四川省炉霍县牦牛源蜱传斑点热群立克次体和无形体分子检测及遗传进化分析

【目的】了解四川省炉霍县牦牛体表寄生蜱的种类及其斑点热群立克次体(Spotted fever group Rickettsia,SFGR)和无形体的感染情况。【方法】在炉霍县6个乡采集牦牛体表的蜱,经形态学初步鉴定后提取蜱基因组DNA,采用PCR技术分别扩增蜱ITS⁃2、SFGR OmpB和无形体16S rRNA基因部分片段,对阳性产物进行测序、比对及构建进化树,从而确定蜱的种类及其SFGR和无形体的感染情况。【结果】在820份蜱样本中,只包含青海血蜱(Haemaphysalis qinghaiensisus,29/820)和微小扇头蜱(Rhipicephalus micro⁃plus,791/820)。总共有408份蜱样本被检出SFGR,只检出Candidatus Rickettsia longicornii 1种SFGR,总感染率为49.8%(408/820)。本次调查的6个乡均检出SFGR,不同乡之间SFGR感染率的差异极显著(χ^(2)=111.524,P=0.000<0.01)。青海血蜱和微小扇头蜱的SFGR感染率分别为44.8%(13/29)和49.9%(395/791),差异不显著(χ^(2)=0.292,P=0.589>0.5)。有5个乡检出无形体,共检出Anaplasma bovis、A.marginale、A.platys和A.phagocytophilum 4种无形体,总感染率为30.9%(253/820),不同乡之间蜱样本无形体感染率差异极显著(χ^(2)=139.825,P=0.000<0.01)。青海血蜱和微小扇头蜱的无形体感染率分别为6.9%(2/29)和31.7%(251/791),差异极显著(χ^(2)=8.087,P=0.004<0.01)。SFGR与无形体混合感染率为18.8%(154/820)。【结论】炉霍县存在青海血蜱和微小扇头蜱,还携带SFGR和多种无形体,应做好当地蜱传斑点热群立克次体和无形体的防治工作。

4种狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒的评价

为评价国产狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒的性能,选择4种国产品牌ELISA抗体检测试剂盒,分别检测463份已用荧光抗体病毒中和试验(FAVN)测知狂犬病病毒抗体效价的犬血清,用Kappa检验和配对卡方检验评价ELISA试剂盒与FAVN检测结果的一致性和差异性,计算ELISA试剂盒的诊断敏感性、诊断特异性、符合率和重复性等,并比较4种试剂盒的使用范围、样品稀释倍数等参数。结果显示:经Kappa检验,4种试剂盒与FAVN一致性均为弱;经配对卡方检验,A、B试剂盒与FAVN检测结果的差异不显著(P>0.05),而C、D试剂盒差异显著(P<0.05)。诊断敏感性,D试剂盒最高,B试剂盒最低;4种试剂盒诊断特异性均较低,为29.5%~57.7%;各试剂盒符合率相当,为71.3%~72.8%。综合敏感性、特异性、重复性等考量因素,得出C试剂盒更能满足免疫后抗体检测需求,A试剂盒也较好,两者可作为候选试剂盒。结果表明,4种国产狂犬病病毒ELISA试剂盒的诊断敏感性、诊断特异性、批间稳定性等性能需进一步提高,以满足基层免疫抗体监测需求。

四川畜间布鲁氏菌病流行形势与防治策略

布病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患的慢性传染病。为保护人民群众身体健康,保障畜牧业生产健康发展,进一步加大动物布病防治工作力度,提高防治能力和科学防治水平,本文对当前四川省布病流行情况、存在问题等进行全面、系统分析,提出科学的防治对策。

呕吐毒素的毒性特征及治理措施

呕吐毒素,又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇,是饲料中常见的霉菌毒素之一,因理化性质稳定,易通过食物链传递引起畜禽中毒,带来免疫功能损伤甚至免疫抑制,对畜禽养殖业造成严重的经济损失。本文着重对呕吐毒素的污染情况、毒性特征和治理措施等进行了综述,旨在为降低畜禽养殖中呕吐毒素的危害提供参考。

丘陵地区适度规模养殖废弃物资源化利用分析

随着畜禽养殖业的快速发展,养殖废弃物资源化利用技术却相对滞后。因此适度规模养殖场迫切需要经济、高效、节能、技术先进可靠的养殖业废弃物处理工艺和技术。本文通过调查丘陵地区农村畜禽养殖及废弃物利用状况,探索总结适合丘陵地区不同种类的适度规模畜禽养殖废弃物的利用措施。

川中丘陵地区牛羊产业发展分析

近年来,国家提出畜牧业高质量发展部署,四川也相继出台振兴川牛羊高质量发展的十一条措施。因此,该文以四川省中部丘陵地区为视角,分析川牛羊产业发展具备的优势、面临的主要问题及提出建立产业稳定发展长效机制的对策和建议,以期为我国丘陵地区牛羊产业发展提供理论参考。

2019-2022年四川省犬细粒棘球绦虫感染流行病学调查

为了解四川省犬细粒棘球绦虫感染情况,评估防控措施的有效性,2019-2022年对四川省35个棘球蚴病流行县,采集犬粪便通过抗原夹心ELISA检测方法开展犬只棘球绦虫感染情况监测。结果显示:2019-2022年,全省35个棘球蚴病流行县的犬细粒棘球绦虫年均感染率分别为3.06%(159/5 200)、2.11%(123/5 826)、1.33%(83/6 227)、1.12%(67/5 968),不同年份间的犬感染率差异有统计学意义(P<0.05);甘孜州、阿坝州、凉山州、雅安市的年均犬感染率分别为1.30%(166/12 673)、3.09%(205/6 627)、1.48%(35/2 367)、1.78%(26/1 464),阿坝州感染率明显较高(P<0.05)。结果表明:四川省犬细粒棘球绦虫感染总体呈下降趋势,但在川西高原草原牧区依然较严重,对当地家畜及人类构成了较大威胁,需要继续加强犬棘球绦虫感染的控制,通过犬只驱虫、犬粪便无害化处理,从源头做好棘球蚴病防控工作,保障该地区家畜养殖业的健康发展和人类健康安全。

四川九龙县牦牛源蜱感染SFGR分子流行病学调查

为了解四川省九龙县牦牛体表寄生蜱的种类及其斑点热群立克次体(SFGR)的感染情况。采集牦牛体表的蜱,经形态学初步鉴定后,提取蜱总DNA,PCR扩增蜱ITS-2基因及SFGRompA、ompB基因,并对扩得的阳性产物进行测序和构建进化树分析,从而确定蜱及其携带SFGR的种类。在九龙县3个乡镇共采集到蜱585只,其中微小扇头蜱占52.65%(308/585)、卵形硬蜱占32.99%(193/585)、锐跗硬蜱和西藏革蜱分别占8.89%(52/585)和5.50%(32/585)。所有蜱中有374只检出SFGR,总感染率为63.93%(374/585),其中半农牧区(70.60%)的感染率极显著的高于纯牧区(45.10%)(P<0.01)。本研究首次对九龙县牦牛体表寄生的蜱虫种类及SFGR流行情况进行了调查,蜱传SFGR感染率较高且感染的SFGR主要为饶氏立克次体。

猪瘟病毒的分子结构及其新型疫苗研究

猪瘟是危害养猪业最大的烈性传染病之一,被国际兽疫局(OIE)列为A类法定动物传染病。国家对猪瘟的预防和控制一直都十分重视,尽管中国很早就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗,并在预防猪瘟的发生中起到了积极作用,但由于近年来猪瘟的流行和发病特点发生了很大的变化,其流行形式从频发的大流行转变为周期性、波浪形的地区性散发性流行,出现了所谓非典型猪瘟、温和型猪瘟和无名高热综合征等,给养猪业造成了严重的经济损失。本文主要介绍了猪瘟病毒基因组结构与功能、病毒基因编码的蛋白产物以及猪瘟病毒新型疫苗的研究进展,为猪瘟的防控提供新的思路。

四川省重点包虫病流行区土壤水等环境中虫卵污染情况监测

本试验通过已经建立的荧光PCR方法,对四川部分地区自然环境中的包虫虫卵进行检测,采集包虫流行地区石渠县、色达县、甘孜县、炉霍县、天全县和宝兴县的环境样本,提取样本总DNA,采用荧光PCR对细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫ND1基因进行检测;结果显示,共采集犬粪850份,阳性82份,阳性率12. 4%;土壤61份,阳性8份,阳性率13. 1%;犬毛39份,阳性3份,阳性率7. 7%;水样80份,均未检出。本次调查显示,犬粪、土壤以及犬毛均检出包虫虫卵DNA,土壤是一个不可忽视的传播因素。提示有必要加强对环境中虫卵的监测并筛选杀灭环境中虫卵消毒剂,以确保包虫病流行区域人和家畜的安全。

川西高原2012—2018年间家畜包虫病流行病学调查

为了解2012—2018年间四川省动物包虫病流行状况,评估近年来所采取防控措施的效果。犬粪采用包虫抗原ELISA法检测,牛(包括牦牛)和羊采取屠宰后观察、剖检脏器上的包囊进行判定,分别统计犬和牛、羊包虫感染率。结果显示:犬平均阳性率由2012年的23.34%下降到2018年的8.12%;牛平均感染率由2012年的17.32%下降到2018年的5.36%;羊平均感染率由2012年的8.17%下降到2018年的3.68%。表明四川省包虫病疫区通过实施牛、羊包虫疫苗免疫,犬只精准驱虫和脏器无害化处理的综合防控模式,疫区家畜包虫病阳性率显著降低。

反向遗传操作技术在甲型流感病毒中的应用

反向遗传操作技术是最近几年迅速兴起的一项分子生物学技术,它将解决对RNA病毒基因组难以操作的多年难题,并为负链RNA病毒的研究开创新的途径,使负链RNA病毒得以深入认识。目前,该技术已应用于多种负链RNA病毒的研究,特别在探寻甲型流感病毒基因组复制、转录和研发新型疫苗上发挥着重要作用,使甲型流感病毒研究工作取得了巨大进步,为大流感的再次流行及防控增添了新的研究方法和防控策略。文章就甲型流感病毒基因组特征、致病机理、新型疫苗及病毒载体的研究等最新进展进行了综述,重点介绍了反向遗传操作技术在甲型流感病毒中的应用。

四川省“十三五”期间畜间包虫病防治回顾与思考

川西高原藏区是全国包虫病流行最严重的地区之一,党和国家高度重视包虫病的防治。四川省于2015年10月启动石渠县包虫病综合防治试点工作,并在“十三五”期间向全省大力推广畜间包虫病防治“238”石渠模式。石渠县及全省35个疫区县犬只平均感染率分别由初期的35.0%和25.4%下降到目前的0.9%和4.1%,牛羊等家畜患病率分别由初期的45.0%和4.8%下降到目前的8.5%和3.5%;畜间包虫病防治专业人员技能合格率分别由初期的45.3%和52.6%上升到目前的93.3%和90.1%,群众包虫病防治知识知晓率分别由初期的31.2%和35.8%上升到目前的88.9%和86.7%。全省所有疫区县均达到部省下达的防治目标要求。

突发高热病猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒的检出及变异分析

某猪场突发猪高热病后,为确切诊断和弄清病原,采用Marc-145细胞分离病料中的病原,并通过血清中和试验、血凝试验、RT-PCR检测和变异毒株鉴定等方法进行病原鉴定,以及对其ORF7基因和NSP2部分基因开展序列分析。结果表明：从该猪场分离到了1株可使Marc-145细胞产生病变的病毒,其能与美洲型抗PRRSV血清特异性中和,而不与鸡红细胞凝集;RT-PCR检测扩增出了ORF7基因及NSP2部分基因片段;该病毒ORF7基因与PRRSV美洲型毒株VR2332的同源性为93.3%~99.5%,其系统进化树显示它们属同一个大分支;而NSP2基因编码蛋白序列与美洲型毒株VR2332及早期国内分离株比较存在30个氨基酸的缺失。结果说明该猪场高热病病原为高致病性PRRSV变异毒株,且与自2006年以来国内分离的高致病性PRRSV高度同源。

猪繁殖与呼吸综合征RT-PCR诊断及ORF5基因原核表达载体的构建

参照GenBank上发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒核苷酸序列,利用生物软件,设计1对ORF5基因的特异性引物,用Trizol法提取病料的总RNA,进行RT-PCR扩增后获得目的基因,将其连接到PMD18-T载体后转入大肠杆菌Top10细胞中,抽提质粒并双酶切,回收目的基因,然后克隆于原核表达载体PET-32a(+)中,通过抗性筛选、酶切鉴定和序列测定,证实得到含有目的基因的阳性克隆,本实验成功构建了猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州分离株ORF5基因原核表达载体PET-ORF5,为进一步研究ORF5基因的原核表达及猪繁殖与呼吸综合征的基因工程疫苗的研究奠定了基础。

目前我国猪瘟的流行现状及防控策略

国家对猪瘟的预防和控制一直都十分重视,尽管我国很早就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗,并在预防猪瘟的发生中起到了重要作用,但由于近年来猪瘟的流行和发病特点发生了很大的变化,其流行形式从频发的大流行转变为周期性、波浪形的地区性散发性流行,出现了所谓的非典型猪瘟、温和型猪瘟和无名高热综合征等,以及在出现上述种种迹象的地区和猪场往往同时表现无法解释的免疫失败。当前,猪瘟仍是世界养猪业的一大威胁,给养猪业造成了严重的经济损失。本文主要介绍了猪瘟的传播途径、近年来猪瘟在流行时间、流行形式、流行病型的变化以及当前猪瘟的不同表现症状、病理变化及防制策略,为猪瘟的免疫监测及防控体系的建立提供参考。

宁泌泰联合坦索罗辛对双J管综合征的预防作用

目的：探讨宁泌泰联合坦索罗辛治疗输尿管镜钬激光碎石术后留置双J管患者的临床疗效。方法选择本院2010年1月至2013年1月收治的行输尿管镜钬激光碎石术的患者117例，患者术后均留置双J管，按使用药物的不同分组：单用坦索罗辛组（30例），术后服用α1受体阻滞剂坦索罗辛每日1次，每次0.4 mg；单用宁泌泰组（29例），术后服用宁泌泰每日3次，每次1.52 g；坦索罗辛组联合宁泌泰（联合用药组，30例），术后给予坦索罗辛联合宁泌泰，手术对照组（28例），两种药物都不应用。术后约3 d拔除尿管，保留双J管1个月，3组用药时间均为1个月，评估各组患者不同泌尿系统症状分级、疼痛指数分级患者数及肉眼血尿发生率。结果3种不同治疗方法改善症状分级（χ2＝22.038，P＝0.000）、疼痛指数分级（χ2＝9.876，P＝0.020）、血尿（χ2＝8.000，P＝0.046）患者数方面比较差异均有统计学意义，联合用药组无症状和轻度症状分级患者数较坦索罗辛组、宁泌泰组、手术对照组明显增多（无症状：14比6、3、2例，轻度：13比9、5、4例），疼痛指数分级＞Ⅱ度患者数（7比9、14、17例）、血尿发生率〔26.6%（8/30）比56.7%（17/30）、58.6%（17/29）、53.6%（15/28）〕均较坦索罗辛组、宁泌泰组、手术对照组减少。坦索罗辛和宁泌泰联合用药在改善症状方面具有协同增强效应，在减轻疼痛发生率方面较单用坦索罗辛更有优势，并可降低并发症的发生率。结论宁泌泰联合坦索罗辛可有效预防双J管综合征。

四川奶牛养殖区域不同规模类型场群布鲁菌病流行主要影响因素调查

布鲁菌病(简称布病)是由布鲁菌引起的重要的人兽共患病,是一种细胞内寄生的病原微生物,主要侵害动物的生殖系统,引起母畜不孕、怀孕母畜流产、公畜睾丸炎等,并严重影响着人类的健康[1]。自20世纪60年代至90年代,我国多个省市区人畜布病都达到了国家规定的控制标准,近年来,随着各类畜禽及农产品流通和交易不断加大,与之配套的检验检疫工作却没有发挥应有作用,加之养殖场管理混乱无序、管理观念落后等,造成动物布病呈现强势反弹[2]。

输尿管结核3例并文献复习

目的探讨输尿管结核的诊治方法。方法回顾分析贵州省人民医院2017年1月至2019年1月收治的3例输尿管结核病例资料并复习相关文献。结果 1例以输尿管狭窄行多次输尿管镜检查、狭窄段球囊扩张、输尿管支架管引流治疗,最终行肾输尿管全长切除术;1例行腹腔镜肾输尿管全长切除术;第3例行输尿管镜检查、狭窄段内切开、输尿管活检、输尿管支架管引流术。3例T细胞斑点实验(T-SPOT.TB)均阳性,1例尿结核杆菌DNA阳性。术后病理结果均为输尿管结核。随访8~16个月,平均12个月,预后良好。结论 T-SPOT.TB、多层螺旋CT、尿结核杆菌DNA,具有较高的诊断价值,成为诊断泌尿系结核主要的手段;输尿管镜有助于提高诊断率,可考虑应用于临床;对于输尿管结核而言,早期诊断、引流及有效的抗结核治疗可保护肾脏功能,减少肾脏的丢失。