1,4-二氢吡啶类化合物对CHO-K1细胞的辐射防护作用

为探究1,4-二氢吡啶类化合物对于CHO-K1细胞的体外防护活性,实验分为DHP(2,6-二甲基-3,5-二乙酯基-l,4-二氢吡啶)给药照射组(DHP)、单纯照射组(Rad)和对照组(Con)。采用中性红法测定DHP对CHO-K1细胞的细胞毒性和照射后细胞的存活率;DCFH-DA法检测活性氧(Radical oxidative spices,ROS)水平;彗星实验测定DNA损伤情况。通过以上指标来评价DHP的辐射防护活性。结果显示,与Con相比,Rad的ROS水平、DNA百分含量和尾距等指标均上升,并且ROS探针荧光强度达到1 800,尾部DNA含量和尾距分别达到3.5%和1.7%,其差异具有统计学意义(p<0.05),提示照射后CHO-K1细胞中产生了过多的ROS和DNA链断裂损伤。与Rad相比,DHP的ROS探针荧光强度降为945、尾部DNA含量和尾距分别降为0.83%和0.7%,3个指标均明显降低,其差异均具有统计学意义(p<0.05),提示DHP给药能显著降低照射引起的CHO-K1细胞ROS水平升高,通过清除照射产生的过多ROS,减轻照射所致的DNA损伤,发挥细胞保护作用。这说明DHP具有良好的辐射防护作用。

辐射对成骨细胞系MC3T3-E1细胞增殖和功能基因表达的影响

目的为了深入了解辐射对成骨细胞的影响,探讨成骨细胞系MC3T3-E1细胞受到辐射后的功能变化。方法将MC3T3-E1细胞体外培养,诱导成骨前体细胞和成骨细胞,经137Csγ射线照射后,用MTT法分析细胞的存活率,用实时定量PCR方法分析ALP、Run X2和M-CSF基因的mRNA表达。结果 MTT实验表明,随照射剂量增加,正常MC3T3-E1细胞生长率明显下降,而经过诱导分化的MC3T3-E1细胞生长率变化越来越不明显。实时定量PCR实验结果表明,经过137Csγ射线照射后,MC3T3-E1细胞的ALP,Run X2和M-CSF基因的mRNA表达出现明显的降低;经过诱导分化为成骨前体细胞的,ALP,Run X2和M-CSF基因的mRNA表达与相应的正常组相比没有明显的规律变化;经过诱导进一步分化成为成骨细胞的,ALP和Run X2表达下降,M-CSF表达呈现升高趋势。结论辐射抑制早期成骨细胞的增殖、发育和分化。随着成骨细胞的分化,辐射对成骨细胞的增殖和生长发育影响减小,但是对成骨细胞发挥调节破骨细胞功能的作用并没有减少。

Wnt传导通路在肿瘤放化疗诱发骨损伤和骨髓脂肪化中的作用

目前，肿瘤已经成为主要威胁人类生命健康的第二大疾病，放射性治疗和化学药物治疗是目前治疗肿瘤的重要手段，肿瘤患者在接受放化疗时，会产生很多严重的副作用，如骨损伤、骨髓脂肪化等。根据近些年的研究文献，介绍了经典Wnt／β—cantenin信号传导通路的研究进展及其对基质干细胞定向分化成骨细胞和脂肪细胞的影响。放化疗诱发的骨损伤和骨髓脂肪化与经典Wnt／β．cantenin的调节作用密切相关，在实验研究中和临床上应用Wnt传导通路拈抗物Dickkopf-1（DKK-1）、硬骨素和分泌型卷曲相关蛋白1（sFRP-1）治疗骨损伤，提示Wnt传导通路是一个潜在的靶位。关注Wnt信号传导通路对放化疗诱发骨损伤和骨髓脂肪化的影响，为治疗这些损伤治疗提供新的靶点。

谷胱甘肽保护的金纳米团簇对HeLa细胞毒性研究

目的探究由谷胱甘肽作为表面保护剂的金纳米团簇（GSH-AuNCs）对宫颈癌HeLa细胞株的毒性影响。方法利用荧光分光光度计测定用含有GSH-AuNCs的培养基处理HeLa细胞后不同时间点的荧光强度，观察HeLa细胞对GSH-AuNCs在1、2、6、12、24h内的摄取情况。同时采用BALB／c荷瘤小鼠进行体内实验，分别腹腔注射0．2ml浓度为3mmol／L的GSH-AuNCs和等体积的蒸馏水（对照组）后24h取出肿瘤组织，通过电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）检测组织中的金元素含量以探究纳米团簇在肿瘤处随时间的摄取情况。最后用噻唑蓝（MTT）比色法研究不同浓度（0．003～0-3mmol／L）的GSH-Au NCs处理HeLa细胞24、48h的细胞毒性。结果HeLa细胞对GSH-AuNCs的摄取率在24h内不断升高，24h时达峰值73．13％。荷瘤小鼠实验表明，腹腔注射GSH-AuNCs24h后，肿瘤组织对GSH-AuNCs的摄取量（320±15）ng／g较对照组（腹腔注射蒸馏水）高，差异具有统计学意义（P〈0．05）。用不同浓度的GSH-AuNCs处理HeLa细胞24h，对细胞存活率有轻微影响，随浓度升高对细胞的抑制作用更为明显，GSH-AuNCs浓度为013mmol／L时的HeLa细胞存活率降为对照组（GSH-AuNCs浓度为0）的86％（P〈0．05）；处理48h时，各浓度组的细胞存活率与对照组间差异均无统计学意义（P〉O．05）。结论虽然GSH-AuNCs在体外和体内均易被细胞和肿瘤组织摄取，但其本身对HeLa细胞并无明显细胞毒性，可安全应用于影像、载药及靶向给药等生物医药领域。