APA-BCC微胶囊蛛网膜下植入对癌痛病人的镇痛效应

目的:观察脊髓蛛网膜下腔植入APA-BCC镇痛微胶囊对癌痛病人的镇痛效应及不良反应.方法 :将不同剂量的海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微胶囊包裹的牛肾上腺嗜铬细胞(APA-BCC微胶囊)按常规腰穿的方法注入100例中、重度癌痛患者的腰段脊髓蛛网膜下腔内.按数字分级法(NRS)评定疼痛程度的变化并记录止痛药使用情况;按WHO分级法评价不良反应;按孙燕等指标评价生活质量.结果: (1)APA-BCC注射后0.5～5天,在停用、减量和/或降级使用其它镇痛药的情况下,其镇痛的有效率(CR+PR)为84%、总有效率(CR+PR+MR)为96%,镇痛程度显著优于药物组.(2)1至2次使用后镇痛持续时间为9～220天,明显长于现有镇痛药.(3)APA-BCC治疗后,癌痛病人的生活质量及满意度显著提高.(4)APA-BCC注射后,除部分病人出现与常规蛛网膜下腔注射相近的轻度不良反应外,未观察到严重不良反应,患者的心率、血压、呼吸、肝肾功能、外周血象和免疫功能无明显变化.但单次使用1.5剂量时,2例患者出现了难以耐受的下肢震颤和背部沉重压迫感等重度不良反应.结论: APA-BCC微胶囊植入脑脊液内对癌痛病人具有明确的长效镇痛作用.

微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞脑内移植治疗偏侧帕金森病样大鼠及猴的实验研究

以右侧帕金森病样大鼠和猴为模型，分别将微囊化和非微囊化牛肾上腺嗜铬细胞（ＢＣＣ）及空微囊定向植入右侧脑纹状体内，观察动物行为、脑组织生化和组织学变化。结果表明：植入的ＢＣＣ能够在异种脑内存活、分泌多巴胺等单胺类物质并纠正帕金森病样大鼠及猴的异常行为。海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠微囊具有免疫保护作用，可明显地延长ＢＣＣ在异种宿主脑内的存活时间，作用超过１０个月。微囊化ＢＣＣ脑内移植有望成为治疗帕金森病的一种有效方法。

海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊化牛肾上腺嗜铬细胞植入镇痛治疗中人体的免疫反应

目的:了解海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙(APA)微囊化牛肾上腺嗜铬细胞(APA-BCC)植入蛛网膜下腔后患者的免疫反应。方法:实验于2002-07/2003-02在解放军总医院老年医学研究所细胞生物学研究室完成。采用腰椎穿刺术,将APA-BCC注入20例中、重度癌痛患者L3～4或L4～5蛛网膜下腔内。检测患者移植前后的血象、免疫球蛋白、T细胞亚群及脑脊液。结果:移植后外周血中淋巴细胞比例较移植前无明显变化(P>0.05)。移植后7d复查16例患者的脑脊液,其中8例(50%)脑脊液中白细胞升高,范围在(15～700)×106L-1犤(198±248)×106L-1犦。但外周血免疫球蛋白、T细胞亚群较移植前无明显变化。结论:APA-BCCs微胶囊植入癌痛患者蛛网膜下腔,未引起宿主明显的免疫反应,表明APA微囊具有良好的免疫隔离作用。

蛛网膜下植入微囊化牛肾上腺嗜铬细胞对癌痛患者脑啡肽含量及镇痛作用的影响

目的:了解海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化牛肾上腺嗜铬细胞(APA-BCC微胶囊)植入癌痛患者脊髓蛛网膜下产生镇痛的同时对脑脊液中内源性阿片肽类物质含量的影响。方法:将APA-BCC微胶囊注射入晚期癌症并伴有中、重度疼痛患者的腰段脊髓蛛网膜下腔内;分别采取移植前、移植后6～8d的脑脊液,部分患者又采取了移植后13～17d的脑脊液;用放射免疫法检测脑脊液中亮氨酸脑啡肽(L-EK)、β-内啡肽(β-EP)、强啡肽(DynA)的含量。结果:与移植前比较,移植后患者脑脊液中L-EK的含量明显升高,其中移植剂量为1.0×107时,升高最为显著;而移植后脑脊液中β-EP和DynA的含量无明显改变。结论:APA-BCC微胶囊植入对癌痛患者的镇痛效应可能与脑脊液中L-EK的含量升高有关。

一种生物型人工肝支持系统治疗急性肝功能衰竭犬的效应

目的：评价我们改进的生物型人工肝系统（ＢＡＬＳ）治疗急性肝功能衰竭犬的有效性和安全性。方法：在引进中空纤维管式ＢＡＬＳ基本技术的基础上，将中国实验用小型猪肝细胞培养于ＢＡＬＳ中，对醋氨酚诱发ＡＬＦ模型犬进行透析治疗，测定治疗前、后肝衰犬血液ＧＰＴ、ＮＨ３、ＧＯＰ、ＢＵＮ及ＡＫＰ等生化指标及肝脏组织学的变化。结果：采用此种ＢＡＬＳ对ＡＬＦ犬治疗４～６ｈ，其血氨、ＧＰＴ、ＧＯＴ和ＡＫＰ等生化指标均明显降低（Ｐ＜０．０１）；而药物组和对照组其治疗前、后这些生化指标均无明显改变（Ｐ＞０．０５）。药物组和对照组的肝衰犬均在治疗后６～３６ｈ内死亡，而透析组的肝衰犬在治疗后可长期存活（大于３０ｄ）。ＢＡＬＳ治疗效果明显优于常规的药物治疗（Ｐ＜０．０１）。结论：此种ＢＡＬＳ能迅速、安全。

6-羟基多巴诱发偏侧帕金森病样大鼠模型的制作和特征

目的:了解6-OHDA注入大鼠一侧中脑黑质区所导致的行为、生化和组织学改变及该种帕金森病样大鼠模型的可靠性和稳定性。方法:采用雌性SD大鼠,在脑立体定位技术下,将6-OHDA注入大鼠右侧中脑黑质区,以损毁黑质多巴胺能细胞。用小动脉旋转行为监测仪记录Apomorphine诱发的大鼠异常旋转行为、脑组织液生化和组织形态的变化。结果:发现6-OHDA注入大鼠右侧中脑黑质后,大鼠向损毁对侧的旋转次数明显增加(大于280圈/40min),PD模型成功率为50.5%。PD鼠损毁侧脑组织液中多巴胺代谢产物DOPAC和HVA明显低于未损毁侧(P<0.05)。PD阳性鼠右侧黑质致密斑和腹侧背盖区处TH阳性细胞消失;而PD阴性鼠右侧仍部分存在。连续观察十个月PD样模型大鼠的异常旋转行为无自发性恢复。结论:6-OHDA可损毁黑质多巴胺能细胞,造成与帕金森患者相似的基本病理变化。

TECA型组合型人工肝系统治疗肝功能衰竭患者的初步临床观察

目的 :观察TECA型组合型人工肝支持系统 (HALSS)治疗急性肝功能衰竭 (ALF)患者的有效性和安全性。方法 :分离中国实验用小型猪肝细胞并培养于BALSS的生物反应器中。患者的血浆先经碳吸附或血浆置换后 ,循环流经BALSS的中空纤维管。每次治疗持续 6～ 7h。观察治疗前、后患者生理和血液生化指标的变化。结果 :从每只小型猪的肝脏平均可得到 (1.0～ 3.0 )× 10 10 个猪肝细胞 ,存活率 >85 %。TECA -HALSS治疗结束后 ,患者的血NH3、ALT、AST、TB、DB等水平明显降低 ;PTA水平升高 ;患者的神志由嗜睡或昏迷转为清醒。治疗中患者生命体征平稳、血电解质水平无明显改变。结论 :TECA -HALSS是一种能迅速、安全。

大鼠胰岛的分离和纯化

目的：改进分离与纯化方法，以获得较高纯度和活力的大鼠胰岛。方法：用改良的酶法分离、Ｄｅｘｔｒａｎ梯度法纯化大鼠胰岛。用ＤＴＺ法判定胰岛纯度；用ＡＯ／ＰＩ法判定胰腺存活率；用大鼠胰岛移植于ＳＴＺ糖尿病小鼠法判定其功能。结果：雌、雄性ＳＤ和Ｗｉｓｔａｒ大鼠间胰岛形态无明显差异。Ⅴ型和Ⅺ型胶原酶对大鼠胰岛分离效果相似；分离以０．１％胶原酶分次消化、作用３０ｍｉｎ为宜，细胞存活率达９０％。纯化用２２％—１６％—１４％—９％梯度所获得胰岛的纯度＞９０％。胰岛移植于糖尿病小鼠可使其血糖从移植前的（２６．７０±２．５３）ｍｍｏｌ／Ｌ降低至（１３．９８±３．９２）ｍｍｏｌ／Ｌ，维持２～３ｄ。结论：所改进的制备方法可获得较高纯度和活力的大鼠胰岛。

重视微囊化人工细胞在医学中应用的研究

组织细胞移植可以治疗多种神经／内分泌及代谢疾病。异种细胞和基因工程细胞可提供来源广泛的具有特定功能的移植物。海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠（ＡＰＡ）微囊包裹移植物可有效的克服免疫排斥，使异种移植物得以在宿主体内长期存活并发挥效应。ＡＰＡ微囊化人工细胞已在治疗帕金森病、疼痛、糖尿病等疾病的研究中取得了很大的进展。我国在该领域的研究水平已处于国际先进行列。严格控制所用目的细胞和微囊的质量，是保证研究健康发展的必要条件。

脑内植入APA-BCC的偏侧帕金森病样猴的多巴胺D_2受体功能影像观察

目的 观察海藻酸钙 多聚赖氨酸 海藻酸钙微囊化牛肾上腺嗜铬细胞 (APA BCC)脑内移植后偏侧帕金森病 (PD)样猴行为的改善及纹状体区D2 受体的活性。方法 1只MPTP诱发右侧PD样猴接受右侧脑纹状体区APA BCC植入 ;观察移植后的行为变化 ;于移植后 4 8个月时行11C raclopride标记多巴胺D2 受体活性的PET检查。结果 APA BCC脑内移植后 4 8个月时 ,偏侧PD样猴的异常行为仍得到明显纠正 ;脑PET三维图像显示移植侧纹状体区D2 受体活性较对侧明显增高。 结论 APA BCC脑内移植可长时间地纠正偏侧PD样猴的异常行为并升高移植区突触后膜多巴胺D2 受体的活性。

人工肝脏研究的现状和发展

人工肝脏研究的现状和发展薛毅珑，张佐云，黄英才，刘成贵关键词人工肝；肝功能衰竭；治疗；综述中国图书资料分类法分类号Ｒ５７５．３急性肝功能衰竭（ＡＬＦ）是指由于各种原因造成严重的肝细胞损伤或坏死而致迅速出现意识障碍、出血倾向、黄疸及肝臭、肝脏进行性缩小...

APA微囊化人工细胞治疗疾病的研究

作为免疫隔离屏障的微囊技术为克服组织细胞移植治疗疾病研究中的免疫排斥反应和移植物来源稀少提供了新途径。海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞移植治疗帕金森病和疼痛及微囊化胰岛移植治疗糖尿病的动物实验和临床研究,及其他研究者对微囊化胰岛移植治疗糖尿病、微囊化甲状旁腺细胞移植治疗甲状旁腺功能低下等方面的研究,均明确表明APA微囊可成功地克服组织细胞移植中的免疫排斥反应,使异种移植物的应用成为可能,极大地扩展了移植物的来源。临床应用微囊化人工细胞治疗糖尿病、帕金森病等神经/内分泌疾病将得以实现。同时,也将为体细胞基因治疗提供有效的工具。

雌酮诱发大白鼠垂体腺瘤动物模型的研究

本实验给97只不同性别的F344和Wistar大白鼠投以不同剂量的雌酮,用药后30、45和60天时,分别观察脑垂体重量及组织学变化。另24只大鼠作为正常对照组。结果表明,用药组大鼠脑垂体重量非常明显地高于对照组,脑垂体腺组织结构亦明显发生变化,其中,34％鼠呈肿瘤性改变,46.4％鼠呈增生性改变。提示雌酮可有效地诱发脑垂体腺瘤。这种变化在用药后45天时达高峰。而本实验所用的两种剂量雌酮,其诱发脑垂体瘤的效果无明显差异。本研究结果还表明,雌酮诱发脑垂体腺瘤的作用中,存在着大鼠种属差异性,F344鼠较Wistar鼠更为敏感。而大鼠的性别及是否去势对其无明显影响。这种雌激素诱发的大鼠垂体腺瘤,可为研究人类脑垂体催乳素瘤的发病机理和治疗方法,提供一个简便易行、需时较短并重复性较好的动物模型。

人工肝支持技术建立及治疗急性肝衰动物实验

肝功能衰竭死亡率甚高,临床缺乏有效的疗法.由于肝脏的再生能力很强,采用人工肝支持技术可通过暂时地肝功能支持作用,使急性肝衰者获得肝脏组织再生修复的机会、使慢性肝衰者获得肝移植的机会.近年发展的生物型人工肝支持系统(BALSS)是以外来的肝细胞与肝衰者的血液进行交叉灌流,通过肝细胞的生物学效应,发挥暂时地肝功能替代作用.

远红外热像变化可作为针刺治疗急性周围性面瘫的评价指标

背景：以往实验构建了针刺加远红外热像治疗面瘫,并已证明无论何种证候的面瘫,皆可采用针刺加远红外热像治疗,可明显缩短病程,治愈率高,无任何后遗症。但尚未了解应用远红外热像判断软组织供血状态从而评价病程变化的效果。目的：动态监测急性周围性面瘫患者针刺治疗前后头面部远红外热像的改变。方法：正常对照组为接受健康体检者40例,病例组为临床诊断为急性周围性面瘫的患者40例。应用重庆伟联公司生产ATIR-M301B非制冷焦平面医用远红外热像仪（热敏度为0.05℃）,在环境温度为20-25℃的检查室中,采取头、面部远红外热图。采用本机提供的分析软件,分别比较同一受检者针刺治疗前后头面部左、右两侧面颊、内眦、眶上、额及舌区等5个测温区远红外热像的温度差,并行统计学分析。结果与结论：正常组头面部远红外热像显示面颊、内眦、眶上、额部及舌区5个测温区左、右两侧的温度差异无显著性意义（P〉0.05）。远红外热像可较好地反映急性周围性面瘫患者针刺治疗前后头面部供血状态的变化,针刺治疗前急性期面瘫侧呈充血性改变,患侧面颊、内眦、眶上、额及舌区5个测温区温度明显高于健侧（P〈0.05~0.001）。针刺治疗后头面部远红外热像显示面颊、内眦、眶上、额部及舌区5个测温区左、右两侧的温度无明显差异（P〉0.05）。表明远红外热像可为临床诊断和治疗急性周围性面瘫提供无创的客观评价指标。

APA微囊对免疫细胞和细胞因子隔离效应的研究

测定海藻酸钠 多聚赖氨酸 海藻酸钠 (APA)微囊对免疫细胞和细胞因子的隔离效应。方法 :将NK细胞和IL 2、TNF α的活性测定方法用于微囊免疫隔离效果的评价。结果 :NK细胞对微囊化K5 6 2靶细胞的细胞毒实验表明 ,微囊可有效地保护囊内细胞不受NK细胞的杀伤作用 ;IL 2 (15 .4kD)和TNF α (5 1kD)可通过微囊膜进入囊内 ,并分别支持囊内IL 2依赖细胞的生存以及对微囊内的L92 9靶细胞发挥杀伤作用。结论 :APA微囊可有效地隔离细胞免疫排斥反应 ,但某些细胞因子可通过微囊膜 ,成为影响微囊化细胞在宿主体内生存的可能因素。

微囊化牛嗜铬细胞移植于脊髓蛛网膜下镇痛作用的研究

采用微囊化牛嗜铬细胞（ＢＣＣ）异种移植于大鼠和癌痛病人脊髓蛛网膜下方法，观察ＢＣＣ镇痛作用和海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠（ＡＰＡ）微囊对异种移植物的免疫保护作用。结果显示，移植后微囊组和非微囊组大鼠基础热痛阈和尼古丁激发热痛阈明显升高；微囊组８０％受试鼠的镇痛作用持续时间超过２７０天。将微囊化ＢＣＣ植入８例癌痛病人脊髓蛛网膜下，除１例镇痛效果不明显外７例缓解，减少或停止使用止痛药，镇痛作用持续时间＞６０天。表明ＢＣＣ异种移植于脊髓蛛网膜下可产生明显的镇痛作用，ＡＰＡ微囊具有良好的免疫隔离作用。

大规模猪肝细胞低温保存方法的建立

目的 建立大规模猪肝细胞的低温保存方法以满足生物型人工肝治疗的需要。方法 用酶法从中国实验用小型猪肝脏分离出猪肝细胞 ;加入本实验室配制的含有 10 %二甲基亚砜 (dimethylsulfoxide,DMSO)的营养液中 ;分别采用两种降温方法使 (12 )× 10 10 猪肝细胞保存在 - 196℃液氮中 ;1个月后复温 ,观察在同一条件下培养不同时间后猪肝细胞形态、存活率和白蛋白、尿素、葡萄糖合成功能及对利多卡因的转化功能。结果 用两种降温方法保存的肝细胞 ,复温后细胞的存活率均较高 (梯度降温组和程控降温组存活率分别较冻存前降低了 4 7%和 8 6 %) ,其中前者肝细胞的尿素、葡萄糖合成功能较后者高。结论 所建立的冻存方法简单易行 ,可保存大量的猪肝细胞。

急、慢性周围性面瘫患者头面部远红外热像的变化

目的了解急、慢性周围性面瘫患者头面部远红外热像的变化,为临床诊治周围性面瘫提供无创性客观评价指标。方法周围性面瘫的患者14例;接受健康体检者19例,作为正常对照组。应用ATIR-M301B非制冷焦平面医用远红外热像仪（热敏度为0.05℃）,在环境温度为20-25℃的检查室中,采取头、面部远红外热图。采用本机提供的分析软件,分别比较同一受检者左、右两侧面颊、内眦、眶上及额等测温区远红外热像的温度差,并行统计学分析。结果（1）头面部远红外热像显示正常组面颊、内眦、眶上及额部4个测温区左、右两侧的温度无明显差异（P〉0.05）。（2）头面部远红外热像的变化显示急性周围性面瘫患者患侧面颊、内眦、眶上及额等测温区温度明显高于健侧（P〈0.05,P〈0.001）。（3）3例病程为25d至1年的慢性周围性面瘫患者头面部远红外热像的变化显示慢性周围性面瘫患者患侧面颊、内眦、眶上及额等测温区的温度显示低于健侧。不同患者各测温区的温度呈现不同的差异,如2例患者呈现患侧下颌区、口区温度明显低于对侧;1例患者呈现患侧内眦区、眶上区及额区的温度明显低于对侧。结论远红外热像可较好地反映周围性面瘫患者头面部供血状态的变化,急性期面瘫侧呈充血性改变,慢性期面瘫侧呈缺血性改变。表明远红外热像可为临床诊治周围性面瘫提供无创的客观评价指标。