基于聚硫堇/亚甲基蓝和纳米金放大的免疫传感器检测贝类毒素大田软海绵酸

采用聚硫堇（PTH）修饰电极为传感界面提供一个生物修饰功能基质膜,借助纳米金（GNPs）的导电性、生物相容性与高比表面积特性实现抗体的有效固定,并以亚甲基蓝（MB）为电子媒介加速电极表面电化学反应的电子传递,构建了一种高灵敏的非标记电化学免疫传感器,用于贝类毒素大田软海绵酸（OA）的检测.当分子结构中含有羧基和酚基的OA与其抗体特异性结合后,生成以阴离子形式存在的抗原-抗体复合物,阻碍了传感器表面电子的传递,导致峰电流下降.利用免疫反应前后峰电流的变化,可对OA进行特异性识别和准确定量.在优化实验条件下,OA浓度的对数在0.2～100 μg/L范围内与其峰电流的变化值（△I）呈线性相关,线性方程为△I=1.721 7＋1.083 6lgρ,相关系数为0.992 0,检出限为0.1μg/L.该免疫传感器重现性好、特异性强,用于实际贝类样品的测定,回收率为85.3％～ 112％.

磷酸酶抑制比色法快速测定贝类中腹泻性贝毒素

基于腹泻性贝毒素（Diarrheticshellfishpoisoning，DSP）的致腹泻性组分大田软海绵酸（okadaicacid，OA）及其衍生物鳍藻毒素（dinophysistoxins，DTXs）能抑制蛋白磷酸酶活性的特点，建立了快速测定贝类中DSP的磷酸酶抑制比色分析方法。采用对硝基苯磷酸二钠（p-nitrophenylphosphatedisodium，p-NPP）为底物，其与蛋白磷酸酶2A（proteinphosphatase2A，PP2A）反应生成的黄色水解产物在碱性条件下于405nm波长处有强烈的吸收峰，根据吸光度值计算抑制剂的浓度。酶抑制法继承了小鼠生物法能建立剂量一效应关系的优势，直接反映毒素的相对毒性大小，测定的是DSP毒素致腹泻性成分的总量，以OA浓度计。本研究优化了样品前处理方法并考察了基质浓度的影响。方法的筛选检出限为80μg／kg。采用该方法进行加标回收实验，回收率在90．43％118．52％范围内，相对标准偏差（RSD）为6．85％～13．93％。该方法操作简便、快捷，回收率高，重现性好，可作为快速筛查工具用于贝毒的日常监控。