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鸡β防御素13基因的克隆、表达及其对猪源致病菌的抑制作用研究
被引量:
1
1
作者
赵洪
向乾春
+7 位作者
彭中美
鄢宴
补小枘
高云洁
王逢秋节
刘清清
吴倩
陈希文
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2021年第8期119-124,共6页
为了探究鸡β防御素13(Gal-13)基因的克隆表达及对常见猪源致病菌的抑制活性,试验采用原核表达的方法,利用RT-PCR法,使用试剂盒从鸡肝脏组织中进行Gal-13基因的克隆,利用原核表达载体pGEX-4T-1构建重组表达质粒,再将重组质粒转化大肠杆...
为了探究鸡β防御素13(Gal-13)基因的克隆表达及对常见猪源致病菌的抑制活性,试验采用原核表达的方法,利用RT-PCR法,使用试剂盒从鸡肝脏组织中进行Gal-13基因的克隆,利用原核表达载体pGEX-4T-1构建重组表达质粒,再将重组质粒转化大肠杆菌TOP10诱导表达获得目的蛋白,并对诱导条件进行优化,然后采用牛津杯法对目的蛋白进行体外抑菌试验,检测目的蛋白对猪源大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、副猪嗜血杆菌及链球菌的抑制活性。结果表明:克隆表达得到Gal-13基因,构建得到pGEX-4T-1-Gal-13表达质粒,转化大肠杆菌TOP10诱导表达,目的蛋白以包涵体形式存在,最佳诱导表达温度为37℃,最佳诱导表达时间为5 h,IPTG最佳诱导浓度为0.3 mmol/L,该蛋白对猪源大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、副猪嗜血杆菌及链球菌均有一定抑制作用,平均抑菌圈直径分别为1.25,1.09,1.03,1.45 cm。说明Gal-13能够利用原核表达系统在大肠杆菌TOP10中诱导表达,且对4种猪源致病菌有一定的抑制作用。
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关键词
成熟肽
基因克隆
原核表达
条件优化
包涵体洗涤
体外活性
猪源致病菌
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题名
鸡β防御素13基因的克隆、表达及其对猪源致病菌的抑制作用研究
被引量:
1
1
作者
赵洪
向乾春
彭中美
鄢宴
补小枘
高云洁
王逢秋节
刘清清
吴倩
陈希文
机构
绵阳师范学院动物疫病防控与健康养殖工程技术研究中心
四川生猪重大疫病监测与防控工程研究中心
出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2021年第8期119-124,共6页
基金
绵阳市科技局项目(16N-01-6/2018SFJD001)
绵阳师范学院项目(PY-2016-A01)。
文摘
为了探究鸡β防御素13(Gal-13)基因的克隆表达及对常见猪源致病菌的抑制活性,试验采用原核表达的方法,利用RT-PCR法,使用试剂盒从鸡肝脏组织中进行Gal-13基因的克隆,利用原核表达载体pGEX-4T-1构建重组表达质粒,再将重组质粒转化大肠杆菌TOP10诱导表达获得目的蛋白,并对诱导条件进行优化,然后采用牛津杯法对目的蛋白进行体外抑菌试验,检测目的蛋白对猪源大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、副猪嗜血杆菌及链球菌的抑制活性。结果表明:克隆表达得到Gal-13基因,构建得到pGEX-4T-1-Gal-13表达质粒,转化大肠杆菌TOP10诱导表达,目的蛋白以包涵体形式存在,最佳诱导表达温度为37℃,最佳诱导表达时间为5 h,IPTG最佳诱导浓度为0.3 mmol/L,该蛋白对猪源大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、副猪嗜血杆菌及链球菌均有一定抑制作用,平均抑菌圈直径分别为1.25,1.09,1.03,1.45 cm。说明Gal-13能够利用原核表达系统在大肠杆菌TOP10中诱导表达,且对4种猪源致病菌有一定的抑制作用。
关键词
成熟肽
基因克隆
原核表达
条件优化
包涵体洗涤
体外活性
猪源致病菌
Keywords
mature peptide
gene cloning
prokaryotic expression
condition optimization
inclusion body washing
in vitro activity
pig-derived pathogen
分类号
S859.797 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡β防御素13基因的克隆、表达及其对猪源致病菌的抑制作用研究
赵洪
向乾春
彭中美
鄢宴
补小枘
高云洁
王逢秋节
刘清清
吴倩
陈希文
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2021
1
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职称材料
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参考文献
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