辽宁省低致病性禽流感(H9)带毒情况调查

为确实掌握辽宁省家禽低致病性禽流感（H9）带毒或感染情况，2011～2012年，辽宁省动物疫病预防控制中心对全省共64个禽场（户）进行低致病性禽流感带毒或感染情况调查。结果表明，近7成以上的场（户）未进行H9亚型禽流感免疫。在所监测的5例H9亚型禽流感阳性禽群中，除1例免疫情况不明外，其他均未进行免疫，阳性场比率有逐年升高之势，其危害应引起高度重视。

超临界萃取技术在中药生产中的应用

超临界萃取技术是中药现代化生产中一项洁净的高效提取技术。着重介绍了超临界萃取技术的作用机理和与传统水提醇沉方法的优势及特点。综述了超临界萃取技术提取中药有效成分的进展情况,并对其在未来生产中的应用前景进行了展望。

禽流感与鸡新城疫免疫距离测定技术的初步研究

鸡禽流感与新城疫免疫评价指标对科学指导家禽疫苗免疫工作意义重大,不仅关系到家禽免疫程序制定与免疫时机把握,更直接关系到家禽的健康生产与经济效益。本文根据近几年鸡禽流感与新城疫免疫抗体监测数据,结合当前禽病的流行情况、病原变异情况、免疫情况、饲养环境变化情况等,通过测定家禽免疫HI距离,研究建立了界差率(Q)指标,同现行的抗体合格率等免疫评价指标相比,通过本指标可以对家禽免疫水平和健康状态作出科学分析和评估,对适时掌握禽流感、新城疫免疫状态和免疫时机做好二者的免疫预防工作意义重大。

基层防疫人员怎样才能做好“春防”工作

立春之后，日长夜短，随着气温的逐渐回暖，各种病原微生物也随之开始滋生，此时正是畜禽补栏旺季，也是高致病性禽流感、口蹄疫等重大动物疫病的高发季节，是我省畜禽“春防”免疫接种工作的关键时期。做好春防准备和实施工作，充分认识和考虑到春防实施工作的每一个细节，对做好“春防”工作尤为关键。

饲料中512mg/kg三聚氰胺对成年貉的重要组织器官毒性损伤的病理学观察

为评价三聚氰胺的毒性,本试验参照2008年辽中貉子中毒死亡饲料中三聚氰胺含量,在正常饲料中添加512 mg/kg三聚氰胺对成年貉进行了毒性观察试验。试验中将230日龄貉子分成用药和正常饲料两组,每组4只,雌雄各半,在同一环境条件下饲养,连续观察24周。结果用药组貉子临床上主要表现为厌食,精神委靡,皮毛干枯,生长受阻。剖检可见肾脏损害严重。病理切片检查发现,用药组貉子肝、肾组织结构中有大量结晶体,正常组织结构发生了明显的改变,功能性结构基本消失。结果显示,饲料中512 mg/kg三聚氰胺对成年貉具有明显的渐进性毒副作用,可以引起肝、肾等重要器官严重的毒性损伤。

改革开放三十年我国人畜共患病防控概况和成效

改革开放三十年来，我国人畜共患病控制成效显著。目前，虽然一些人畜共患病在我国仍有少许发生，但与20世纪70年代比，一些重点人畜共患病，如家畜布鲁氏杆菌病、炭疽、血吸虫病、狂犬病等人畜共患病“三率”（感染率、发病率、死亡率）都大幅度降低，有的已多年未再出现临床病例。

禽流感病毒通用型RT-LAMP快速检测方法的建立

为建立一种禽流感病毒（AIV）的快速检测方法,本研究根据环介导等温扩增技术（LAMP）原理,设计了针对AIV M基因4个不同区段的特异性引物,并对反应条件和反应体系进行优化,建立了AIV的RT-LAMP方法。结果表明,该方法对AIV H1~H16亚型的检测结果均为阳性,而对其他禽类病毒的扩增均为阴性,具有良好的特异性。对AIV的最低检测限为13.43 EID50/m L,灵敏度为普通一步RT-PCR的10倍;扩增反应可以在恒温水浴内60 min内完成;在反应体系中添加荧光染料后,肉眼即可判定检测结果。该检测方法与RT-PCR方法和荧光定量RT-PCR方法对临床样品检测的符合率均为81.8%。该方法能够简便、快速、灵敏、特异地检测AIV。

重组杆状病毒表达H9亚型禽流感HA基因的研究

为研究通过体外表达的方式获得具有生物学活性的禽流感HA蛋白的方法,根据GenBank公布的禽流感H9亚型的基因序列设计引物,扩增出HA基因全长片段,将扩增片段克隆到pFastBacHTa载体上,构建重组杆粒rBacmid-HA,在脂质体介导下转染Sf9细胞制备重组杆状病毒,表达HA蛋白,并通过血凝抑制试验、Westernt-blot、间接免疫荧光试验研究其生物学活性。结果显示,在Sf9细胞中成功表达了HA蛋白,分子量约为65kD,且表达蛋白具有良好的生物学活性。

1株Ⅶ型新城疫病毒融合蛋白基因的克隆与生物信息学分析

为了研究Ⅶ型新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)CY1株的进化情况,分析其遗传变异和基因功能,试验应用RT-PCR扩增NDV辽宁分离株CY1株的融合蛋白(fusion,F)基因,进行测序分析,构建系统进化树,并用生物信息软件对蛋白结构功能进行分析。结果显示,NDVF基因全长1662bp,编码553个氨基酸。生物信息学分析结果表明,F蛋白的分子质量为58991.0u,理论等电点为8.48,半衰期为30h(哺乳动物类网状细胞),不稳定系数31.62,脂肪指数为108.12,总平均疏水性0.174,最大疏水性为3.078,最小疏水性为-2.578,信号肽序列为第1-31位氨基酸残基,跨膜区结构分析结果表明该蛋白为跨膜蛋白,预测可能含有6个N-糖基化作用位点、9个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、7个蛋白激酶C磷酸化位点、14个N-豆蔻酰化位点、1个酰胺化位点、1个亮氨酸拉链、1个微体C端靶信号位点、1个双向核定位信号。系统进化分析结果表明,NDV CY1株与zj1株进化距离最近。

辽宁父母代种禽场J亚型禽白血病病毒感染的血清学调查

为了解J亚型禽白血病在辽宁省父母代种禽的感染情况,采集辽宁省不同地区禽血清共计1 401份,通过ELISA方法进行J亚型禽白血病抗体的血清学检测,结果表明,群体ALV-J感染率为65.5%,个体感染率为5.57%;海蓝褐蛋种鸡ALV-J感染率为5.38%,肉种鸡ALV-J感染率为6.11%;蛋种鸡和肉种鸡在23~40周龄时ALV-J抗体检出率较高。表明：辽宁省父母代种鸡群存在不同程度的ALV-J感染,虽感染率不高,但仍需加强禽白血病的预防和净化工作。

一株基因Ⅱ型新城疫病毒的检测及HN、F基因序列分析

为了掌握辽宁省新城疫病毒(NDV)的分布特点,试验采用新城疫荧光RT-PCR方法检测到1株新城疫病毒,通过接种鸡胚分离鉴定后将其命名为CK/YK1/2013,通过PCR扩增得到HN、F基因全长片段并测定了基因序列。结果表明:该毒株可以使接种鸡胚在38 h内死亡,具备强毒株的生物学特性。CK/YK1/2013的F基因在裂解位点的氨基酸序列为111GGRQGRL117,与弱毒株LaSota序列相同,与其他已知强毒株的裂解位点不同。CK/YK1/2013的HN、F基因与Ⅱ型LaSota毒株的同源性为99.6%,与F48E9及Ⅶ型的同源性分别为89.1%和83.0%,基因进化树分析表明该毒株属于Ⅱ型NDV。

辽宁省鸡白痢流行现状的调查

为掌握鸡白痢在辽宁省的流行情况，本研究于2012～2013年期间分别选取42家种禽场（户）和45家商品禽场（户）进行了鸡白痢流行病学调查和血清学检测，并对一些种禽场进行了重点跟踪监测。调查发现，祖代禽鸡白痢阳性率为0；父母代禽鸡白痢平均阳性率为2.15%，父母代肉种鸡白痢检出率为3.17%，蛋种鸡白痢检出率为0.32%；保种禽鸡白痢平均阳性率为20%；商品禽鸡白痢平均阳性率为3.49%，蛋鸡白痢检出率为4.8%，肉鸡白痢检出率为2.2%。结果表明，辽宁省鸡白痢危害仍然存在，个别场（户）还较严重。

动物H7N9禽流感荧光RT-PCR检测技术

A型H7N9禽流感病毒以往仅在禽及野鸟体内发现,从未发现过人的感染情况。2013年3月31日～4月23日我国已经报告了108例人感染H7N9禽流感确诊病例,鉴于H7N9亚型禽流感感染人病例数不断增加并导致严重临床症状,并对公共卫生安全与畜牧业生产都造成严重威胁,政府和相关业务部门高度重视H7N9禽流感病毒的监测预警工作。本文就开展动物H7N9禽流感病毒检测流程、荧光RT-PCR方法、注意事项等作以介绍,供参考。

禽流感与鸡新城疫HA和HI试验影响因素分析

HA和HI血清学检测是禽流感与鸡新城疫防控效果评估的一个重要手段和方法,其监测数据也是免疫效果评估和免疫时机把握的重要分析依据。虽然方法简单,但操作不规范易出现偏差,本文着重对禽流感与鸡新城疫HA与HI试验中影响要素和注意要点分别进行了阐述和分析,对科学掌握其正确的试验方法,提高试验的准确性,避免或减少试验误差具有重要的指导意义。

禽流感常见不同亚型间血凝抑制试验研究

本研究通过对禽流感不同亚型间交叉血凝抑制试验(HI),分析其常见不同亚型及同一亚型不同毒株间HI交叉反应情况。试验结果表明,禽流感H5、H7和H9亚型中HI交叉保护极低,甚至可以忽略不计,而同一亚型不同毒株间HI交叉反应也表现出较大差异。H5Re-4抗原与H5Re-6、H5Re-7血清HI交叉反应为40%;H5Re-6抗原与Re-4 HI交叉反应约为77.8%,与H5Re-7血清HI交叉反应仅为11%;H5Re-7抗原与H5Re-4血清HI交叉反应约为77.8%,与Re-6血清HI交叉反应约为55.6%。H7N9抗原与与H7 HI交叉反应约为88.9%,而H7抗原与H7N9 HI交叉反应约为71%。上述数据表明,禽流感免疫时不同亚型的禽流感疫苗并不能互相代替,即使同一亚型不同株疫苗(如H5Re-6与Re-7株疫苗)由于免疫特异性关系也需要采取针对性疫苗免疫措施。

辽宁省新城疫病毒F基因和HN基因的分子特征与致病性

采用RT-PCR对新城疫病毒辽宁分离株的F基因和HN基因进行扩增并测序,初步研究其分子特性分析和致病性。结果表明,分离株CY1株、DD2株、YK1株和TL4株的致死鸡胚平均时间(MDT)分别为50.6 h、76.3 h、62.9 h和81.3 h,CY1株具有强毒特征。F基因分型显示,CY1株属于Ⅶ型,其F蛋白多肽裂解位点的序列为112RRQKRF117,符合NDV强毒氨基酸基序特征,与流行株js02株的亲缘关系非常近,与疫苗株LaSota、Queensland V4亲缘关系均较远。DD2株、YK1株和TL4株均属于基因Ⅱ型,其F蛋白多肽裂解位点的序列为112GRQGRL117,符合NDV非强毒氨基酸基序特征,与LaSota株亲缘关系最近。本研究将为本省新城疫防制对策的制定提供参考。

流感病毒血凝抑制试验非特异性因子去除方法

血凝抑制试验(HI)是判断流感病毒感染情况及检测流感抗体水平最常用的血清学方法。多种动物血清中存在非特异性凝集因子和非特异性凝集抑制因子,这两类因子如果不去除,会造成HI结果偏差,出现假阴性(抗体效价偏低)或假阳性(抗体效价偏高)。在HI试验前,需要对某些动物血清进行处理。文章对两类非特异性因子的处理方法及其应用进行了总结。

四株鸡新城疫病毒的毒力测定

新城疫（ND）是由新城疫病毒（NOV）所引起的、禽类一种急性、烈性传染病，其主要侵害鸡和火鸡，发病率和死亡率均非常高，为危害我国养禽业的最严重疾病之一，该病为世界动物卫生组织（OIE）所规定的A类动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。根据毒力不同，NDV可分为强毒株、中强毒株及弱毒株3类，为了解我省新城疫病毒的分布特点，本研究对我省监测到的4株新城疫病毒进行生物学毒力指标的测定。

鸡新城疫病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)技术的初步建立

本研究设计了针对鸡新城疫病毒(ND)的F基因保守区6个特异性部位的4条引物,建立了NDV的逆转录环媒恒温检测方法。该方法在恒温水浴锅中作用1 h即可得到其特有的阶梯状条带,加入荧光素后结果肉眼可直接观察。本方法特异性高,敏感性是荧光RT-PCR的10倍。

腹泻益康灵防治仔猪腹泻疗效观察

根据中兽医基础理论和幼科动物的特点认为,早期断奶仔猪腹泻的病因是脾虚湿盛,伤食积热,病变部位在脾胃和大小肠。通过健脾燥湿,清热解毒,凉血止痢的治疗方法对临床上仔猪腹泻进行了分组治疗试验。试验结果表明,应用腹泻益康灵治疗仔猪腹泻具有良好的治疗效果,治愈率达97.3%,而对照组氟哌酸与庆大霉素两组的治愈率仅为86.4%和70.3%。