泛素结合酶2S在恶性黑素瘤中的表达及其对黑素瘤细胞生物学行为的影响

目的探讨恶性黑素瘤(MM)组织中泛素结合酶2S(UBE2S)的表达及其对黑素瘤细胞生物学行为的影响。方法应用免疫组化检测UBE2S在128例原发性MM、64例转移性MM、16份非瘤组织(8份瘤旁组织、8份正常表皮组织)芯片中的表达。实时定量PCR检测A375、MUM-2B及MUM-2C黑素瘤细胞株中UBE2S mRNA表达水平。将黑素瘤A375及MUM-2B细胞株分别分为两组,干扰组使用含有UBE2S RNA干扰序列的慢病毒转染,对照组使用含有对照序列的慢病毒转染,72 h后实时定量PCR检测A375和MUM-2B黑素瘤细胞株中UBE2S mRNA表达水平。用试剂盒检测各组细胞caspase3/7活性,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率及周期分布;应用Transwell法及Western印迹分别检测敲减UBE2S对A375细胞迁移侵袭能力及N-钙黏蛋白表达的影响。使用SPSS 22.0软件进行统计学分析,正态分布数据组间比较采用独立样本t检验,计数资料采用卡方检验,非正态分布数据比较采用Mann-Whitney U检验,通过Spearman系数评估UBE2S表达水平与T分期的相关性。结果UBE2S在98例(51.0%)MM组织中高表达,16例非瘤组织中均低表达,两组间高表达率差异有统计学意义(χ^2 = 11.905,P<0.01);UBE2S表达水平与肿瘤T分期呈负相关(ρ=-0.210,P = 0.043)。A375、MUM-2B、MUM-2C细胞间UBE2S mRNA相对表达量差异有统计学意义(F = 817.228,P<0.01)。Caspase3/7活性在干扰组A375细胞(t = 17.572,P<0.01)与干扰组MUM-2B细胞(t = 24.552,P<0.01)分别较相应对照组明显增加;干扰组A375细胞较对照组G1期细胞比例明显升高(t = 7.365,P<0.01),而S期比例明显降低(t =-9.190,P<0.01),G2/M期无明显变化(t =-0.227,P>0.05);干扰组MUM-2B细胞G1期(t = 12.676,P<0.01)、G2/M期(t = 13.045,P<0.01)细胞比例高于对照组,但S期比例低于对照组(t =-15.718,P<0.01)。Transwell实验显示,干扰组较对照组A375细胞迁移(t =-35.727,P<0.05)及侵袭(t =-125.000,P<0.01)能力降低。Western印迹检测显示,干扰组较对照组A375细胞N-钙黏蛋白表达下调。结论UBE2S在黑素瘤组织过表达,其表达水平与肿瘤分期相关;敲减UBE2S对黑素瘤细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移及侵袭能力均有影响,并且可能通过调控N-钙黏蛋白表达促进MM细胞转移。

反射性共聚焦显微镜对早期蕈样肉芽肿定位诊断与疗效监测的研究

目的分析早期蕈样肉芽肿(MF)皮损的反射性共聚焦显微镜(RCM)与组织病理学特征的一致性,探讨RCM作为病理学诊断早期MF的辅助价值及动态监测治疗反应的可行性。方法2014年1月至2018年1月在杭州市第三人民医院皮肤科门诊收集临床疑诊MF病例40例,男26例,女14例,年龄(47.0±17.6)岁。根据总结的早期MF的RCM特征,对活检部位进行初步定位后行组织病理学检查,对比MF的RCM与病理特征。对MF确诊病例进行窄谱中波紫外线联合干扰素治疗,运用RCM对靶向皮损跟踪随访,9个月后评价疗效。结果在40例临床疑诊MF病例中,根据RCM特征初步诊断典型MF 8例,疑似MF18例,排除14例;根据MF病理学特征诊断典型MF12例,疑似14例,排除14例。一致性分析显示,RCM特征分类与病理诊断结果的Kappa系数为0.848,P<0.01。RCM与组织病理学特征之间表皮低折光细胞浸润的相关性最高(Kappa系数=1,P=0.005),其次是红斑期的真皮纤维化(Kappa系数=0.714,P=0.035)。MF的RCM特征随着治疗的进行逐步恢复正常,但直至临床皮损完全缓解,非典型淋巴细胞依然存在。结论RCM技术可用于早期疑诊MF皮损的病理取材定位,同时可尝试作为一种动态监测MF疗效的方法。

血管内NK/T细胞淋巴瘤二例

血管内NK/T细胞淋巴瘤(intravascular NK/T-cell lymphoma,IVNKTL)是一种具有NK/T细胞免疫表型的血管内淋巴瘤,临床罕见。IVNKTL与EB病毒感染相关,临床呈高度侵袭性,与另一种EB病毒相关的结外NK/T细胞淋巴瘤,鼻型(extranodal NK/T-cell lymphoma,nasal type,ENKTCL)相似。IVNKTL与ENKTCL的区别在于,前者肿瘤细胞局限于血管腔内,而后者多为围血管或侵血管肿瘤细胞浸润[1]。本文报道2例IVNKTL,其中1例继发于ENKTCL。