一锌黄锡矿结构;两种薄膜表面及横截面的颗粒致密且均匀,硒化后薄膜的颗粒尺寸和横截面的附着力均优于硫化后的;预置层经硫化及硒化热处理后薄膜的带隙分别为1.58、1.43 e V,硒化后薄膜的带隙明显小于硫化后的。

市政工程深基坑钢板桩支护施工

近年来,我国市政工程基础建设逐步完善,并取得诸多显著成果。随着市政工程施工规模的扩大,对深基坑施工质量提出了更高的要求。在实际施工中,由于基坑支护不当、基坑坍塌等安全事故时有发生,对市政工程质量造成严重影响。钢板桩作为一种常用的深基坑支护结构,具有见效快、安全环保、工序简单等优势,可有效保障深基坑施工安全。因此,对深基坑钢板桩支护施工技术要点进行重点阐述,以供参考。

改性沥青SMA路面中就地热再生技术的应用

近年来,为满足城市化与工业化发展需求,政府逐渐加大对公路工程的建设力度,公路里程不断增加,为区域经济发展提供了基础条件。一些公路工程使用年限较长,暴露出诸多病害缺陷,存在一定的交通安全隐患,如面层老化、车辙、网裂等。为有效解决这一问题,重点对就地热再生技术在改性沥青SMA路面中的应用进行简要分析,以期推动公路事业的可持续发展。

羊链球菌病诊治

羊链球菌病是由溶血链球菌感染引起的一种人畜共患病。临床上主要会导致羊淋巴结肿大,咽喉肿胀,各个脏器广泛性出血。羊养殖产业发展中,需要养殖户高度重视羊链球菌等条件性致病菌的防范工作,强化饲养管理,提高羊群身体抵抗能力。

养鸡业中兽药的正确使用

养鸡生产中，免不了要用药物预防和治疗某些疾病，但是怎样正确使用并不是一件简单的事，如果错误用药、乱用或滥用药物，都会影响治疗效果，或造成药物中毒，并由于药物残留影响产品质量。所以．一定要注意兽药使用的知识．选择有效的药物，进行合理的治疗。