胰腺癌术后免疫治疗抗感染作用机制的探讨

目的:了解免疫治疗剂胸腺肽鄄α1在胰腺癌术后抗感染中的作用机制。方法:选择60例胰腺癌根治术病人,分为用药组和对照组。用药组病人在手术后使用胸腺肽鄄α1,对照组不予使用。观察临床疗效、内毒素和细胞因子(IL鄄2、IL鄄6、IL鄄10和TNF鄄α)水平的变化,以及T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和NK细胞百分率的变化。结果:胰腺癌手术组病人使用胸腺肽α鄄1后肿瘤坏死因子(TNF)鄄α水平明显下降,白介素(IL)鄄2、IL鄄10水平明显升高;手术后1周用药组的CD3+、CD4+百分率较手术前升高,且明显高于对照组。用药组术后1周临床有效率达100%,高于对照组(80%)。结论:胸腺肽鄄α1在胰腺癌术后可提高免疫力的功能,有利于病人恢复。

MBD1 RNA干扰对胰腺癌细胞VIMENTIN、GRP78表达影响的实验研究

目的:观察下调甲基化CpG结合域蛋白1(MBD1)表达后对胰腺癌细胞甲基化相关基因VIMENTIN、GRP78表达的影响,探讨MBD1介导的甲基化调控网络在胰腺癌发生、发展中的重要作用。方法:人工设计合成针对MBD1基因的小分子干扰RNA,构建MBD1-siRNA重组质粒,脂质体法转染人胰腺癌细胞株BxPC-3,RT-PCR和Western印迹法检测转染前后MBD1、VIMENTIN和GRP78mRNA与蛋白表达的变化。结果:MBD1-siRNA重组质粒成功转染胰腺癌细胞系BxPC-3,并筛选得到稳定表达的细胞株。转染后胰腺癌BxPC-3细胞株MBD1、VIMENTIN和GRP78的mRNA与蛋白表达水平均明显降低。结论:MBD1下调可使胰腺癌细胞VIMENTIN和GRP78表达下降;MBD1可能通过调控甲基化相关基因的表达,在胰腺癌的发生、发展过程中起重要的作用。

外科感染性疾病应用胸腺肽α-1对炎症介质和T淋巴细胞的影响

目的 :了解免疫调节剂胸腺肽α 1在外科感染性疾病中的作用机制。方法 :选择 6 0例外科严重感染病人 ,分用药组和对照组。用药组病人在手术后使用胸腺肽α 1 ,对照组不使用免疫制剂。观察临床疗效、检测内毒素和细胞因子 (IL 2、IL 6、IL 1 0和TNF α)、T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8和自然杀伤 (NK)细胞百分率的变化。结果 :感染组病人使用胸腺肽α 1后内毒素、IL 6和TNF α水平明显下降 ,IL 2、IL 1 0水平明显升高 ;手术后第 7天CD3、CD4细胞百分率和CD4 /CD8比值较手术前升高 ,且明显高于对照组手术后水平。结论 :胸腺肽α 1在外科感染性疾病中可提高免疫功能 。

血清肿瘤标记物联合检测在胰腺癌诊治中的作用

目的：观察胰腺癌患者血清肿瘤标记物的表达，分析血清肿瘤标记物联合检测在胰腺癌诊治中的作用。方法：采用荧光免疫分析法和放射免疫法检测９５例胰腺癌患者的８种血清ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＣＡ５０、ＣＡ１５－３、ＣＡ１９－９、ＣＡ７２－４、ＣＡ１２５和ＣＡ２４２肿瘤标记物的表达，并与其他７０例恶性肿瘤患者和７３例良性疾病患者作对照，分析其临床诊断价值。对２５例胰腺癌手术切除患者进行术后肿瘤标记物的连续监测。结果：８种肿瘤标记物中ＣＡ１９－９、ＣＡ２４２、ＣＡ５０和ＣＡ１２５对胰腺癌诊断有较高价值；平行法联合检测可使诊断的灵敏度提高至９０．２％，系列法联合检测可使特异度提高至９３．５％。介入治疗对肿瘤标记物的表达影响不明显，手术切除肿瘤后，肿瘤标记物的水平显著下降。结论：血清ＣＡ１９－９、ＣＡ２４２、ＣＡ５０和ＣＡ１２５的检测对胰腺癌的诊断和随访是有临床价值的，联合检测可以增加诊断的特异度和灵敏度。

围手术期胰腺癌患者细胞免疫功能的表达

目的 :探讨围手术期胰腺癌患者细胞免疫功能的表达。方法 :用直接免疫荧光技术和流式细胞仪检测 36例胰腺癌患者介入治疗前后和手术前后外周血T淋巴细胞亚群CD3+ 、CD4+ 、CD8+ 和NK细胞的百分率。结果 :胰腺癌患者外周血CD3+ 、CD4+ 百分率和CD4+ /CD8+ 比值 ,与对照组相比明显低下 ,在介入治疗后 1周下降更显著 ,但在手术前 (介入后 3～ 4周 )有所恢复 ,在手术后出现再次下降 ;NK细胞比率变化无显著差别。结论 :胰腺癌患者的细胞免疫功能表达低下 ,介入化疗和手术创伤可加重抑制细胞免疫功能的表达 。

胰头癌淋巴结微转移与淋巴结分组关系的初步探讨

目的:探讨胰头癌淋巴结转移和微转移的分布特点,分析微转移与淋巴结分组、分站的关系,由此为确定胰十二指肠切除时的淋巴清扫范围提供理论依据。方法:以手术显微镜法分区域、完整收集并检出20例因胰头癌作区域性胰十二指肠切除术和扩大淋巴结清扫病例标本中的淋巴结,以苏木精-伊红染色和细胞角化蛋白(CK)染色检测淋巴结转移和微转移的发生。结果:在20例677枚淋巴结中,苏木精-伊红染色发现13例87枚淋巴结发生转移,CK染色发现57枚淋巴结存在微转移,总淋巴结转移病例数为16例(80%);微转移发生频率较高的为13组18.9%、14组14.2%、16组9.3%、11组8.6%、17组8.3%、9组4.2%、8组3.7%及12组3.0%;总淋巴结转移发生率较高的是:13组37.4%(46/123)、17组28.3%(13/46)、14组26.4%(37/140)、16组17.0%(18/106)、8组16.1%(10/62)和6组14.7%(5/34)。结论:胰头癌的淋巴结转移发生率甚高,微转移检测影响淋巴结的分组和分站,有助于明确临床分期;行胰头癌根治术时,应注重第13、17、14、16、8和6组淋巴结的清扫。

胰十二指肠切除术后并发腹腔内感染原因的探讨(附100例临床结果分析)

目的:探讨胰十二指肠切除术后腹腔内感染的发生原因和影响因素,为临床治疗提供理论指导。方法:统计近2年半内我院施行的100例胰十二指肠切除术的临床资料,分析腹腔感染发生的影响因素和诊治的注意事项。结果:胰十二指肠切除术后腹腔感染的发生明显高于其它并发症;术前化疗、术后并发胰瘘或肺部感染的患者更易发生腹腔内感染(P<0.01);与手术方式、病灶性质、手术时间、出血量及术前一般状况等关系不密切。结论:术前接受化疗、术后并发胰瘘或肺部感染与腹腔内感染发生密切相关,严格掌握术前化疗指征,积极防治术后胰瘘和肺部感染等并发症,有助于减少胰十二指肠切除术后腹腔内感染的发生。

胰腺癌血清肿瘤标记物的表达及其临床意义

目的 观察胰腺癌患者血清肿瘤标记物的表达 ,以寻找对胰腺癌诊断与随访有价值的血清肿瘤标记物。方法 采用免疫分析法和放射免疫法检测 62例胰腺癌患者血清AFP、CEA、CA5 0、CA15 3、CA19 9、CA72 4和CA12 5共 7种肿瘤标记物的表达 ,并取以胃肠道肿瘤患者和良性疾病患者各 16例作为对照。结果 7种肿瘤标记物中 ,CA19 9、CA5 0和CA12 5对胰腺癌诊断的相对价值较高 ,尤以CA19 9的诊断价值最高 ,灵敏度和特异度分别为 90 .6%和 86.7% ,切除术后监测上述三项指标呈下降趋势。结论 血清CA19 9、CA5 0和CA12 5的检测对胰腺癌的诊断和随访是有价值的。

局部进展期胰腺癌术前介入治疗新方法的应用

目的 通过术前联合化疗药物区域性动脉灌注介入治疗 ,探讨局部进展期胰腺癌介入治疗新方法应用的疗效。方法 94例局部进展期胰腺癌患者术前进入介入治疗组和未介入治疗组 ,观察介入治疗前后肿瘤大小的改变、疼痛缓解率、血清肿瘤标志物的变化和副反应程度 ,通过免疫组化法检测介入治疗对肿瘤细胞凋亡和凋亡基因bcl 2、bax表达的影响 ,并比较两组患者手术切除率。结果 术前介入组和未介入组的手术切除率分别为 4 6 .8%和 2 3.3% (P <0 .0 5 ) ;术前介入治疗组肿瘤细胞调亡明显增加 ,肿瘤细胞bcl 2基因表达明显减少 ,而bax基因的表达显著增加 (P <0 .0 5 ) ;介入治疗能显著降低血清肿瘤标志物水平 ,并能明显缓解患者疼痛 (缓解率为 6 8.6 % ,P <0 .0 5 )。结论 术前介入治疗对胰腺癌肿瘤细胞有明显的杀伤和诱导凋亡作用 ,有助于提高手术切除率和改善患者疾病相关症状 。

可切除性胰腺癌多时相介入综合治疗的临床研究

目的:探讨术前和术后多时相介入化疗在可切除性胰腺癌综合治疗中的临床应用价值。方法:将术前判断可切除性胰头癌病人38例随机进入多时相介入治疗组(试验组)和术后介入治疗组(对照组),通过血清肿瘤标志物的改变和对标本肿瘤组织相关基因检测观察术前介入的疗效和作用机制;随访两组病人的生存期和无瘤生存时间,以及肝转移的发生率比较两种不同治疗方式的疗效。结果:术前介入治疗组部分甲基化相关基因(MBD1、E2F5和RB)的表达明显下降、细胞凋亡比值(bax/bcl-2)明显增加、血清肿瘤标志物水平显著降低,病人疼痛明显缓解(P<0.05);对照组肝转移的发生率明显高于试验组。结论:术前和术后多时相介入化疗能明显抑制胰腺癌肿瘤细胞生长和促进肿瘤细胞凋亡,减少肝转移的发生,是胰腺癌综合治疗的有效措施之一。

利用基因芯片和RT-PCR检测MBD1在胰腺癌中的表达

目的:利用基因芯片和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析胰腺癌中甲基化CpG结合域蛋白MBD1mRNA的表达;探讨MBD1调控胰腺癌基因异常转录表达的分子机制。方法:利用含18000个cDNA克隆的芯片,对3份胰腺混合标本样品(来自2例正常胰腺组织和4例中分化胰腺癌标本)进行基因表达谱对比分析研究;通过RT-PCR验证阳性结果;并进一步检测MBD1在4对胰腺癌和癌旁组织中的表达。结果:两份混合癌组织样品分别有1484和1353条差异表达基因,包括抑癌基因、细胞周期蛋白基因、生长因子及其受体基因、信号传导相关基因、转录调节因子基因等,其中同为上调表达的102条基因中MBD1差异最为显著,而甲基化相关基因如上皮细胞钙黏蛋白CDH1、视网膜母细胞瘤Rb和E2F转录因子5E2F5则呈下调表达,与RT-PCR验证结果一致。MBD1在胰腺癌中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01)。结论:基因芯片技术为分析胰腺癌相关基因表达谱提供了有力的工具。MBD1在胰腺癌中的表达高于正常和癌旁组织。MBD1可能是多个甲基化相关抑癌基因转录表达下降的关键调控点。

胰腺癌组织中差异表达蛋白的筛选与鉴定

目的:筛选并鉴定胰腺癌组织中的差异表达蛋白,并探讨其临床意义。方法:应用双向凝胶电泳技术对12对胰腺癌组织和癌旁组织样品进行分析,筛选出差异表达蛋白质;应用MALDI-TOF-MS/MS技术对差异表达蛋白质进行鉴定。结果:优化的胰腺组织双向凝胶电泳技术具有良好的分辨率和可重复性;应用双向凝胶电泳技术筛选出胰腺癌组织中30个差异表达蛋白质;应用MALDI-TOF-MS/MS技术鉴定了胰石蛋白、钙囊素、热休克蛋白B6等24个蛋白质,其中15个蛋白质在胰腺癌组织中表达上调,9个蛋白质表达下调。结论:双向凝胶电泳、生物质谱等蛋白质组学技术在胰腺癌的基础研究中有重要价值和应用前景,有助于筛选蛋白标志物和阐明分子发病机制。胰腺癌组织中有多个异常表达蛋白质,这些蛋白质与胰腺癌的发生相关,可能成为胰腺癌蛋白标志物和药物治疗的靶蛋白。

胰腺癌血清肿瘤标记物联合检测的临床研究

目的 观察胰腺癌患者血清肿瘤标记物的表达 ,寻找对胰腺癌诊断与随访的有价值血清肿瘤标记物。方法 采用免疫分析法和放射免疫法检测 92例胰腺癌患者的血清 AFP、CEA、CA5 0、CA15 -3、CA19-9、CA72 -4、CA12 5和 CA2 42共 8种肿瘤标记物的表达 ,并与其它恶性肿瘤患者 70例和良性疾病患者 73例作对照 ,分析其临床诊断价值。结果 8种肿瘤标记物中 CA19-9、CA2 42、CA5 0和 CA12 5对胰腺癌诊断的相对价值较高 ,尤以 CA19-9的诊断价值最高 ,灵敏度和特异度分别为82 .6 %和 81.3% ,平行法联合检测提高灵敏度至 90 .2 % ,系列法联合检测提高特异度 93.5 % ,2 5例获手术切除者术后监测上述四项指标呈下降趋势。结论 血清 CA19-9、CA2 42、CA5 0和 CA12 5的检测对胰腺癌的诊断和随访是有价值的 。

甲基化CpG结合域蛋白1在胰腺癌组织中的表达和意义

目的:检测甲基化CpG结合域蛋白1(MBD1)蛋白在胰腺癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:应用S-P免疫组织化学法检测38例胰腺癌、17例胰腺癌旁组织、8例胰腺良性肿瘤、3例慢性胰腺炎和6例正常胰腺组织中MBD1蛋白的表达。结果:MBD1在胰腺癌组织、正常胰腺组织、胰腺良性肿瘤、胰腺癌旁组织中的表达阳性率分别是76.32%(29/38)、16.67%(1/6)、25.0%(2/8)、29.41%(5/17),3例慢性胰腺炎标本中未见表达;胰腺癌阳性表达率明显高于正常胰腺、慢性炎症、良性肿瘤和癌旁对照组织(P<0.05)。MBD1表达水平的高低与病人的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和TNM分期无显著性差异(P>0.05);而与淋巴结转移密切相关,有淋巴结转移者胰腺癌组织MBD1的表达阳性率为92.31%(24/26),高于无淋巴结转移者的41.67%(5/12)(P<0.01)。结论:胰腺癌中MBD1呈高水平表达,并与胰腺癌的高转移侵袭活性有关,其机制可能与MBD1介导抑制多个甲基化相关抑癌基因的表达有关。MBD1的转录调控机制有待进一步研究。

MDR1 siRNA对胰腺癌细胞株BxPC-3耐药性影响的实验研究

目的:观察阻断多药耐药基因1(MDR1)表达后胰腺癌细胞对化疗药物敏感性的变化,探索提高胰腺癌化疗疗效的新方法。方法:采用RNA干扰技术,构建MDR1 siRNA重组质粒,脂质体介导转染人胰腺癌细胞株BxPC-3,并筛选稳定转染细胞克隆,RT-PCR和Western印迹法检测MDR1 mRNA和蛋白的表达变化。将细胞接种于裸鼠,观察移植瘤对化疗药物吉西他滨敏感性的变化。结果:转染MDR1 siRNA质粒后胰腺癌细胞株BxPC-3MDR1 mRNA与蛋白表达水平明显降低。体内实验结果显示,将转染前后的细胞接种于裸鼠,转染组移植瘤对化疗药物吉西他滨更为敏感(P<0.05)。结论:通过RNA干扰技术,可在转录和翻译水平降低MDR1在胰腺癌细胞株BxPC-3中的表达,并能提高细胞对化疗药物的敏感性。

胰腺癌P-gp的表达及其临床相关影响因素的分析

目的:研究胰腺癌P-gp的表达及临床相关因素和术前介入化疗对P-gp表达的影响。方法:采用免疫组化方法检测胰腺癌标本中P-gp的表达水平,分析胰腺癌P-gp的表达与肿瘤分期、分化、分级、病人生存时间等临床因素之间的关系,并探讨术前介入化疗对P-gp表达的影响。结果:胰腺癌P-gp的表达明显高于正常胰腺组织。胰腺癌P-gp的表达在性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度、TNM分期以及术前是否行介入化疗方面无显著性差异,P-gp低水平表达病人的平均生存时间略长于中等至高表达的病人。结论:胰腺癌本身就具有原发性耐药的特性,表现为P-gp的高表达。术前介入化疗与胰腺癌继发性耐药的诱发无明显相关性。

碳纳米管作为载体在生物医学中的应用

碳纳米管是一种新型的纳米材料,随着对碳纳米管功能化研究的深入,碳纳米管在生物医学领域的应用也在拓展。本文就其作为载体携带多肽、蛋白质、核酸、疫苗和药物进入细胞发挥生物医学作用作一综述。

加贝酯对金黄地鼠胆囊及Oddi括约肌收缩的影响

加贝酯(Gabexate Mesilate)是一种非肽类蛋白水解酶抑制剂,临床上广泛应用于治疗各种胰腺炎,但它对胆囊及Oddi括约肌的收缩有无抑制作用,能否用于胆囊炎、胆石症发作时的治疗,目前尚不清楚.我们通过离体实验,观察了加贝酯对金黄地鼠胆囊及Oddi括约肌收缩的影响.

胰头癌切除标本淋巴结检出方法的比较

目的 寻找一种简便、全面的检出胰头癌根治性术后标本中淋巴结的方法 ,以有利于准确评定其病理分期。方法 对 4 2例根治性切除术后的胰头癌标本分别采用常规病理取材法、手术显微镜法、清洗法和简化连续切片法寻找或鉴别淋巴结 ,并进行比较。结果 清洗法和简化连续切片法操作繁复、费时 ,不适合实际应用。手术显微镜法所找到的淋巴结数约为常规病理取材法的 3倍。 2 4例采用手术显微镜法寻找淋巴结的胰头癌标本中 ,证实 17例伴有淋巴结转移 (转移率为 70 .8% ) ,而常规病理取材法组证实的转移率为 5 0 % (P<0 .0 1)。并且淋巴结转移和淋巴结大小无关 ,在发生转移的淋巴结中 <5 mm的淋巴结占 37.2 %。结论 手术显微镜法是一种简便、经济、有效的方法。

进展期胰腺癌的外科治疗——附514例分析

目的 探讨对进展期胰腺癌积极进行外科切除治疗的价值及提高胰腺癌患者生存率的相关因素。方法 回顾性分析华山医院1970～2001年收治的514例行手术治疗的胰腺癌患者,其中117例行Whipple手术或区域性胰十二指肠切除术,分析不同阶段、不同治疗技术条件下,患者的生存率及其相关因素。结果 70年代、80年代和90年代胰头癌的切除率分别为9.5％、16.6％和31.0％。90年代后期采用三步法（减黄→介入→手术）,使手术切除率进一步提高,达37.1％。三个年代的1年生存率分别为50.0％、57.1％和84.1％,3年生存率分别为25.0％、28.5％和39.7％,5年生存率分别为0、9.5％和10.2％。手术切除率和生存率均有明显升高,与诊断技术的进步和手术方法、技巧的改进及综合治疗的运用有关。结论 对进展期胰腺癌积极进行手术治疗,能改善患者生活质量,提高生存率。