缺Zn幼年大鼠海马亚细胞水平Zn变化的研究

采用Ｔｉｍｍ＇ｓ组化法，电镜下观察了缺Ｚｎ幼年大鼠海马亚细胞水平Ｚｎ的分布和反应颗粒数目的变化。结果：Ｚｎ浓集分布于正常大鼠海马苔藓纤维终末的囊泡内，在突触间隙内也见有Ｚｎ存在；缺Ｚｎ状态下，海马神经元亚细胞水平Ｚｎ反应颗粒数目明显减少。本实验从一定程度证明了：①海马神经元的Ｚｎ参与神经元的递质释放调节与兴奋传递过程；②缺Ｚｎ海马苔藓纤维终末囊泡内Ｚｎ的丢失，可能是引起海马Ｚｎ的灰度值降低和发生一系列功能变化的关键。

大鼠海马CA3区锌的分布及缺锌后亚细胞水平锌的变化

通过液体缺锌饲料灌胃的方式建立单纯缺锌模型，采用Ｔｉｍｍ′ｓ组化法，电镜下观察海马神经元亚细胞水平锌的分布和反应颗粒数目的变化。结果见：（１）．锌浓集分布于正常大鼠海马苔藓纤维终末的囊泡内，其中以ＣＡ３区放射层最多，其次是分子层和锥体层，在突触间隙内也见有锌存在。（２）．缺锌时，海马神经元亚细胞水平锌的分布模式与对照组无区别，但锌反应颗粒数目明显减少。本实验从一定程度证明了：（１）．海马神经元的锌参与神经元的传递过程；（２）．缺锌时，海马神经元苔藓纤维终末囊泡内的锌减少。这种变化可能是缺锌触发海马神经元发生一系列功能和结构变化的重要原因之一。

冷诱导RNA结合蛋白在急性脑外伤后的表达变化及其促炎作用研究

目的:观察小鼠急性脑外伤后,冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)的表达变化情况及其对炎症因子的影响,旨在探讨CIRP在神经系统损伤性疾病中的作用,为该疾病的临床治疗提供新的思路。方法:成年小鼠随机分为正常组(n=10)和手术组(n=36),用液压打击法建立小鼠急性脑外伤模型,利用HE染色法观察模型建立后小鼠大脑的损伤情况;损伤后24、48 h时间点,采用实时PCR检测大脑损伤部位CIRP和炎症因子肿瘤坏死因子α(TNFα)m RNA的表达,免疫组织化学法检测CIRP蛋白水平的表达;分析CIRP表达变化与炎症因子TNFα相关性。结果:急性脑外伤后小鼠脑损伤部位的CIRP m RNA及蛋白表达水平呈上升趋势,CIRP表达与炎症因子TNFα表达正相关。结论:CIRP可能参与了小鼠脑外伤的炎性反应过程。

SOCS-3过表达对红系基因表达的影响

目的:建立能稳定、高效表达细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)的细胞株SOCS-3-K562,为探讨SOCS-3在造血发育中的作用奠定基础。方法:通过重组慢病毒系统感染人红白血病细胞K562,采用流式细胞分选术,根据绿色荧光蛋白表达情况,获得稳定高表达SOCS-3的K562细胞;利用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹实验,比较分选获得的细胞与对照细胞的SOCS-3表达差异;利用半定量PCR检测SOCS-3表达升高对K562红系发育相关基因GATA-1、β-globin表达水平的影响。结果:构建了人SOCS-3慢病毒表达载体;与对照组相比,通过流式细胞分选获得的K562细胞的SOCS-3基因表达水平升高8.05倍,蛋白表达水平升高3倍;SOCS-3表达升高后,K562细胞的GATA-1、β-globin基因表达受到明显抑制。结论:SOCS-3在造血发育中有重要的调控作用,而对其表达进行改变将在规模化的造血细胞定向诱导研究中发挥重要作用。