堆肥中高温纤维素酶菌株的筛选及其酶性质研究

从堆肥中分离获得20株耐高温纤维素分解菌,经过复筛,HC-5菌株产酶活性最高。HC-5的生长特性表明,其最适pH值为7.0,最适温度为50℃。菌株HC-5的CMCase和β-glucosidase酶作用活性范围均在40℃～70℃,但最适作用温度分别为60℃和50℃;Avicelase酶作用活性范围在40℃～60℃,而在50℃时酶作用活性最高。HC-5所产的纤维素分解酶具有良好的热稳定性,但随贮温的增加,其热稳定性呈现下降的趋势。

纤维素酶高产菌株产酶条件的优化

通过产酶培养基及产酶条件的优化,确定产纤维素酶菌株N-57的最佳产酶条件。利用液体发酵培养法探讨培养基起始pH值、培养温度、碳源、氮源对菌株N-57产酶的影响。在单因素试验的基础上,通过Box-Behnken响应曲面法筛选出产CMCase的最佳发酵条件:pH值为6;稻草粉浓度为0.30%;(NH4)2SO4浓度为0.30%。在最佳条件下培养,该菌株的CMCase的酶活达到459.54U。

普洱茶不同提取物体外抑菌活性研究

研究了不同溶剂普洱茶提取物及萃取物的体外抑菌活性。论文采用滤纸片扩散法和最低抑菌浓度检测了水提、75%和95%乙醇普洱茶提取物对S.aureus、E.coli、P.aeruginosa及B.subtilis体外抑菌效果。同时分析了95%醇提物的不同溶剂萃取物对供试菌的影响。结果表明:95%乙醇浸提物抑菌效果最好,尤其对S.aureus、E.coli最为明显,抑菌圈分别为19.58±0.24 mm、14.58±0.24 mm,MIC分别为0.63 mg/mL,0.39 mg/mL,但对B.subtilis抑菌效果差。在95%醇提物的不同溶剂萃取物中,萃取物抑菌活性为:乙酸乙酯>正丁醇>石油醚>氯仿。乙酸乙酯萃取物对S.aureus抑制效果最好,其抑菌圈直径为31.88±0.24 mm,MIC为0.47 mg/mL。普洱茶提取物的醇提乙酸乙酯萃取提物能显著抑制革兰氏阴性菌和阳性菌的生长,研究结果为普洱茶抗菌活性成分的开发利用提供一定的实践和数据参考。

响应面法优化小刺青霉16-7产纤维素酶液体发酵工艺

在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman试验设计及响应面分析,利用Minitab软件,对纤维素酶高产菌小刺青霉(Penicillium spinulosum)16-7进行发酵工艺条件的优化。通过Plackett-Burman试验筛选出影响产酶的3个主要因素,即稻草-麸皮(碳源)添加量、培养温度和培养时间。在此基础上通过最陡爬坡试验和响应面分析法进行回归分析。结果表明:当稻草-麸皮添加量为3.45 g/100 mL、培养温度为27.11℃和培养时间为146.27 h时,酶活力最高,此条件下滤纸酶酶活力预测值为132.53 U/mL。经过修正,选择稻草-麸皮添加量3.45 g/100 mL、培养温度27℃、培养时间146 h,此条件下测得羧甲基纤维素酶酶活力为387.58 U/mL、滤纸酶酶活力为128.86 U/mL,滤纸酶酶活力比优化前提高49.07%。

云南三川火腿加工中微生物区系变化规律研究

对传统工艺制作的三川火腿加工中微生物区系的动态变化规律进行了研究,并通过形态学和生理生化试验对优势菌进行分离鉴定.结果表明,腌制期、风干期和焐灰期分别为三川火腿表面和内部细菌和葡萄球菌数量的增长期、稳定期和减少期;除腌制初期外,火腿内部假单胞菌数量均高于其表面,且在整个加工过程中由于微生物之间的竞争性关系呈逐渐降低趋势;腌制后期为火腿表面和内部霉菌数量的急剧增长期,但在焐灰期骤减,直至未检出.三川火腿优势菌为马尾葡萄球菌和模仿葡萄球菌.加工过程中加强对腌制期和风干期的时间与温度控制,有利于形成前体物质,从而更好地促进焐灰期火腿优良风味的形成.

大围山森林土壤中高产纤维素酶菌株的筛选及鉴定

通过初筛(刚果红纤维素水解试验和滤纸条分解试验)和复筛(利用3,5-二硝基水杨酸法测定内切纤维素酶活,滤纸酶活和β-葡萄糖苷酶活),从大围山原始森林土壤中筛选高产纤维素酶菌株,获得4株具有高产纤维素酶活性的菌株。其中一株真菌16-7分解纤维素能力最强且酶活稳定,其内切羧甲基纤维素酶活为265.76U/mL,滤纸酶活为86.44 U/mL,β-葡萄糖苷酶活为39.16 U/mL;对真菌16-7分别进行形态学观察、分子生物学鉴定,初步确认为小刺青霉(Penicilliumspinulosum)。

产纤维素酶菌株对烟叶纤维素和可溶性总糖的影响

[目的]探讨产纤维素酶菌株(Bacillus subtilis)对烟叶纤维素和可溶性总糖的影响。[方法]以产纤维素酶Bacillus subtilis-89(BS-89)菌株对烟叶进行发酵,研究不同菌龄、种量、发酵温度和发酵时间对烟叶纤维素和可溶性总糖的影响。[结果]随着接种量、发酵时间和温度的增加,烟叶纤维素含量均呈明显降低的趋势,可溶性总糖含量呈现升高的趋势。不同菌龄对纤维素和可溶性总糖含量也有影响,其中以菌龄48 h的处理组影响最大。[结论]产纤维素酶菌株BS-89能有效降解烟叶中纤维素含量,明显提高可溶性糖的含量。

普洱茶醇提不同萃取物的体外抑菌活性研究

采用滤纸片扩散法研究了普洱茶95%醇提萃取物石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和萃取后剩余物对金黄色葡萄球菌(S.aureus)和大肠杆菌(E.coli)的体外抑菌效果及普洱茶醇提乙酸乙酯萃取物抑菌活性的稳定性.结果表明:上述4种普洱茶醇提萃取物对S.aureus和E.coli均有一定的抑制作用,其中,乙酸乙酯萃取物的抑菌效果最好,对两种受试菌抑菌圈直径分别为(31.88±0.24)mm和(22.81±0.31)mm,最小抑菌浓度MIC分别为0.47 mg/m L和0.35 mg/m L.乙酸乙酯萃取物稳定性实验结果表明:普洱茶醇提乙酸乙酯萃取物在不同温度和紫外光照条件下均具有良好的抑菌稳定性,但酸碱性对其抑菌活性影响明显,抑菌效果随p H值的增大而逐渐变差.

普洱茶提取物对金黄色葡萄球菌的影响

为考察不同溶剂普洱茶提取物的抑茵效应，以金黄色葡萄球菌（S．aureus）为供试菌，采用滤纸片扩散法分别探讨普洱茶水提取物、75％乙醇提取物和95％乙醇提取物的抑茵效果、最小抑茵浓度（MIC）和最低杀茵浓度（MBC）．研究结果表明：普洱茶提取物浓度在4～20mg／mL范围内对S．au-reus均有较强的抑制效应，且抑制效果与浓度呈正相关．3种提取物中95％乙醇提取物的抑茵效果最佳，其MIC与MBC均为0．63mg／mL．

云南木姜子提取物对蜡样芽孢杆菌抑菌作用的研究

目的研究云南木姜子(Yunnan Litsea cubeba)的抑菌活性及抑菌稳定性。方法用乙醇对云南木姜子果实进行提取并分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取。比较不同萃取相对蜡样芽孢杆菌的抑制作用,并通过热处理、酸碱处理、紫外照射、金属离子处理、糖和盐处理对其稳定性进行考察。结果云南木姜子提取物对蜡样芽孢杆菌具有良好的抑菌作用,其活性成分主要分布于乙酸乙酯相,其对蜡样芽孢杆菌的最小抑菌浓度为0.08 mg/mL;云南木姜子乙酸乙酯萃取相经紫外线照射、酸碱处理和不同温度处理仍表现出良好的稳定性,盐和糖处理条件使其对蜡样芽孢杆菌的抑菌活性增强,对于金属离子处理,Mg^(2+)使其对蜡样芽孢杆菌的抑菌活性提高,Fe^(3+)、Fe^(2+)、Al^(3+)和Ca^(2+)等使其抑菌活性降低。结论云南木姜子提取物具有良好的抑菌活性,温度、紫外和pH对其抑菌成分的稳定性有较小的影响,金属离子、糖和盐浓度对其抑菌活性影响较大。因此可考虑将云南木姜子作为一种天然植物源防腐剂,它在保鲜方面具有良好的开发和利用前景。

云南木姜子醇提物抑菌活性及其稳定性研究

测定5种不同浓度(0%、55%、75%、95%、100%)乙醇云南木姜子醇提物(Ethanol Extract of Yunnan Litsea cubeba,EELC)对两种致病菌的抑菌效应,筛选出抑菌活性最强的醇提取物,并研究其稳定性。采用KB纸片法测定不同浓度乙醇EELC对E.coil、S.aureus的抑菌圈直径,并采用TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)法测定其MIC,筛选出最佳抑菌活性EELC,进一步研究其温度、热处理时间、酸碱度及紫外光照稳定性。结果表明:55%和75%EELC分别对S.aureus,E.coil抑制效果最好,其MIC分别为19和819μg/mL。在40℃下处理55%EELC时,OD_(600)为0.118抑菌活性最佳,且在此条件下处理1~5 h抑菌活性保持稳定;经30 W紫外光照射10~60 min抑菌活性无显著差异(P>0.05);在p H为4时,抑菌活性有所下降,pH为6~10时,抑菌活性保持稳定。在100℃处理75%EELC时,抑菌活性保持率达到92.88%,在此温度下加热1~5 h,抑菌活性无显著差异(P>0.05);在pH为4~8时,75%EELC抑菌活性显著下降(P<0.05),在pH为10时,抑菌活性有所上升;经紫外光照射10~60 min对其抑制效果无显著影响(P>0.05)。综上,55%EELC对S.aureus具有较高的稳定性以及较低的作用浓度,75%EELC对E.coil的抑制效果良好且稳定,为云南木姜子的综合利用与开发提供了理论依据。

普洱茶提取物对猪肉糜品质的影响

针对目前冷鲜肉制品保质期短、品质不稳定、易腐败变质等状况，考察了不同浓度普洱茶提取物（PETs）对冷却猪肉糜货架期的影响．结果表明，冷却猪肉糜中添加0．02％-0．12％的PETs后，在贮藏期间不仅可以有效抑制肠道茵群、假单胞茵和菌落总数的增殖，还可降低挥发性盐基氮和硫代巴比妥酸值的累积，增加红度值并保持猪肉糜良好的感官性状．

多菌混合发酵豆豉后发酵工艺优化及品质分析

为探究多菌混合发酵豆豉的发酵工艺和品质,该研究以大豆为原料,枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、卡利比克迈耶氏酵母(Meyerozyma caribbica)、溜曲霉(Aspergillus tamarii)为菌种制备豆豉,通过单因素试验结合响应面试验优化多菌混合发酵豆豉后发酵工艺条件,并对其后发酵过程中的理化、微生物指标及酶活力进行分析。结果表明,最优豆豉后发酵工艺条件为食盐添加量7%,发酵温度33℃,发酵时间8 d。在该优化条件下,豆豉感官评分为86.33分。后发酵完成时,豆豉水分含量、还原糖、总糖、总酸、总游离氨基酸、氨基酸态氮含量、颜色参数L^(*)值、a^(*)值、b^(*)值分别为23.76%、2.13 g/100 g、5.40 g/100 g、0.22 g/100 g、0.319 g/100 g、0.77 g/100 g、65.03、6.10、19.83;细菌、酵母菌、霉菌、乳酸菌活菌数对数值分别为3.13、0.97、3.44、2.12;蛋白酶与淀粉酶活力分别为322 U/100 g、13 U/100 g。

云南三川火腿加工过程中的理化性质变化

在三川火腿腌制期(0~20 d)、风干期(21~80 d)和成熟期(81~320 d)3个阶段分别取样,研究其成熟过程中NaCl含量、水分含量、pH值、亚硝酸盐含量、色差(亮度值(L~*)、红度值(a~*)和黄度值(b~*))及游离氨基酸含量的变化规律。结果表明:加工0~320 d,三川火腿的NaCl含量持续增加,由0.17%增至4.93%,水分含量不断减少,由74.45%降至44.27%;加工0~20 d,pH值先降低后升高,之后再降低,加工20 d时火腿的pH值为6.11,风干期和成熟期的pH值逐渐增加,加工第320天时的pH值为6.65;加工0~320 d,亚硝酸盐含量从0.39 mg/kg降至0.14 mg/kg,低于国家一级火腿的亚硝酸盐含量标准(≤20 mg/kg);腌制期火腿的ΔL~*和Δb~*均差异不显著(P>0.05),风干期和成熟期火腿的ΔL~*、Δb~*和Δa~*均差异不显著(P>0.05);加工0~290 d时,必需氨基酸总量由(33.50±9.33)mg/100 g增加至(2 223.70±214.12)mg/100 g,呈味氨基酸总量由(59.88±11.70)mg/100 g增加至(2 069.01±179.12)mg/100 g,游离氨基酸总量由(355.18±44.05)mg/100 g增至(4 973.06±442.60)mg/100 g,组氨酸是火腿加工过程中含量最高的游离氨基酸。

云南自然发酵酸菜液中乳酸菌的分离鉴定及其发酵性能研究

[目的]对云南自然发酵酸菜液中的优势乳酸菌进行分离、鉴定及发酵性能研究。[方法]从云南自然发酵酸菜液中分离出12株乳酸菌,经优选筛选出4株性状优良的乳酸菌(S-3、S-6、S-8和S-10),通过形态学观察及生理生化试验对其进行鉴定,并研究其发酵性能。[结果]经鉴定,S-3和S-6为植物乳杆菌(Lactobacilllus plantarum),S-8为肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides),S-10为短乳杆菌(Lactobacillus brevis)。菌株S-6的发酵性能优良,产酸快,产酸量多,耐酸性较好,亚硝酸盐降解性能高,pH 3时仍能较好地生长。[结论]该研究结果可为了解云南传统酸菜发酵机制和控制酸菜发酵质量提供参考。

云南古树茶上寄生的“螃蟹脚”提取物的体外抑菌效应研究

[目的]探讨螃蟹脚提取物对8种常见食源性微生物和致病菌的体外抗菌活性。[方法]采用纸片扩散法和微孔板稀释法,测定了提取物对各受试菌的抑菌圈和最低抑菌浓度(MIC)。[结果]螃蟹脚提取物能显著抑制供试菌的生长;在3%～7%浓度范围内,螃蟹脚对8株供试菌株均有较强的抑制作用,且随着提取物浓度的升高而逐渐增强,其抑菌圈直径从大到小为P.aeruginosa>S.typhimurium>E.coli>M.tuberculosis>S.aureus>B.subtilis>L.monocytogenes>C.albicans。螃蟹脚提取物对6株供试菌株的最小抑菌浓度均低于0.50 mg/ml。螃蟹脚对P.aeruginosa、S.typhimurium和E.coli有较强的抑制作用,最小抑菌浓度分别为0.060、.12和0.20 mg/ml。[结论]螃蟹脚提取物呈现广谱抗菌特性。这为螃蟹脚的进一步开发和利用提供了理论依据。

扁枝槲寄生提取物体外抗氧化效应研究

采用水浴和超声两种提取方式,分别用水和无水乙醇提取扁枝槲寄生(俗称"螃蟹脚"),再用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取两种方式的水提取物,得到不同的萃取组分.分别测定各萃取组分的总游离氨基酸、茶多酚、茶多糖和总黄酮的含量,及其对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子、羟基自由基的清除能力和FRAP值.结果表明,"螃蟹脚"具有良好的体外抗氧化活性,各提取-萃取组分对ABTS自由基的清除率最高均能够达到98%以上,对DPPH自由基的清除率最高均可达到88%以上.由模糊评价法得到的抗氧化综合值能够很好地反映各组分的总抗氧化能力,水浴水提取物综合值最高,为4.66,水浴水提取物的氯仿萃取层综合值最低,为0.21.其与茶多酚(P<0.05)和黄酮(P<0.01)的含量显著相关."螃蟹脚"中茶多糖的含量高达5 468.08 mg/100 g.

FYa1泡菜用直投式发酵剂的制作工艺优化

利用从云南富源泡菜中分离得到的发酵乳杆菌FYa1制作直投式发酵剂,FYa1泡菜用直投式发酵剂的最佳离心条件为离心转速3000 r/min、离心时间15 min、离心温度15℃,在此条件下,FYa1离心存活率达到34.57%。通过Plackett-Burman设计和Box-Behnken设计优化最佳冻干保护剂配方,最佳配比为海藻糖8.5 g/100 mL、蔗糖8.5 g/100 mL和谷氨酸钠2.5 g/mL。此条件下,冻干菌粉的存活率为(68.53±0.09)%,FYa1发酵剂的含菌量为(2.0±0.05)×10^8 CFU/g。FYa1泡菜用直投式发酵剂具有优秀的发酵性能,在发酵过程中展现出良好的复活能力。研究结果为云南传统泡菜的科学加工和产品质量提升提供一定的科学理论和应用依据。

响应面法优化甜米酒酸菜发酵工艺

以青菜为原料,通过发酵乳杆菌(Lactobacillus fermenti)FY1及短乳杆菌(Lactobacillus brevis)FY2发酵甜米酒酸菜。在单因素及PB试验的基础上,利用响应面优化设计甜米酒酸菜的发酵工艺。结果表明,甜米酒酸菜制作的最佳工艺为食盐添加量4.0%,白砂糖添加量6.2%,甜米酒添加量15.6%,室温条件下发酵9 d。在此优化条件下,甜米酒酸菜感官评分92.3分,理化及卫生指标均符合国家标准。

三川火腿加工过程中生物胺的变化规律

以用传统发酵工艺制作的三川火腿为研究对象,采用高效液相色谱法检测三川火腿腌制期、晾干期和堆焐发酵期中8种主要生物胺的质量浓度,探究三川火腿加工过程中生物胺的变化规律.结果表明:1)共检测出7种生物胺,分别为苯乙胺、尸胺、腐胺、组胺、酪胺、亚精胺和精胺,未检测出色胺,且苯乙胺只在腌制中期被检出.其中,腐胺和精胺存在于三川火腿的整个加工过程中;尸胺的质量浓度在7种生物胺中最高,其次是精胺,尸胺的质量浓度在三川火腿加工过程中持续增加,在堆焐发酵后期达到最大值(69. 24±12. 54) mg/kg,但在堆焐发酵末期又开始显著降低;亚精胺和精胺都保持着较平稳的质量浓度变化,其中亚精胺的质量浓度一直处于较低水平;苯乙胺只在腌制中期被检出;组胺的质量浓度较低,最高仅为(22. 52±5. 25) mg/kg,较为安全. 2)在三川火腿的整个加工过程中,总生物胺的质量浓度呈先上升、后平稳、再上升的趋势:新鲜三川火腿中总生物胺的质量浓度最低,为(5. 84±1. 30) mg/kg,到腌制中后期,总生物胺的质量浓度显著增加(P <0. 05);进入晾干期,总生物胺的质量浓度增加不显著(P> 0. 05);堆焐发酵期是生物胺累积的主要时期,堆焐发酵后期的总生物胺的质量浓度最高,为(158. 08±31. 35) mg/kg.