肺癌患者MTHFR基因多态性与抑癌基因过甲基化的关系

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与肺癌易感性及抑癌基因甲基化的关系。方法采用病例对照研究的方法 ,以限制性片段长度多态性方法 ,检测了93例肺癌患者及106例对照的MTHFRC677T基因型;用巢式甲基化特异性PCR(nMSP)法检测肺癌患者外周血血清中p16及MG-MT基因的甲基化。结果 MTHFRC677TC/C,C/T,T/T基因型分布频率在病例组中分别为:29%、49.5%、21.5%,在对照组中分别为:36%、51%、19%,频率分布差异无统计学意义。病例组中p16甲基化检出率为68%(63/93),MGMT甲基化检出率为52%(48/93)。各基因型之间的p16与MGMT基因甲基化阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MTHFR基因C677T多态性与肺癌发生之间未发现相关,MTHFR变异基因型(C/T,T/T)并非导致p16与MGMT基因甲基化的直接原因。

CYFRA21-1和CA-125联合检测在非小细胞肺癌诊断中的意义

目的研究糖链抗原-125(CA-125)和细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA 21-1)联合检测在非小细胞肺癌(N SCLC)诊断中的临床意义。方法采用放射免疫法检测了83例肺癌患者、28例肺部良性疾病患者及25名健康体检者的血清CA-125和CYFRA 21-1。结果肺癌组血清CA-125和CYFRA 21-1含量显著高于正常对照组和肺良性疾病组;CYFRA 21-1在肺鳞癌中表达水平最高,CA-125在肺腺癌中表达水平最高;CA-125和CYFRA 21-1联合检测肺癌的敏感性为83.9%,特异性为80%。结论联合检测CA-125和CYFRA 21-1对于临床诊断肺癌,特别是非小细胞肺癌(N SCLC)具有重要临床价值。

日本血吸虫童虫早期诊断抗原模拟表位的初步筛选研究

目的:利用噬菌体随机12肽库技术筛选日本血吸虫感染早期诊断抗原。方法:用日本血吸虫感染后21d兔血清从噬菌体12肽库中经3轮筛选,有效地富集与早期感染兔血清有亲和力的噬菌体克隆。随机挑取11个单克隆分别纯化、扩增,随后采用ELISA、DOT-ELISA等检测方法,挑选出与早期感染兔血清有高亲和力的噬菌体克隆。结果:挑选出3个与感染后21d兔血清具有高亲和力的噬菌体单克隆。结论:用感染后21d兔血清从噬菌体随机12肽库中能筛选到日本血吸虫童虫早期诊断抗原模拟表位。

错配杂交化学发光法检测MTHFR基因多态性

目的建立一种基于错配杂交及化学发光技术检测亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolatere-ductase,MTHFR)基因多态性的新方法。方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补。将2条探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,根据2条探针的发光值之比确定样品的基因型。结果用本法随机检测50例DNA样品,结果3种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致。结论本方法操作简便、快速且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测。

巢式甲基化特异性PCR检测p16基因甲基化

目的利用巢式甲基化特异性PCR(Nested-MSP,nMSP)法检测非小细胞肺癌患者血清中p16基因的甲基化状态,探讨其在肿瘤早期诊断中的意义。方法利用nMSP法检测了65例非小细胞肺癌患者(其中鳞癌48例,腺癌17例)血清中p16基因的甲基化状态。结果在65例非小细胞肺癌患者血清中,p16基因的甲基化百分率为72.3%(47/65);nMSP法比普通的MSP法具有更高的灵敏度。结论巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于基因甲基化分析。