杜仲叶免疫调节机制的网络药理学分析及验证

基于网络药理学及小鼠免疫抑制模型方法探讨杜仲叶免疫调节的作用机制。该研究通过TCMSP数据库筛选出3个杜仲叶活性成分,Uniprot和Swiss Target数据库预测到306个相关联的靶基因,经与OMIM、GeneCards数据库对比,获得105个免疫失调与杜仲叶的交集基因,通过Cytoscape3.8.2软件构建“活性成分-基因”网络。利用STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用分析,构建蛋白质-蛋白质相互作用网络(PPI),CytoNCA进行网络拓扑学分析,筛选出21个核心靶点,并对核心靶点进行基因本体(GO)富集分析与KEGG通路分析。结果发现,杜仲叶中的山奈酚、槲皮素、绿原酸等主要化合物通过调节肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6)、血管内皮生长因子A (VEGFA)、白细胞介素1β(IL^(-1)β)等关键靶点,参与IL^(-1)7、肿瘤坏死因子信号通路等,从而发挥免疫调节作用。通过腹腔巨噬细胞体外试验和环磷酰胺免疫抑制体内试验探讨杜仲叶提取物的免疫调节作用,结果显示,1 000~5 000μg·mL^(-1)浓度的杜仲叶提取物可促进腹腔巨噬细胞增殖和吞噬能力;与模型组相比,杜仲叶提取物可增加小鼠免疫器官指数、吞噬指数、外周血白细胞和淋巴细胞数量,增强迟发型超敏反应(DTH)的耳廓肿胀。本研究展现了杜仲叶免疫调节多成分、多靶点作用的特点,为杜仲叶在畜禽健康养殖中的应用提供了科学依据。

杜仲叶提取物及发酵物对鸡骨发育的影响

为了研究日粮中添加杜仲叶提取物和杜仲叶发酵物对鸡骨发育的影响。试验取体重40 g左右、2日龄的雏鸡,随机分为对照组、杜仲叶提取物添加组、杜仲叶发酵物添加组3组,每组10只,试验期60 d。试验结束后剖杀,取胫骨进行CT检测、冰冻切片及染色,显微镜下观察形态结构的变化,用CT图像分析软件测定骨组织形态计量学参数。结果表明:杜仲叶提取物添加组和杜仲叶发酵物添加组与对照组的CT值相比显著升高(P<0.05),骨小梁面积占比显著升高(P<0.05);骨小梁间距极显著降低(P<0.05)。采用电感耦合等离子体质谱仪测定骨内微量元素发现,与对照组相比,2个试验组胫骨中的镁、钙、锌的含量均显著增高(P<0.05),杜仲叶发酵物添加组与对照组相比胫骨中的铜含量显著提高(P<0.05)。上述结果说明在鸡日粮中添加杜仲叶提取物和杜仲叶发酵物均可以改善鸡的骨发育和骨代谢,提高鸡骨内微量元素含量,使骨重建活动增加,一定程度上改善鸡的健康状况。

绞股蓝水煎剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响

本研究通过不同给药途径、不同给药剂量和联合用药探讨绞股蓝水煎剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响。结果发现,绞股蓝水煎剂各剂量组的吞噬百分率、吞噬指数均显著高于对照组（P〈0.05）,实验组各组间吞噬指数差异不显著;巨噬细胞吞噬百分率腹腔注射效果显著高于皮下和灌胃（P〈0.05）,皮下注射效果与灌胃效果相比差异不显著,各组间吞噬指数相比较差异不显著;环磷酰胺-生理盐水组吞噬百分率显著低于生理盐水组（P〈0.05）,绞股蓝水煎剂-环磷酰胺组吞噬百分率显著提高,其吞噬指数也高于生理盐水-环磷酰胺组和生理盐水组。结果表明,绞股蓝水煎剂具有促进吞噬细胞吞噬的能力,无显著的剂量差别;腹腔注射对巨噬细胞吞噬能力影响最显著。提示绞股蓝水煎剂具有很好的促进机体进行免疫作用,能提高吞噬细胞的活性,增强吞噬细胞吞噬能力,有效缓解环磷酰胺的免疫抑制作用。

元宝枫籽对小鼠肠道菌群生态的影响

元宝枫是我国特有树种,其籽含有丰富的不饱和脂肪酸和多种营养物质。本研究旨在探究元宝枫籽对小鼠肠道菌群组成结构的影响以及对有害菌的抑制作用。选取8周龄的昆明小鼠,元宝枫籽饲喂添加量为1.5 g/d,连续饲喂2周后采集直肠粪便进行肠道菌群的高通量测序分析,并且全程记录体质量变化。通过对小鼠肠道菌群分析后发现:实验组与对照组小鼠肠道菌群的α多样性并未表现出显著差异;通过β多样性分析发现实验组与对照组数据发生显著性分离(P<0.05)。通过对组间分类学水平数据对比发现:相比于对照组,实验组中厚壁杆菌门的相对丰度增高而拟杆菌门的相对丰度下降;比较组间厚壁杆菌门和拟杆菌门相对丰度比值的差异变化,发现实验组小鼠中的比值高于对照组(P=0.063)。通过线性判别分析效应量发现:相比于对照组,实验组中Staphylococcus和Acinetobacter的丰度要显著低于对照组,表明元宝枫籽对机会性致病菌有一定的抑菌作用。结果表明,元宝枫籽可以影响小鼠肠道菌群的结构组成,同时对机会性致病菌有一定的抑菌作用。

奥尼罗非鱼肠道杯状细胞分布及分型观察

本研究利用石蜡切片结合阿利新蓝-高碘酸Schiff(AB-PAS)和醛品红-阿利新蓝(AF-AB)染色法研究奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus♀×Oreochromis aureus♂)肠道内杯状细胞的分布与分型。结果发现,奥尼罗非鱼肠道黏膜层较厚,有大量肠绒毛突起,肠绒毛的数量从前肠到后肠逐渐减少。杯状细胞主要位于肠绒毛上皮细胞间,形状大多为椭圆或近似圆形,也有呈细长梭形。经统计分析可知,肠道黏膜上皮单位面积中杯状细胞数量从前肠到后肠逐渐增多,前肠、中肠、后肠杯状细胞平均数量分别为(230.0±4.9)个/mm^2、(287.9±7.5)和(336.7±10.0)个/mm^2,具有较大差异,三者间两两相比差异显著(P<0.05)。奥尼罗非鱼肠道杯状细胞以中性-酸性双染为主,酸性杯状细胞在肠道各段所占比例较低,且以硫酸化亚型杯状细胞为主,缺少羧酸化亚型杯状细胞。

玻璃化冷冻对小鼠卵母细胞超微结构的影响

以小鼠卵母细胞作为试验材料,通过透射电镜方法观察玻璃化冷冻对卵母细胞超微结构的影响,初步探讨玻璃化冷冻损伤机理。结果发现:暴露组卵母细胞除有少量线粒体受到损伤,变得粗糙模糊外,其它无明显变化;冷冻组卵母细胞冻融后有不同程度的结构损伤,主要表现为胞质中的中间纤维解体,微绒毛变短甚至缺失,线粒体粗糙模糊,胞质外围皮质颗粒数量减少,透明带变得模糊不清、有的地方甚至已经破裂,细胞基质出现大量空泡,并形成有线粒体-空泡复合体。结果提示,玻璃化冷冻会对卵母细胞超微结构产生一定的损伤,这主要是由于玻璃化冷冻过程中机械损伤造成的。