情景模拟教学在血液科住院医师规范化培训中的方法学探讨

住院医师规范化培训是年轻医师提升岗位胜任力、掌握临床核心能力的毕业后重要教育阶段。血液内科常因疾病复杂、学员轮转时间短,成为住院医师规范化培训中专业能力培养的难点。本文对住院医师规范化培训中引入的情景模拟教学进行了一些方法学的归纳和探讨,以期为血液内科住院医师规范化培训提供实践依据与经验分享。

正常人外周血有核细胞膜表面G-CSFR的定量测定

目的:定量测定正常人外周血有核细胞膜表面G-CSFR的表达密度。方法:以荧光定量试剂盒作参照,利用荧光标记的抗G-CSFR单克隆抗体结合流式细胞技术测定22例健康人的外周血标本。结果:测定结果显示,中性粒细胞G-CSFR表达密度为(2 943±417)(antibodies bound per cell,ABC),单核细胞为(3 755±2 575)ABC,淋巴细胞为(996±369)ABC,CD3+T淋巴细胞为(2 787±946)ABC,CD19+B淋巴细胞为(10 112±6 345)ABC。中性粒细胞、单核细胞与T淋巴细胞间G-CSFR表达密度无统计学差异,淋巴细胞与其他细胞间及B淋巴细胞与其他细胞间G-CSFR表达密度存在统计学差异(P<0.05)。结论:研究描述了外周血有核细胞G-CSFR表达特点,将为今后同类研究提供参考。同时所用测定方法能够敏感、真实、客观地反映出各类细胞G-CSFR表达情况和规律,同传统的利用放免法相比,更为安全、便捷。

TRAIL真核表达治疗肝细胞癌作用的研究

目的 :构建鼠源TRAIL(mTRAIL)真核表达质粒。研究其体内、外表达对肝癌细胞的诱导凋亡作用 ,抑制肝癌生长作用及与重组人FN多肽真核表达质粒pCH5 10协同抑制肝癌生长作用。方法 :采用RT PCR及重组DNA技术构建mTRAIL真核表达质粒 ;体内、外进行基因转染 ;用流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡率 ,用TdT mediateddUTPnickendlabeling (TUNEL)法及免疫组织化学技术检测肝癌细胞凋亡 ;小鼠实体瘤块模型研究基因转染抑制肝癌生长作用。结果 :用RT PCR方法自小鼠脾细胞RNA扩增出TRAIL基因的全长cDNA ,并克隆至真核表达载体pcDNA3 .1中获重组质粒pX1;以pX1转染BHK细胞株后攻击肝癌细胞株H2 2细胞 ,可检测到肝癌细胞凋亡 ;肌肉内注射转染质粒DNApX1,通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制肝癌生长 ;pX1与FN多肽真核表达质粒pCH5 10有协同抑制肝癌生长作用。结论 :质粒pX1可在细胞及小鼠体内表达 ;体内、外表达可诱导肝癌细胞凋亡并可通过该机制抑制肝癌生长 ;与FN多肽真核表达质粒pCH5

Blinatumomab治疗成人复发/难治性费城染色体阴性B系急性淋巴细胞白血病的一项系统综述和单个率的Meta分析

目的系统评价Blinatumomab在患有复发/难治性费城染色体阴性B系急性淋巴细胞白血病(Ph-B-ALL)的成人中的疗效和安全性,为临床实践及研究提供参考。方法计算机检索Pubmed、Embase,WebofScience的随机对照试验(RCT),前瞻性研究,回顾性研究,检索截止时间2022年10月31日。由2名评价员按照纳入与排除标准筛选文献和提取资料,采用Stata17.0软件进行Meta分析。结果最终纳入9篇文献,包括763例患者,其中RCT2篇,前瞻性研究2篇,回顾性研究5篇。患者的CR,ORR(CR/CRi/CRh),MRD阴性率分别为35%(95%CI0.31~0.38),47%(95%CI 0.42~0.51),71%(95%CI0.69~0.79)。患者的中位OS和RFS分别为8.29(95%CI6.62~9.95)个月和5.53(95%CI 3.74~7.32)个月。最常见的不良事件是血液学毒性和感染。结论Blinatumomab治疗复发/难治性成人Ph-B-ALL安全且有效。

鼠源TRAIL真核表达质粒的构建及其抑瘤效应的初步观察

采用 RT- PCR自小鼠脾细胞 RNA中扩增出鼠 TRAIL 基因的全长 c DNA,利用 DNA重组技术将其插入到真核表达载体 pc DNA3.1中获得重组质粒 p X1。经酶切鉴定及序列分析 ,表明成功构建 TRAIL 的真核表达质粒。通过直接肌肉内注射进行基因转染 ,p X1具有诱导肝癌细胞凋亡、抑制肝癌生长的作用。表明 TRAIL

Y_(2)O_(3)对WC/Ni60梯度复合涂层组织及性能的影响

利用激光熔覆原位生成方法在H13钢表面制备了不同Y_(2)O_(3)含量的WC/Ni60复合涂层,分析其宏观形貌、显微组织、显微硬度得出最佳Y_(2)O_(3)添加量,分析了最佳Y_(2)O_(3)添加量的WC/Ni60梯度复合涂层的物相组成、显微组织、显微硬度及磨损机理。结果表明,复合涂层的显微硬度随Y_(2)O_(3)含量的增加呈先上升后下降的趋势;当Y_(2)O_(3)含量为1.5%时,涂层的宏观质量最好,晶粒得到细化,显微硬度最大;当Y_(2)O_(3)含量继续增加后,涂层中的WC颗粒再次变大,显微硬度有所降低。稀土掺杂梯度复合涂层较未添加稀土的梯度复合涂层厚度有所减小,显微组织形态和分布均发生了一些变化,且内部增强相颗粒更加细密均匀,棱角有所钝化,各层显微硬度从上至下分别增加49.2、75.78、72.78HV0.5,不同时间下的磨损量均有所减少,磨损机理仍为黏着磨损、脆性剥落和磨粒磨损。

HLA半相合造血干细胞移植治疗恶性血液病的临床观察

背景与目的:异基因造血干细胞移植(allogeneichematopoieticstemcelltransplantation,allo-HSCT)是目前治疗恶性血液系统疾病的最有效手段。但仅有25%～30%的患者能找到人类白细胞抗原(humanleukocyteantigen,HLA)相合的亲缘供者;在无关人群中找到相合供者的概率是1/5万～1/10万,甚至更低。若进行HLA半相合造血干细胞移植(hematopoieticstemcelltransplantation,HSCT),则有90%的患者能找到供者,本文旨在探索HLA半相合HSCT治疗恶性血液病的可行性。方法:25例恶性血液病患者进行HLA半相合(其中单倍体20例)的亲缘供者HSCT。采用延长、强化联合免疫抑制促进植入及使用抗胸腺细胞球蛋白(antithymocyteglobulin,ATG)和/或加舒莱(抗CD25单抗)加强预防移植物抗宿主病(graft-versus-hostdisease,GVHD),粒细胞集落刺激因子(granulocytecolonystimulatinfactor,G-CSF)动员的骨髓(bonemarrow,BM)或加外周血干细胞(peripheralbloodstemcell,PBSC)混合移植方案。结果:所有患者均获得造血重建及达完全供者植入。21例(21/25)发生急性GVHD(aGVHD),其中Ⅰ度8例,Ⅱ度6例,Ⅲ度2例,Ⅳ度5例(其中3例为同胞部分相合),Ⅱ～Ⅳ度和Ⅲ～Ⅳ度aGVHD累积发生率分别为48.0%和28.6%。12例(12/25)发生慢性(c)GVHD,均为局限性。16例患者无病生存,1年预计无病生存率(disease-freesurvival,DFS)为(64.00±2.98)%,1年预计总生存率(overallsurvival,OS)为(64.0±3.08)%。9例死亡,其中1例死于复发,8例死于移植相关合并症,其中肺部感染4例,Ⅳ度GVHD3例,白质脑病1例。结论:HLA配型半相合的HSCT是治疗无亲缘和无关供体全相合的高危恶性血液病的有效方法,但风险较大,需在严密监测下慎重使用。

流式细胞术对急性白血病微小残留病的检测及意义

目的探讨流式细胞术(FCM)检测追踪急性白血病(AL)患者骨髓微小残留病(MRD)变化的临床意义。方法应用FCM以白血病细胞(LC)特异分化抗原为标志监测43例初治AL患者MRD,并与传统骨髓形态学结果进行比较。结果预测各组患者复发的敏感性和特异性分别为:完全缓解(CR)1～5个月组为100%(13/13)和76.6%(23/30),CR6～11个月组为100%(4/4)和87%(20/23),CR12个月～组为100%(2/2)和100%(13/13),对所有第1次受检MRD为阳性随后确认为复发的患者,比骨髓像诊断复发平均提前4个月。43例初治AL患者CR时MRD定量检测结果显示:(1)MRD阴性25例,其中16例在追踪期内亦持续阴性;9例转阳性,经强化疗后再转阴,但6例复发,其中3例发生了中枢神经系统白血病(CNSL);(2)MRD阳性18例,其中10例CR时MRD平均值为2·20%,在缓解期MRD值逐渐减少,直至转阴;8例CR时MRD值较高或持续高值,此8例均复发;(3)骨髓复发组(19例)CR时MRD定量值平均为0·48%,未复发组(24例)为0·06%(P<0·05)。结论采用FCM检测AL的MRD,具有简单、快速有效、敏感和创伤小的优点,可比传统骨髓形态学更早提示复发。尤其是采取连续性定期监测、动态观察的方式,会进一步增加检测结果的准确性,对提示复发、预测预后及指导个体化治疗有重要意义。

清单管理在住院医师情景模拟教学中的应用探讨

住院医师规范化培训是医学生毕业后教育的重要组成,对提高医师临床胜任力、保障医疗质量和患者安全极为重要,是国家继续医学教育(continuing medical education,CME)中举足轻重的战略部署。

石家庄市脑卒中社区康复协作技术网络的建设与效果研究

目的介绍石家庄市第八医院康复科和社区卫生服务中心合作建立脑卒中社区康复协作技术网络的具体方法和工作流程,并探讨该技术网络对社区脑卒中患者康复状况的影响。方法在石家庄市、区各级残联和社区卫生服务管理中心的支持和协调下,由石家庄市第八医院康复科和石家庄市10家社区卫生服务机构合作建立了较完善的脑卒中社区康复协作技术网络,自行设计了"爱脑康复手册-脑卒中康复档案",制定了脑卒中社区康复协作工作流程,统一了脑卒中社区评估方法及治疗技术,并积极进行康复知识宣教。对该技术网络运行1年前后合作社区脑卒中患者的康复知识知晓情况、接受康复情况及生活质量改善情况进行了调查比较。结果脑卒中社区康复协作技术网络运行1年前后,合作社区脑卒中患者的康复知识知晓情况、接受康复情况比较差异均有统计学意义(P<0.01);有无接受康复治疗的脑卒中患者的生活质量比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论石家庄市脑卒中社区康复协作技术网络对社区脑卒中患者具有良好的康复管理效果。

化疗联合重组Endostatin对小鼠种植瘤的治疗作用

目的 :了解化疗联合重组Endostatin对小鼠种植瘤的治疗作用 ,为肿瘤的免疫治疗提供条件。方法 :构建小鼠En dostatin原核表达质粒 ,在大肠杆菌表达小鼠Endostatin融合蛋白。分离纯化后 ,与丝裂霉素C联合应用 ,治疗种植在小鼠腿部肌肉内的小鼠肝癌H2 2肿瘤。观察瘤重 ,免疫组化检测肿瘤血管密度和肿瘤坏死情况。结论 :单纯应用重组Endostatin治疗种植瘤即产生明显的抑制作用 ,和化疗合用后 ,抑制作用更强 ,肿瘤血管密度减少 ,肿瘤细胞大量坏死。

去甲基化药物联合Venetoclax与半量预激类方案治疗老年初诊急性髓系白血病的疗效比较

目的:比较去甲基化药物(HMA)联合Venetoclax(VEN)方案与HMA联合半量预激类(CAG-like)方案治疗不适合接受强化疗的老年初诊急性髓系白血病患者的临床疗效及安全性。方法:回顾性分析苏州大学附属第一医院2019年4月至2020年10月43例初诊不适合接受强化疗的老年急性髓系白血病患者的临床资料,16例接受HMA-VEN方案治疗,27例接受HMA-CAG-like方案治疗。比较两组患者的缓解率、早期死亡率及生存情况,并根据HCT-CI评分分组,比较不同分组中两种不同方案对患者疗效及生存的影响,进一步对患者预后进行分析。结果:治疗1个疗程后,HMA-VEN组和HMA-CAG-like组的总缓解率分别为81.3%(13/16)和51.9%(14/27),比较差异具有统计学意义(χ^(2)=4.650,P=0.045)。HMA-VEN组的中位生存时间尚未达到,HMA-CAG-like组中位生存时间为11.2个月,HMA-VEN组老年急性髓系白血病患者有较长的总生存期(OS)(P=0.055)。两组患者均无肿瘤溶解综合征发生,其主要不良反应为消化道反应、骨髓抑制和感染。HMA-VEN组粒细胞缺乏性感染、肺部感染、血小板输注量显著低于HMA-CAG-like组(P<0.05),而两组粒细胞缺乏时间、红细胞输注量相当(P>0.05)。HMA-VEN组早期死亡1例,HMA-CAG-like组因肺部感染、呼吸衰竭、脑出血、肺泡出血等早期死亡8例,死亡率显著高于HMA-VEN组(P=0.043)。在全部患者中,HCT评分0-2分组和≥3分组的OS比较有显著性统计学差异(P=0.033)。将HMA-CAG-like组患者以HCT评分分组,评分≥3分组有着更差的预后(P=0.01),而HMA-VEN组以HCT评分分组的两组间预后比较无统计学差异(P=0.681)。在0-2分组中,接受HMA-VEN方案的患者9例、HMA-CAG-like方案的患者22例,两者OS比较无统计学意义(P=0.281);而在≥3分组中,接受HMA-VEN方案的患者7例、HMA-CAG-like方案的患者5例,接受HMA-VEN方案的患者有着更长的OS(P=0.015)。结论:Venetoclax联合HMA能够获得更高的治疗反应率、更低的早期死亡率以及更长的总生存期,尤其是在患者合并症多、耐受性差的情况之下。

母供子非去T细胞性单倍体异基因造血干细胞移植治疗恶性血液病

目的：对18例恶性血液病进行母供子非去T细胞性单倍体异基因造血干细胞移植（Allo-HSCT）治疗，探讨其疗效及毒性反应。方法：6例急性髓系白血病（AML-M2 3例，AML-M4 1例，AML-M5b 2例），3例慢性粒细胞白血病（伴骨髓纤维化1例），8例急性淋巴细胞白血病（ALL），非霍奇金淋巴瘤（Ⅳ期B组）1例，以母亲为供者进行非去T细胞性单倍体Allo-HSCT。供者动员方案：G-CSF 300μg／12h×5d后采集造血干细胞。输注D34^＋细胞（3．58～8．90）×10^5／kg。预处理方案为：MeCCNC 250mg·m^-2·d^-1×1d，Ara-C4g·m^-2·d^-1×2d，Bu4mg·kg^-1·d^-1×3d，CTX1．8g·m^-2·d^-1×2d。ALL患者以全身放疗（TBI）代替Bu。以CsA、MMF、MTX和ALG预防移植物抗宿主病（GVHD）。结果：所有患者均顺利完成预处理。移植后发生急性GVHD16例、慢性GVHD10例，出血性膀胱炎1例。全部患者在移植后10～20d获造血重建。18例患者中12例存活。结论：非去T细胞性单倍体Allo—HSCT是治疗恶性血液病的一种安全、有效的方法；同时提示在以后的单倍体异基因造血干细胞移植中优先选择母亲供体，对降低GVHD的严重程度、提高移植成功率是有帮助的。

先天性中性粒细胞减少症的诊治

本研究探索先天性中性粒细胞减少症(CN)的合理化诊治流程及策略。以1例CN患者为研究对象,收集其临床资料、实验室检查结果,并按序检测ELA2、GFI1、HAX1及WASp致病基因突变情况,而后检测其中性粒细胞的粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)的表达水平,并评价G-CSFR的突变发生情况。依上述步骤对患者进行临床及病因学诊断并实施随访。结果表明,参照诊断标准该患者诊断为无遗传背景的非综合征性CN;ELA2、GFI1、HAX1及WASp基因测序分析均无突变发生;患者中性粒细胞表面G-CSFR表达正常,G-CSFR胞内段无获得性截短性突变。结论:本研究以1例CN患者为研究对象,探索了CN的合理化诊治策略及流程,并证实该患者为无已知致病突变基因存在的散发的非综合征性CN病例。

1例儿童先天性粒细胞减少症的基因诊断

目的应用基因诊断方法进一步提高对儿童先天性粒细胞减少症(CN)的认识和诊断水平。方法以1例儿童CN患者为研究对象,收集其临床资料、实验室检查结果,按序检测ELA2、GFI1、HAX1及WASp致病基因突变情况。依上述步骤对患儿分别进行疾病的临床及基因诊断并随访。结果参照诊断标准该患儿诊断为无遗传背景的散发性非综合征性CN;基因检测显示其携带已经报道的ELA2基因突变:c.164G>A;此外患儿中性粒细胞表面G-CSFR表达正常,G-CSFR胞内段未发现获得性截短性突变。结论基因突变检测证实1例儿童CN为ELA2基因突变所致,为该患儿未来的分组临床研究及基因治疗提供依据。

小鼠内皮抑制素原核表达质粒的构建及表达

内皮抑制素具有强烈的抑制新生血管形成的作用 ,其主要在肝脏合成。提取小鼠肝细胞总 RNA,设计合适的引物 ,用 RT- PCR扩增出小鼠内皮抑制素 c DNA片段 ,插入原核表达载体 p RSET- A中 ,构建出重组质粒 p RSET- ES。将其转化入大肠杆菌 DH5 α中扩增 ,质粒酶切筛选 ,DNA测序予以证实。重组质粒转化入大肠杆菌 BDPS中 ,经 IPTG诱导 ,SDS- PAGE检测到约 19.

移植前状态对难治复发急性淋巴细胞白血病异基因造血干细胞移植预后的影响

目的探讨难治复发急性淋巴细胞白血病（acute lymphocytic leukemia,ALL）的缓解状态对异基因造血干细胞移植（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT）预后的影响。方法回顾性分析我研究所不同缓解状态下行allo-HSCT的52例难治复发ALL患者,其中19例处于未缓解（non-remission,NR）状态,33例达到第2次及以上完全缓解（complete remission,≥CR2）。所有患者均采用清髓性预处理,其中改良白消安加环磷酰胺37例,全身照射加环磷酰胺14例。结果除1例患者早期死亡外,其余51例均获得造血重建,NR和≥CR2患者100 d内移植相关死亡为10.5%和12.1%（P=1.000）。移植后急性移植物抗宿主病（graft versus host disease,GVHD）发生率为52.6%和57.6%（P=0.730）,其中Ⅰ~Ⅱ度为42.1%和33.3%（P=0.527）,Ⅲ~Ⅳ度为10.5%和24.3%（P=0.399）,慢性GVHD发生率为41.6%和57.9%（P=0.660）。中位随访时间为12（1.8~44.5）个月,26例患者无白血病生存至今。NR与≥CR2患者的预计2年总生存（overall survival,OS）和无白血病生存（leukemia-free survival,LFS）分别为42.6%、45.7%（P=0.740）和46.3%、46.2%（P=0.998）,累积复发率为47.0%、34.3%（P=0.425）。影响预后的单因素和多因素分析显示,移植前疾病缓解状态与生存无关,移植后发生慢性GVHD才是影响OS、LFS的独立预后因素。结论移植前NR患者与≥CR2患者相比,移植预后无统计学差异,提示allo-HSCT挽救性治疗NR状态下难治复发的ALL是可行的。

造血干细胞移植后神经系统并发症的临床分析

目的：分析造血干细胞移植（HSCT）后神经系统（NS）并发症的临床特点,评估HSCT后患者发生NS并发症的相关危险因素,以提高HSCT后NS并发症的诊断和治疗,改善患者预后。方法：回顾性分析2012年8月至2015年8月87例HSCT后发生NS并发症患者的临床资料。结果：87例HSCT伴NS并发症患者中,中枢性神经系统并发症占71.3%（62/87）、外周性占28.7%（25/87）。NS并发症的原发病中,急性淋巴细胞白血病（ALL）占34.5%（30/87）、急性髓性白血病（AML）占23.0%（20/87）、慢性髓性白血病（CML）占12.6%（11/87）、其他类型白血病和淋巴瘤占9.2%（8/87）、再生障碍性贫血占13.8%（12/87）、骨髓增生异常综合征占6.9%（6/87）;移植相关因素中,人类白细胞抗原（HLA）全相合19例（21.8%）、半相合53例（60.9%）、无关相合15例（17.2%）,分别有16.1%、69.4%、14.5%发生中枢神经并发症,36.0%、40.0%、24.0%发生外周神经并发症（χ-2=6.682,P=0.034）。NS并发症的其他相关因素中,儿童组和成人组发生率分别为26.4%（23/87）和73.6%（64/87,P=0.435）;伴有移植物抗宿主反应（GVHD）或感染患者的NS并发症的发生率分别为69.0%（60/87）和59.8%（52/87,P〈0.05）。87例中,伴中枢神经并发症者发病时间1-726（中位数49）d,伴外周神经并发症者发病时间20-694（中位数80）d。87例患者的病死率为33.3%（29/87）,其中伴中枢神经并发症者病死率占93.1%（27/29）,伴外周神经并发症者病死率占6.9%（2/29,P〈0.05）。结论：HSCT后中枢性神经系统并发症较外周性发病率高,发病时间短,病死率高;HSCT后NS并发症与HLA配型、GVHD和感染有关。