ATP发光法在医学及卫生安全领域的研究进展

ATP生物发光检测法是一种基于萤火虫发光原理的快速检测方法,经常被用于检测样本中的ATP含量,从而对生物体的数量和活性进行评估。具有兼容性广、反应快速、技术成熟等优点,是一种良好的检测工具。如今,ATP生物发光检测法已被应用于各个领域,在卫生监督、科学研究、医学诊疗等领域发挥着重要的作用。本文将对ATP生物发光检测法在医疗及卫生安全领域的研究进展进行简要介绍,并对其优缺点进行论述。

蓝氏贾第鞭毛虫核苷二磷酸激酶基因的克隆与表达

以蓝氏贾第鞭毛虫中国C2株基因组DNA为模板,PCR扩增蓝氏贾第鞭虫核苷二磷酸激酶(Gl NDPK)基因编码序列,连接至p ET28a质粒,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)JM109,挑取阳性克隆进行鉴定与测序。将p ET28a-Gl NDPK转化至E.coli BL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白表达情况。用8 mol/L尿素溶解包涵体并收集上清,镍离子亲和层析进行纯化,蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白的抗原性。结果显示,PCR扩增获得了长度约1 200 bp的蓝氏贾第鞭毛虫中国C2株Gl NDPK基因编码序列。构建的重组质粒p ET28a-Gl NDPK经PCR鉴定、单酶切鉴定和测序,结果均与预期相符。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白以包涵体的形式表达,相对分子质量(Mr)约为40 000,与预期结果大致一致。Western blotting结果显示,该重组蛋白可被His标签抗体识别。提示获得了蓝氏贾第鞭毛虫中国C2株Gl NDPK基因编码序列及其重组表达蛋白。